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胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶，可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端肽鍵。傳統(tǒng)的胰蛋白酶由豬、牛和羊等動(dòng)物的胰臟提取獲得，曾被廣泛應(yīng)用于生物制品的生產(chǎn)。動(dòng)物來(lái)源的胰蛋白酶有引入外源性病毒的風(fēng)險(xiǎn)，例如在上世紀(jì)60年代，曾發(fā)生脊髓灰質(zhì)炎疫苗、減毒黃熱活疫苗檢出SV40病毒和禽白血病病毒的事件，2010年，某廠家的輪狀病毒疫苗檢出了豬圓環(huán)病毒序列。中國(guó)藥典2020版三部指出：“生物制品的原材料及輔料……應(yīng)盡可能選擇無(wú)病毒安全性風(fēng)險(xiǎn)或低風(fēng)險(xiǎn)的原材料和輔料用于生物制品生產(chǎn)，如選擇采用重組技術(shù)生產(chǎn)的生物材料替代動(dòng)物源性生物材料“（中國(guó)藥典2020年版三部25頁(yè)）。
胰蛋白酶分子結(jié)構(gòu)
大腸桿菌表達(dá)的重組胰蛋白酶具有與動(dòng)物胰臟提取的胰蛋白酶相似的作用，純化后由不少于70%的 β-Trypsin和不多于20%的 α-Trypsin組成。
逐典重組胰蛋白酶消化液是自研的微生物發(fā)酵產(chǎn)生的高純度重組酶消化液，用于解離多種貼壁哺乳動(dòng)物細(xì)胞，包括VERO、MDCK、人二倍體細(xì)胞、293、CHO-K1、雞胚原代細(xì)胞等，可廣泛應(yīng)用于各種生物技術(shù)過(guò)程中：如原代細(xì)胞的獲取，組織塊的消化解離、貼壁細(xì)胞的傳代消化、特異性的蛋白質(zhì)酶解等。它的特異性更強(qiáng)而且毒性更低。
逐典重組胰蛋白酶是一款滿足藥典要求的GMP級(jí)非動(dòng)物源胰蛋白酶
Trypelectase 重組胰蛋白酶是逐典生物專門為疫苗、病毒載體生產(chǎn)設(shè)計(jì)，具有高效、非動(dòng)物源和高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的特點(diǎn)。該胰蛋白酶氨基酸序列與豬胰腺來(lái)源的胰蛋白酶一致，由大腸桿菌(E.col) 重組表達(dá)生產(chǎn)。在GMP級(jí)別環(huán)境中生產(chǎn)的重組胰蛋白酶能高效消化貼壁細(xì)胞且不造成傷害，產(chǎn)品質(zhì)量滿足藥典要求。
逐典重組胰蛋白酶特點(diǎn)
1.GMP級(jí)生產(chǎn)環(huán)境、符合藥典標(biāo)準(zhǔn)
2.重組生產(chǎn)、不含雜酶
3.批量生產(chǎn)、質(zhì)量穩(wěn)定
4.高純度、高比活
5.非動(dòng)物源原料
逐典重組胰蛋白酶應(yīng)用場(chǎng)景
組織塊的消化解離和原代細(xì)胞的獲取、貼壁細(xì)胞的傳代消化和收獲、微載體方法培養(yǎng)的細(xì)胞消化和收獲。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
CT26.WT 和 HEK293FT 細(xì)胞消化實(shí)驗(yàn)
CT26WT和HEK293FT在經(jīng)Trypelectase重組胰酶消化3min后解離效果較好，細(xì)胞活率顯示對(duì)細(xì)胞傷害較小，不會(huì)影響細(xì)胞傳代。
Trypelectase重組豬胰酶對(duì)細(xì)胞消化過(guò)程及傳代24h細(xì)胞貼壁圖
