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更新時間:2025-03-14 16:05:31瀏覽次數(shù):21次
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弗氏佐劑免疫性前列腺炎模型動物構(gòu)建
取雄性大鼠前列腺組織,經(jīng)勻漿、離心后提取前列腺蛋白提純液,用PBS緩沖液稀釋至 5-15 mg/ml 濃度。
需注意無菌操作,避免外源性污染。
弗氏佐劑(CFA)配制:將石蠟油與羊毛脂按2:1混合,加入滅活結(jié)核分枝gan菌(終濃度2-20 mg/ml)。
乳化方法:將抗原與CFA按 1:1體積比 混合,通過注射器反復(fù)推注或研磨法形成穩(wěn)定的油包水乳劑。乳化合格標準:滴入冷水后乳劑不分散。
初次免疫:
腹腔注射:給予百白破疫苗(大鼠0.5 ml,小鼠0.1 ml)以增強全身免疫反應(yīng)。
皮內(nèi)多點注射:在背部或腹股溝區(qū)注射抗原-CFA乳劑(大鼠1.0 ml,小鼠0.5 ml),分4-6點注射。
加強免疫:間隔30天后重復(fù)注射一次,可改用不弗氏佐劑(IFA)。
病理學(xué)檢測:
肉眼觀察:前列腺體積增大、質(zhì)地變硬,表面呈灰黃色。
組織切片:HE染色顯示間質(zhì)淋巴細胞浸潤、腺腔或擴張,電鏡可見基膜破壞。
炎癥因子檢測:
通過qPCR或ELISA檢測前列腺組織中 TNF-α、IL-1β、iNOS 等炎性因子顯著升高。
行為學(xué)指標:
模型動物可能表現(xiàn)出排尿頻率增加、疼痛等類臨床癥狀。
優(yōu)點:模擬了人類慢性前列腺炎的免疫病理特征,如炎癥細胞浸潤和自身免疫反應(yīng)。
局限性:急性化學(xué)性炎癥反應(yīng)與臨床差異較大,需結(jié)合長期觀察。
應(yīng)用方向:適用于 發(fā)病機制研究(如纖維化、疼痛機制)和 藥物篩選(如抗炎中藥方劑)。
無菌操作:避免手術(shù)感染干擾模型特異性。
劑量控制:高劑量抗原(15 mg/ml)可穩(wěn)定誘導(dǎo)慢性炎癥,低劑量可能反應(yīng)不足。
倫理審查:需符合動物實驗倫理規(guī)范,減少疼痛刺激。
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