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            上海撫生實業(yè)有限公司>>PCR相關(guān)試劑>>提取試劑盒>>拭子DNA磁珠法提取試劑盒

            拭子DNA磁珠法提取試劑盒

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            參考價748.8-1397.76
            具體成交價以合同協(xié)議為準
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            • 廠商性質(zhì)

              經(jīng)銷商
            • 所在地

              上海市

            規(guī)格
            50T748.8元15 盒 可售
            100T1397.76元15 盒 可售
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            更新時間:2024-01-15 10:13:29瀏覽次數(shù):812

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            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T、100T
            貨號 A-Tq3114 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 僅供科研研究實驗    
            拭子DNA磁珠法提取試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:人肝星狀細胞 轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2封閉多肽 傳染性胰臟壞死病病毒PCR檢測試劑盒 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1) 試劑盒 ELISA Na+k+ ——ATP比色法檢測試劑盒 松生擬層孔菌(紅緣擬層孔菌) 3號染色體開放閱讀框30抗體

            詳細介紹

            商品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號

            拭子DNA磁珠法提取試劑盒

            50T

            A-Tq3114

            拭子DNA磁珠法提取試劑盒

            100T

            A-Tq3114

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            PCR 反應(yīng)需要使用哪些試劑和設(shè)備?

            試劑:
            模板DNA:PCR反應(yīng)需要模板DNA,如從細胞、組織、血液中提取DNA等;引物:PCR反應(yīng)的兩個引物,分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;dNTPs:PCR反應(yīng)中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細胞分裂、DNA合成等生物學過程,用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增;Taq DNA聚合酶:PCR反應(yīng)需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴增DNA鏈;PCR buffer溶液:對PCR反應(yīng)具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應(yīng)pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛,可增強PCR反應(yīng)特異性,從而提高反應(yīng)效率;酶切體系:PCR擴增往往涉及到重組、構(gòu)建和測序等等實驗步驟,常常需要進行酶切操作。MARK:一種分子量標準,用來判別DNA片段大小的工具。DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物;
            設(shè)備:
            PCR儀:用于控制反應(yīng)溫度,保證PCR反應(yīng)時不同溫度環(huán)節(jié)的嚴格控制;電泳槽:用于分離PCR擴增產(chǎn)物;核酸提取儀:從組織樣本中全自動提取核酸。  這些試劑和設(shè)備在PCR分子生物學技術(shù)中均是,只有在有序齊全的基礎(chǔ)上,才能進行PCR反應(yīng)并得出準確結(jié)果。

            PCR相關(guān)基礎(chǔ)實驗:

            PCR反應(yīng)基本步驟一般的聚合酶鏈式反應(yīng)由20到35個循環(huán)組成,每個循環(huán)包括以下3個步驟:

            一、變性:

            利用高溫(93-98℃)使雙鏈DNA分離。高溫將連接兩條DNA鏈的氫鍵打斷。在第一個循環(huán)之前,通常加熱長一些時間以確保模板和引物分離,僅以單鏈形式存在。該步驟時間1-2分鐘,接下來PCR儀就控制溫度進入循環(huán)階段。

            二、退火或稱接合,復性:

            在DNA雙鏈分離后,降低溫度使得引物可以結(jié)合于單鏈DNA上。此階段的溫度通常低于引物熔點5℃。錯誤的退火溫度可能導致引物不與模板結(jié)合或者錯誤地結(jié)合。該步驟時間1-2分鐘。

            三、延伸:

            DNA聚合酶由降溫時結(jié)合上的引物開始沿著DNA鏈合成互補鏈。此階段的溫度依賴于DNA聚合酶。該步驟時間依賴于聚合酶以及需要合成的DNA片段長度。傳統(tǒng)的Taq估計合成1000bp/min、較新的Tbr(來自于嗜熱菌Thermus brockianus)約40秒、商業(yè)公司生產(chǎn)的融合型聚合酶僅需約10-15秒。

            PCR反應(yīng)條件優(yōu)化:

            1、變性溫度和時間:

            保證模板DNA解鏈是保證整個PCR擴增成功的關(guān)鍵。加熱90~95°C, 30~60s,再復雜的DNA 分子也可變性為單鏈。溫度過高或高溫持續(xù)時間過長,可對Taq酶活性和dNTP分子造成損害。

            2、復性溫度和時間:

            PCR擴增特異性取決于復性過程中引物與模板的結(jié)合。復性溫度越高,產(chǎn)物特異性越高。復性溫度越低,產(chǎn)物特異性越低。需根據(jù)引物的Tm值具體設(shè)定。

            3、延伸溫度和時間:

            一般位于Taq酶最適作用溫度70~75°C之間。引物小于16個核苷酸時,過高的延伸溫度不利于引物與模板的結(jié)合,可以緩慢升溫到70~75°C。延伸反應(yīng)時間,可根據(jù)待擴增片段的長度而定,小于1kb, 1min足夠;大于1kb需加長延伸時間。Taq酶可根據(jù)1kb/min增加時間。這里需要注意,延伸時間過長可能出現(xiàn)非特異擴增。因此需要設(shè)置恰到好處的延伸時間。

            4、循環(huán)數(shù):

            其他參數(shù)選定后,PCR循環(huán)次數(shù)主要取決于模板DNA的濃度。理論上說20?25次循環(huán)后,PCR產(chǎn)物的積累即可達到最大值,實際操作中由于每步反應(yīng)的產(chǎn)率不可能達到100%,因此不管模板濃度是多少,20~30次是比較合理的循環(huán)次數(shù)。循環(huán)次數(shù)越多,非特異擴增增加。

            公司正在出售的產(chǎn)品:

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            豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒前病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)

            豬圓環(huán)病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

            ??康鞍?/span>2ELISA試劑盒

            闊盤吸蟲通用PCR檢測試劑盒

            通用型病毒RT-PCR檢測試劑盒

            泛連接E3AELISA試劑盒

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            人皰疹病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒

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            分泌成分ELISA試劑盒

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            人冠狀病毒HKU 染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

            脲原體通用PCR檢測試劑盒

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