化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管
產(chǎn)品貨號：FS-02R6361
產(chǎn)品規(guī)格：48T 0.2PCR管
產(chǎn)品分類：PCR-熒光探針法/PCR法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Mitofilin/IMMT /FITC 熒光標記線粒體內(nèi)膜蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TRA16 /FITC 熒光標記受體相關(guān)蛋白/孤兒受體相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABI3BP ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
Rabbit Avidin/Cy3 Cy3標記的兔抗親和 0.1ml
Phospho-Gab1 (Tyr659) 磷化接頭蛋白Gab 1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Avidin/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗親和 0.1ml
TRA16 /FITC 熒光標記受體相關(guān)蛋白/孤兒受體相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
IL-3(Human Interleukin 3) ELISA KIT 人白介3Multi-class antibodies： 48T
UTS2R G蛋白偶聯(lián)受體14抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Bov IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗IgG 0.1ml
RF(Human rheumatoid factor) ELISA Kit 人類風濕因子 96T
RIMS3 神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白3抗體 0.2ml
C20orf111 誘導轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 0.2ml
UTS2R G蛋白偶聯(lián)受體14抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit dog IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗狗IgG 0.1ml
GMF beta 膠漿成熟因子β抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADCY9 腺苷環(huán)化9抗體 0.2ml
LRP6/FITC 熒光標記低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗雞IgM 0.1ml
Phospho-TAK1 (Ser412)/FITC 熒光標記磷化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管通用AP聯(lián)檢測封閉溶液100毫升小鼠結(jié)蛋白elisa檢測試劑盒
同位標記試劑專題小鼠熱休克蛋白90elisa檢測試劑盒
名稱小鼠甲狀腺過氧化物elisa檢測試劑盒
DNA探針同位（[α32P]dCTP）聚合整合標記試劑盒20次小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體elisa檢測試劑盒
5’末端DNA探針同位（[γ32P]ATP）標記試劑盒20次小鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白elisa檢測試劑盒
RNA探針同位（[α32P]CTP）聚合標記試劑盒20次小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴelisa檢測試劑盒
[35S]－Met細胞代謝標記試劑盒20次小鼠視黃醇結(jié)合蛋白elisa檢測試劑盒
[35S]－Cys細胞代謝標記試劑盒20次小鼠心鈉肽elisa檢測試劑盒
GST融合蛋白同位（[γ32P]ATP）標記試劑盒20次小鼠降鈣elisa檢測試劑盒
GST融合蛋白同位（[γ32P]GTP）標記試劑盒20次小鼠β內(nèi)啡肽elisa檢測試劑盒
3’末端RNA探針同位（[α32P]dATP）聚合標記試劑盒20次小鼠血管舒緩肽elisa檢測試劑盒
3’末端RNA探針同位（[32P]pCp）連接標記試劑盒20次小鼠銅藍蛋白elisa檢測試劑盒
3’末端RNA探針同位（[γ32P]ATP）標記試劑盒20次小鼠前列腺Felisa檢測試劑盒
隨機引物DNA探針同位（[α32P]dCTP）聚合標記試劑盒20次小鼠D2elisa檢測試劑盒
3’末端DNA探針同位（[α32P]dATP）聚合標記試劑盒20次小鼠血栓B2elisa檢測試劑盒
化工儀器網(wǎng)