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            中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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            成年小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞原代培養(yǎng)

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            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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            品       牌其他品牌

            廠商性質(zhì)代理商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2024-06-17 11:43:48瀏覽次數(shù):427次

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            成年小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞原代培養(yǎng)是伊萊博生物的服務(wù)項(xiàng)目之一,由經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)人員操作完成。

            1. C57小鼠,8-10周,通過頸椎脫位處死,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。

            2. 使用ykj和nz,使髖關(guān)節(jié)脫臼,保持股骨頭完整。

            3. 用zxq去除每個(gè)股骨頭的軟骨帽,將組織放入含2%雙抗的PBS中。

            4. 用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍,將關(guān)節(jié)軟骨小心移到2ml離心管中。

            5. 用ykj將軟骨帽剪成約1mm3的碎片,加入3ml預(yù)熱的Collagenase D1.5mg/ml)。

            6. 放入37℃、80rpm的搖床中進(jìn)行第一次消化,時(shí)間2h

            7. 第一次消化結(jié)束后,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,40um的細(xì)胞篩過濾后,離心1500rpm,2min。

            8. 沉淀用DMEMwq培養(yǎng)基重懸,計(jì)數(shù),種植在24孔板中。

            9. 在未消化的組織中加入3ml預(yù)熱的Collagenase D,放入37℃、80rpm的搖床中進(jìn)行第二次消化,時(shí)間2h,然后收集細(xì)胞。



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