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            技術文章

            莫氏巴貝斯蟲PCR試劑盒使用步驟

            閱讀:1166          發(fā)布時間:2020-9-29

            莫氏巴貝斯蟲PCR試劑盒使用方法:
            注:莫氏巴貝斯蟲PCR試劑盒說明書所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
            1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
            待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
            2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
            取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
            組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
            1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
            2.加樣(樣本處理區(qū))
            3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
            技術特點
            1莫氏巴貝斯蟲PCR試劑盒說明書準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結果與金標準測序法比對,結果*性大于99%。
            2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
            3快速:整個檢測流程只需3小時。
            4簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
            5防污染
            6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光。

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