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            流式雙染法檢測細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
            • 流式雙染法檢測細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)

            貨物所在地:上海上海市

            更新時(shí)間:2024-11-29 21:00:09

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            流式雙染法檢測細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)是伊萊博生物的基礎(chǔ)服務(wù)項(xiàng)目之一,由細(xì)胞平臺(tái)和分子平臺(tái)經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)人員操作完成。

            凋亡和壞死,是常見的細(xì)胞死亡的兩種方式,它們有著截然不同的特征。凋亡是細(xì)胞程序性死亡的主要表現(xiàn)形式,是一個(gè)主動(dòng)性的生理反應(yīng)機(jī)制;壞死則是細(xì)胞對嚴(yán)重?fù)p傷的一種被動(dòng)反應(yīng)和變性過程。

            Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷酯結(jié)合蛋白,參與細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報(bào)道可以調(diào)控一些PKC的活性。

            Annexin V選擇性結(jié)合磷酯酰絲氨酸(phosphatidylserine,簡稱PS)。磷酯酰絲氨酸主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期,不同類型的細(xì)胞都會(huì)把磷酯酰絲氨酸外翻到細(xì)胞表面,即細(xì)胞膜外側(cè)。磷酯酰絲氨酸暴露到細(xì)胞表面后會(huì)促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷酯酰絲氨酸結(jié)合后可以阻斷磷酯酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V,即Annexin V-FITC,就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷酯酰絲氨酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。因此Annexin V是檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)。

            碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液是一種核酸染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,但可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,呈現(xiàn)紅色熒光。對于壞死細(xì)胞,由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失,Annexin V-FITC可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi),與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷酯酰絲氨酸結(jié)合,從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。因此將Annexin-V與PI匹配使用,就可以將凋亡早晚期的細(xì)胞以及壞死細(xì)胞區(qū)分開來。

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