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TUNEL檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

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實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù): 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 動(dòng)物模型構(gòu)建其他課題整體外包生化檢測(cè) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù) 免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)服務(wù) 神經(jīng)元原代培養(yǎng) 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)服務(wù) 動(dòng)物模型構(gòu)建技術(shù)服務(wù) 分子實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù) 病理檢測(cè)技術(shù)服務(wù) 蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)服務(wù) 代謝組學(xué)技術(shù)服務(wù)

實(shí)驗(yàn)服務(wù): 特殊染色類(lèi)器官培養(yǎng)技術(shù) 蛋白實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù) 病理實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù) 分子實(shí)驗(yàn)外檢測(cè)服務(wù) 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)

課題實(shí)驗(yàn): 課題服務(wù) 實(shí)驗(yàn)外包課題實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞課題

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TUNEL檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
基因組DNA斷裂時(shí)，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶的催化下加上熒光素（FITC）標(biāo)記的dUTP （fluorescein-dUTP），從而可以通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)，這就是TUNEL （TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling）法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理

TUNEL檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

TUNEL檢測(cè)的原理:

細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時(shí)，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標(biāo)記的dUTP (fluorescein-dUTP) ，從而可以通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)，這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理。

TUNEL檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

TUNEL檢測(cè)（石蠟切片）	取下適當(dāng)?shù)男迈r的組織塊固定于4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中，甲醛與組織塊體積比在10:1和20:1之間，4攝氏度保存運(yùn)輸；
TUNEL檢測(cè)（冰凍切片）	取下的新鮮組織應(yīng)立即放入超低溫冰箱或者液氮中，用干冰運(yùn)輸，固定好的切片應(yīng)于-80或者-20度保存，并盡快用于檢測(cè)；
TUNEL檢測(cè)（細(xì)胞爬片）	細(xì)胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min，換PBS緩沖液4度保存運(yùn)輸，盡快用于檢測(cè)；

熒光法需要先拍一張凋亡熒光圖，再拍一張?jiān)蝗竞藞D，再合并圖層，終我們提供的為三張熒光圖片。

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