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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱(chēng)：雙歧桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013557
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類(lèi)：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
Human flagellin ELISA Kit 人鞭毛蛋白Multi-class antibodies： 48T
Smoothened/SMOH 跨膜蛋白Smoothened抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
(Mouse ovarian cancer marker-CA125) ELISA Kit 小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125 96T
NSF N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感融合蛋白抗體 0.2ml
phospho-Bim (Ser55) 磷化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 0.1ml
Smoothened/SMOH 跨膜蛋白Smoothened抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
TR(Human Testoterone recepter) ELISA Kit 人睪酮受體Multi-class antibodies： 48T
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體Multi-class antibodies： 1ml
Rhesus antibody Rh Lambda Light Chain λ輕鏈抗體 0.1ml
FN ELISA Kit 大鼠纖連蛋白 96T
PROSAAS 枯草溶菌轉(zhuǎn)化1抑制劑抗體 0.2ml
CCDC16 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白16抗體 0.2ml
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體Multi-class antibodies： 1ml
Donkey rabbit IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
GJA8 間隙連結(jié)蛋白50/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB10 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族10抗體 0.1ml
TRT/TERT/PE 熒光PE標(biāo)記端粒抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
Phospho-PKC gamma (Thr674) /FITC 熒光標(biāo)記磷化蛋白激C亞型G抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
雙歧桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒小單孢菌種屬: Micromonospora│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 除草劑活性培養(yǎng)基: 0305生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
O1群霍亂弧菌種屬: Vibrio│cholerae O1提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 地方株 O1/classical 小川(ogawa)培養(yǎng)基: CM0116生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
玉龍小單孢菌種屬: Micromonospora│yulongensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0011生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 15生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白1(SMOC1)ELISA試劑盒(R)-4-芐基-2-惡唑酮 99%2-甲氧基萘 98%6-(γ,γ-二甲基烯基氨基)核苷(植物級(jí))
SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)ELISA試劑盒乙酰氨基二二乙酯 98%棕櫚棕櫚酯 95%6-甲基(>98%，BR)
SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒對(duì)羥基酮 98%2-并噁唑啉酮 98%7-氨基頭孢
Salusin Beta(Salusin β)ELISA試劑盒(S)-4-異基-2-惡唑酮 98%N-甲基吡咯酮 AR,99.0%8-羥基喹哪啶(>98%,BR)
Salusin Alpha(Salusin α)ELISA試劑盒(R)-4-異基-2-惡唑酮 98%科里內(nèi)酯 98%9,10-二溴蒽(>98%,BR)
SAALDL復(fù)合物(SAALDL)ELISA試劑盒米氏 98%Selectfluor® 氟試劑 95%雙酚芴(>98%,BR)
S100鈣結(jié)合蛋白P(S100P)ELISA試劑盒D-氨 98%(三氟甲基)基硅 96%9-氨基吖啶單鹽單合物(>98%,BS)
S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒L-脯氨 97%3'-氨基乙酮 97%9-咔唑乙(>95%,BR)
S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒(R)-4-基-2-惡唑酮 98%2-氨基二甲酮 98%乙?；阴?>99%,BR)
S100鈣結(jié)合蛋白A8/A9復(fù)合物(S100A8/A9)ELISA試劑盒L-氨 98%2-溴乙酮 98%溴化乙酰(>98%,BR)
S100鈣結(jié)合蛋白A6/鈣粒蛋白A(S100A6)ELISA試劑盒L-甘氨 98%3-溴代乙酮 98%酮肟(>98%,BR)
S100鈣結(jié)合蛋白A12/鈣粒蛋白C(S100A12)ELISA試劑盒(S)-4-基-2-惡唑酮 98%2-代乙酮 98%(劇品)化乙酰(>98%,BR)
S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)ELISA試劑盒D-甘氨 99%2,4-二羥基乙酮 99%性藍(lán)29(>50%，Ind Grade)
S-100蛋白(S-100)ELISA試劑盒D-脯氨 98%3'-羥基乙酮 98%性藍(lán)40(>50%,BS)
S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒L-纈氨 97%4-羥基二甲酮 98%性品紅6B(>50%,BS)
S-100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒D-纈氨 98%2,4,6-三羥基乙酮 一合物 98%吖啶鹽鹽(>98%，BS)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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