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應(yīng)用分享|GMP級(jí)別TryPLUS消化液助力病毒生產(chǎn)工藝開發(fā)！
基因治療，也稱為細(xì)胞和基因治療(CellａndGeneTherapy)，是一種利用基因治療載體將外源治療性基因轉(zhuǎn)導(dǎo)至細(xì)胞，再通過外源基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，改變細(xì)胞原有基因表達(dá)從而達(dá)到治療疾病的目的。目前，國(guó)內(nèi)基于基因治療的生產(chǎn)工藝主要涉及兩個(gè)方向，第一類即基于溶瘤病毒進(jìn)行相關(guān)藥物開發(fā)，第二類即基于質(zhì)粒/病毒載體介導(dǎo)的基因療法。溶瘤病毒不僅可以發(fā)揮直接由病毒介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞殺傷功能，也能通過破壞腫瘤血管系統(tǒng)從而達(dá)到間接殺傷腫瘤的目的。對(duì)于基因治療中的腺病毒AAV載體，其能夠長(zhǎng)期存在于未分裂、最終分化的細(xì) -
Chaselection D-熒光素鉀鹽在體外生物發(fā)光、體內(nèi)活體成像的檢測(cè)方法！
一、體外生物發(fā)光檢測(cè)1.將細(xì)胞鋪在24孔黑孔板上，鋪板密度為0.5-2.0×105個(gè)細(xì)胞/孔，37℃，培養(yǎng)過夜。2.用超純水配制15mg/mL的D-螢光素儲(chǔ)存液(100×)。注：D-螢光素溶液最好現(xiàn)用現(xiàn)配，也可分裝后-20℃避光凍存，有效期1個(gè)月。3.用預(yù)熱好的細(xì)胞培養(yǎng)基1:100稀釋儲(chǔ)存液，配制終濃度150μg/mL的D-螢光素工作液(1×)。4.去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基直至無殘留。5.向細(xì)胞內(nèi)添加1×D-螢光素工作液后，立即進(jìn)行圖像分析。二、小鼠活體成像檢測(cè)1.用無菌的DPBS(noMg2+、C -
隨著越來越多的生物制品進(jìn)入治療領(lǐng)域，該類制品的質(zhì)量控制也日趨嚴(yán)格，其中核酸殘留一項(xiàng)是各類質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)的重中之重，因?yàn)镈NA的穩(wěn)定性，容易在生產(chǎn)過程中產(chǎn)生殘留，而這些生物制品應(yīng)用到人類疾病治療時(shí)，會(huì)帶來不可控危險(xiǎn)因素。終產(chǎn)品的宿主核酸殘留量必須遵循WHO、FDA和EMEA以及我國(guó)NMPA監(jiān)管條例。尤其近年來包括進(jìn)口產(chǎn)品在內(nèi)的狂犬疫苗DNA殘留超標(biāo)問題，引起了社會(huì)和業(yè)界的廣泛關(guān)注。生產(chǎn)生物制品的宿主細(xì)胞多是連續(xù)傳代細(xì)胞(continuouscelllines,CCLs)，其調(diào)控生長(zhǎng)的基因失靈，而擁有無限
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Revvity的明星產(chǎn)品LabChipGXIITouch毛細(xì)管電泳系統(tǒng)采用一個(gè)單吸管微流體芯片，可快速對(duì)96或384孔板中的蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行指征分析。微流體芯片技術(shù)可全自動(dòng)的完成蛋白質(zhì)樣品的染色、脫色、電泳分離和分析。Labchip儀器的光學(xué)元件檢測(cè)到激光誘導(dǎo)的熒光信號(hào)后，易于操作的系統(tǒng)軟件自動(dòng)分析數(shù)據(jù)，并通過Ladder和內(nèi)標(biāo)校正為用戶提供蛋白質(zhì)相對(duì)濃度、分子大小和純度等?？闪⒓瓷商摂M膠圖、電泳峰圖或匯總表格式的電子數(shù)據(jù)結(jié)果以供用戶查閱或報(bào)告（如圖1）。圖1.LabChipGXIITouch軟
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賽橋Gentle Exp全封閉自動(dòng)化細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)，專為免疫細(xì)胞設(shè)計(jì)
產(chǎn)品概述GentleExp全封閉自動(dòng)化細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)旨在為細(xì)胞培養(yǎng)企業(yè)提供可靠、高效和方便的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案，該系統(tǒng)采用了特殊設(shè)計(jì)的擺動(dòng)平臺(tái)，通過控制搖擺速度、搖擺角度、氣體流量、pH、DO、溫度、二氧化碳濃度或氧氣濃度等參數(shù)，來提供良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)快速更換支持快速更換10L、20L、50L不同規(guī)格的托盤，方便滿足不同規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)需求，從小試研發(fā)到中試和生產(chǎn)的全部階段均可適用變頻調(diào)速支持自定義搖擺加速度，進(jìn)一步降低剪切力，保護(hù)細(xì)胞的完整性和生物活性過程靈活實(shí)時(shí)監(jiān)控溫度、pH/DO、氣 -
Lonza Cocoon和4D電轉(zhuǎn)聯(lián)用T細(xì)胞非病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)擴(kuò)增方案
自體T細(xì)胞免疫療法的研究和開發(fā)進(jìn)展迅速，但關(guān)鍵瓶頸在于擴(kuò)大制造規(guī)模以滿足商業(yè)需求。其中一個(gè)關(guān)鍵痛點(diǎn)是GMP病毒載體（慢病毒和γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒）的安全性、漫長(zhǎng)的生產(chǎn)周期和高額的費(fèi)用。解決這個(gè)問題的一個(gè)辦法是利用非病毒轉(zhuǎn)染方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行基因修飾。Lonza的4D-Nucleofector™LV單元采用電穿孔技術(shù)，可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、可擴(kuò)展多種細(xì)胞類型和應(yīng)用的非病毒轉(zhuǎn)染方案。Cocoon®平臺(tái)是實(shí)現(xiàn)大規(guī)模自動(dòng)化生產(chǎn)的新工具，它可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞分離、激活、轉(zhuǎn)導(dǎo)、擴(kuò)增、細(xì)胞清洗和收獲，同時(shí)提供整個(gè)過程中的實(shí)時(shí)生物反饋 -
Revvity IVIS活體成像助力納米抗體的靶點(diǎn)篩選及開發(fā)
在復(fù)發(fā)性和難治性B細(xì)胞惡性腫瘤的治療中,應(yīng)用CD19CAR-T細(xì)胞療法取得有效應(yīng)答，而FDA批準(zhǔn)的4種CD19CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品，在新的隨訪數(shù)據(jù)中發(fā)現(xiàn)，只有30%-50%的患者實(shí)現(xiàn)了疾病的長(zhǎng)期控制。為了提高B細(xì)胞惡性腫瘤的應(yīng)答率，并將CART細(xì)胞的成功轉(zhuǎn)化到實(shí)體瘤，故需對(duì)此類治療方法進(jìn)行優(yōu)化。國(guó)外研究人員在Naturecommunications期刊發(fā)表了題為TheIgG4hingewithCD28transmembranedomainimprovesVHH-basedCARTcellstarg -
重組胰蛋白酶研究背景胰蛋白酶是一種可以特異性水解肽鏈中的賴氨酸和精氨酸C‐端肽鍵的絲氨酸蛋白酶。在生物制品生產(chǎn)過程中作為一種重要的生物源性材料，廣泛應(yīng)用于病毒性疫苗、生物技術(shù)產(chǎn)品以及其他醫(yī)療產(chǎn)品的生產(chǎn)制造，例如，流感病毒疫苗中病毒顆粒的激活、疫苗生產(chǎn)中動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng)、胰島素單鏈前體轉(zhuǎn)化為雙鏈胰島素等。目前國(guó)內(nèi)的疫苗及胰島素生產(chǎn)企業(yè)仍然是以動(dòng)物源性胰蛋白酶（從豬或牛胰腺中分離純化獲得）為主，但會(huì)存在生產(chǎn)工藝復(fù)雜、潛在的人畜共患性病原污染的風(fēng)險(xiǎn)。近年來，由于生產(chǎn)過程中使用動(dòng)物源性胰蛋白酶導(dǎo)致生物
