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SILAC(定量蛋白質(zhì)組學)

一、SILAC(定量蛋白質(zhì)組學)原理：
SILAC ( Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture)技術是利用哺乳動物細胞增殖對必需氨基酸（Lys，Arg等）的依賴性原理而設計的代謝標記蛋白質(zhì)的方法。以Lys為例，普通的Lys分子中有6個12C原子，用13C替代普通Lys中的全部12C原子，從而生成13C標記的Lys。13C標記的Lys要比普通的Lys多6Da。
比如兩組細胞，一組用含普通Lys的培養(yǎng)基培養(yǎng)（記為K0），一組用含13C的Lys培養(yǎng)（記為K6）。由于Lys是細胞增殖的必需氨基酸，在細胞培養(yǎng)過程中13C標記的Lys自然“摻入”到新和成的蛋白質(zhì)中，導致整個細胞的蛋白質(zhì)組被13C標記的Lys所標記。鑒于K0和K6兩個氨基酸存在6Da的質(zhì)量差異，所以在后續(xù)LC-MS/MS對蛋白質(zhì)進行分析時，能同時完成樣品中蛋白質(zhì)的鑒定和定量（6Da的質(zhì)量差異）。根據(jù)定量結果，能直接判斷蛋白質(zhì)表達水平差異、區(qū)分特異性和非特異性相互作用等。
二、SILAC(定量蛋白質(zhì)組學)特色：
（1、進行 細胞中 蛋白質(zhì)相互作用和 蛋白質(zhì)表達差異的定量蛋白質(zhì)組學技術；
（2）通過LC-MS/MS分析，能 同時實現(xiàn)對未知樣品中蛋白質(zhì)分子的 鑒定與定量；
（3）依據(jù)定量結果，能直接判定蛋白質(zhì)表達水平差異、區(qū)分特異性和非特異性相互作用等。

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