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            伊萊博生物科技(上海)有限公司
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            線粒體膜電位

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            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號

            品       牌其他品牌

            廠商性質(zhì)代理商

            產(chǎn)品資料下載

            所  在  地上海市

            更新時間:2024-10-18 16:01:16瀏覽次數(shù):1464次

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            應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
            在細胞凋亡的過程中往往伴隨著線粒體跨膜電位的破壞,這被廣泛認為是細胞凋亡過程中早發(fā)生的事件之一。線粒體膜電位檢測的有很多方法,JC-1的流式檢測是比較常見的一種方法。

            一、服務介紹

              大量的研究表明線粒體與細胞凋亡密切相關(guān),其中線粒體跨膜電位(MMP)的下降,被認為是細胞凋亡級聯(lián)反應過程中早發(fā)生的事件之一。它發(fā)生在細胞核凋亡特征(染色質(zhì)濃縮、DNA斷裂)出現(xiàn)之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰,則細胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。

              二、實驗原理

              JC-1是一種碳氰化合物類陽離子熒光染料,可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-1在細胞內(nèi)以聚合體和單體兩種不同的物理形式存在,分別處于不同的熒光發(fā)射峰。當JC-1濃度低或膜電位水平低時,主要以單體形式存在,激發(fā)波長為527nm,呈綠色熒光;當JC-1濃度升高或線粒體膜電位水平較高時,形成聚合物,發(fā)出紅色的熒光,激發(fā)波長為590nm。當細胞發(fā)生凋亡時,線粒體跨膜電位被去極化,JC-1從線粒體內(nèi)釋放,紅光強度減弱,以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光,根椐這一特征就可以檢測線粒體膜電位的變化。

              三、實驗流程

              1.細胞培養(yǎng);

              2.用適當?shù)姆椒ㄕT導細胞凋亡,同時設立陰性依照組合陽性對照組,收集細胞;

              3.用PBS洗滌細胞三次,收集不多于1×106的細胞;

              4.取100μL10×IncubationBuffer加900μL滅菌去離子水稀釋成1×IncubationBuffer,混勻并預熱至37℃;

              5.吸取500μL1×IncubationBuffer,加入1μLJC-1,渦旋混勻配成JC-1工作液;

              6.取500μLJC-1工作液將細胞均勻懸浮,37℃,5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育15~20min。

              7.室溫離心(2000rpm,5min)收集細胞,用1×IncubationBuffer洗兩次;

              8.吸取500μL10×IncubationBuffer重新懸浮細胞;

              9.流式細胞儀檢測,分析。

              四、客戶提供

              細胞株(凍存株或培養(yǎng)好的細胞),相關(guān)藥品或MMP檢測試劑盒(可代購)!

              五、公司提供

              實驗步驟、結(jié)果圖、數(shù)據(jù)結(jié)果和分析報告

              實驗周期:1-2周,具體需要根據(jù)細胞生長情況及實驗內(nèi)容而定。



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