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活體成像 | 生物發(fā)光和熒光發(fā)光的選擇和應(yīng)用
目前小動(dòng)物活體光學(xué)成像主要包括生物發(fā)光與熒光發(fā)光兩種技術(shù)，而選擇生物發(fā)光還是熒光發(fā)光，今天跟我們一起探討其中的不同吧。一，發(fā)光原理1，生物發(fā)光用熒光素酶基因標(biāo)記DNA，利用其產(chǎn)生的蛋白酶與底物發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生體內(nèi)自發(fā)光信號(hào)。2，熒光發(fā)光熒光染料、探針、蛋白受一定波長(zhǎng)的激發(fā)光激發(fā)后，發(fā)射出波長(zhǎng)大于激發(fā)光波長(zhǎng)的熒光信號(hào)。二，操作方法生物發(fā)光1、前期需將熒光素酶基因整合到細(xì)胞染色體DNA上以表達(dá)熒光素酶，包括構(gòu)建熒光素酶重組質(zhì)粒，細(xì)胞轉(zhuǎn)染，篩選陽(yáng)性克隆細(xì)胞株。2、每次成像前需要注射底物熒光素，實(shí)驗(yàn)成本高 -
熒光素酶報(bào)告基因如何助力GLP-1RA 藥物活性檢測(cè)
熒光素酶報(bào)告基因在檢測(cè)GLP-1RA（胰高血糖素樣肽-1受體激動(dòng)劑）藥物活性中起到了關(guān)鍵作用。以下是其應(yīng)用原理：首先，熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)是以熒光素（luciferin）為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲(chóng)熒光素酶（fireflyluciferase）活性的一種報(bào)告系統(tǒng)。當(dāng)熒光素酶與熒光素底物反應(yīng)時(shí)，會(huì)發(fā)出生物熒光，這種熒光信號(hào)的強(qiáng)度與熒光素酶的活性成正比。在GLP-1RA藥物活性檢測(cè)中，熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)通常與GLP-1受體（GLP-1R）的報(bào)告基因質(zhì)粒結(jié)合使用。這種質(zhì)粒包含了與GLP-1R基因表達(dá)相關(guān)的啟動(dòng) -
小動(dòng)物活體光學(xué)成像技術(shù)在心血管疾病研究中的應(yīng)用
Revvity小動(dòng)物活體光學(xué)成像技術(shù)已在生命科學(xué)基礎(chǔ)研究、臨床前醫(yī)學(xué)研究及藥物研發(fā)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。在眾多應(yīng)用領(lǐng)域中，心血管疾病是目前研究的熱點(diǎn)領(lǐng)域之一。常用于心血管研究的光學(xué)標(biāo)記方法包括：1.利用熒光蟲(chóng)熒光素酶（FireflyLuciferase）或熒光蛋白作為報(bào)告基因，通過(guò)標(biāo)記特定基因而研究心血管疾病相關(guān)基因在心血管疾病中的作用；2.通過(guò)外源注射功能性熒光探針，觀測(cè)心血管疾病發(fā)展過(guò)程中的分子變化。應(yīng)用小動(dòng)物活體光學(xué)成像技術(shù)進(jìn)行心血管疾病研究主要集中在三個(gè)方面：1.應(yīng)用生物發(fā)光技術(shù)，研究細(xì)胞 -
小動(dòng)物活體光學(xué)成像技術(shù)在糖尿病研究中的應(yīng)用
Revvity小動(dòng)物活體光學(xué)成像技術(shù)已在生命科學(xué)基礎(chǔ)研究、臨床前醫(yī)學(xué)研究及藥物研發(fā)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。在眾多應(yīng)用領(lǐng)域中，糖尿病相關(guān)研究是近幾年又一興起的應(yīng)用熱點(diǎn)之一。將活體光學(xué)成像技術(shù)應(yīng)用于糖尿病研究的主要方向包括：1、從特異構(gòu)建的發(fā)光轉(zhuǎn)基因小鼠中獲取具有發(fā)光特性的胰島，進(jìn)行胰島移植相關(guān)研究；2、利用熒光素酶基因標(biāo)記相關(guān)治療用細(xì)胞，觀測(cè)治療用細(xì)胞在活體動(dòng)物體內(nèi)的分布、器官靶向及對(duì)糖尿病的治療效果；3、通過(guò)構(gòu)建熒光素酶基因表達(dá)載體或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，研究糖尿病相關(guān)基因表達(dá)及信號(hào)通路。下面結(jié)合一些具體實(shí)例 -
重組胰蛋白酶的性能、應(yīng)用與優(yōu)勢(shì)
Trypelectase重組胰蛋白酶是逐典生物專門(mén)為疫苗、病毒載體生產(chǎn)設(shè)計(jì)，具有高效、非動(dòng)物源和高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的特點(diǎn)。該胰蛋白酶氨基酸序列與豬胰腺來(lái)源的胰蛋白酶一致，由大腸桿菌重組表達(dá)生產(chǎn)。在GMP級(jí)別環(huán)境中生產(chǎn)的重組胰蛋白酶能高效消化貼壁細(xì)胞且不造成傷害，產(chǎn)品質(zhì)量滿足藥典要求。逐典重組胰蛋白酶特點(diǎn)1.GMP級(jí)生產(chǎn)環(huán)境、符合藥典標(biāo)準(zhǔn)2.重組生產(chǎn)、不含雜酶3.批量生產(chǎn)、質(zhì)量穩(wěn)定4.高純度、高比活5.非動(dòng)物源原料逐典重組胰蛋白酶應(yīng)用場(chǎng)景1，疫苗生產(chǎn)貼壁細(xì)胞消化2，細(xì)胞和基因治療貼壁細(xì)胞消化3，干細(xì)胞培養(yǎng) -
生物醫(yī)藥的生產(chǎn)過(guò)程中通常會(huì)使用工程菌或者工程細(xì)胞，這些宿主的核酸殘留會(huì)帶來(lái)潛在的安全風(fēng)險(xiǎn)，比如連續(xù)傳代的宿主細(xì)胞殘留的DNA可能導(dǎo)致人體細(xì)胞增殖失控或者病毒殘留的核酸整合人體內(nèi)形成感染等。由于這些風(fēng)險(xiǎn)性的存在，WHO和各國(guó)藥品監(jiān)督管理機(jī)構(gòu)都會(huì)對(duì)宿主核酸殘留量和片段長(zhǎng)度都有嚴(yán)格的管控，一般將疫苗等生物制品的殘留DNA控制在100pg/劑量，特殊情況下最高允許10ng/劑量，殘余DNA片段小于200bp。全能核酸酶是去除宿主核酸污染有效方案，然而病毒純化過(guò)程中，通常宿主DNA緊密纏繞組蛋白和其他的核
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國(guó)產(chǎn)細(xì)胞療法迎來(lái)大爆發(fā)
2024年可以說(shuō)是細(xì)胞和基因治療（CGT，CellularａndGeneTherapy）爆發(fā)的一年。2月，款TIL療法在美國(guó)獲批上市，其用于治療PD-1抗體治療后進(jìn)展的晚期黑色素瘤，打響了細(xì)胞治療實(shí)體瘤的槍。4月，美國(guó)FDA批準(zhǔn)輝瑞的AAV基因療法BEQVEZ（fidanacogeneelaparvovec-DZKT）上市，用于治療中度至重度血友病B且對(duì)AAV血清型Rh74的中和抗體檢測(cè)為陰性的成年（18歲及以上）患者。在中國(guó)，CGT行業(yè)發(fā)展也如火如荼，尤其是在細(xì)胞治療行業(yè)已與美國(guó)形成并駕齊驅(qū)之 -
一，什么是細(xì)胞因子？?細(xì)胞因子是由細(xì)胞分泌的、具有介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫、炎癥和造血過(guò)程的小分子蛋白質(zhì)；?短暫分泌、自限性、生物半衰期短、爆發(fā)性釋放；?具有多效性、重疊性、拮抗性和協(xié)同性，能形成細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)；?與靶細(xì)胞表面的細(xì)胞因子受體結(jié)合后發(fā)揮作用，效率高。二，細(xì)胞因子主要功能?參與免疫細(xì)胞間信息傳遞；?免疫應(yīng)答和調(diào)節(jié)、免疫細(xì)胞分化和發(fā)育；?組織修復(fù)、炎癥反應(yīng)、造血；?參與免疫因素相關(guān)的疾病（感染、腫瘤、風(fēng)濕、重癥、慢性?。?。三，細(xì)胞因子功能特點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)性、多效性、重疊性、拮抗性、協(xié)同性、多向性、同一性。
