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產(chǎn)品簡介
羊痘病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。
詳細介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Capripox Virus |
貨號 | CP934045 |
產(chǎn)品特征:
羊痘病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 。
重復性好：擴增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是羊痘病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
4-鄰苯二酰亞胺人B細胞生長因子(BCGF)ELISA Kit，48T/96T
1H-四氮唑-5-酸酯人β-促脂素(β-LPH)ELISA Kit，48T/96T
2--5-氟苯硼酸人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA Kit，48T/96T
2-基-2-基-1，3-烷二醇人胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA Kit，48T/96T
1-羥基-1-環(huán)已基酸酯人表皮角蛋白(EK)ELISA Kit，48T/96T
異基二酸二酯人膽堿酰化酶(CHAc)ELISA Kit，48T/96T
膽酸鈉人多巴胺-β羥化酶(DBH)ELISA Kit，48T/96T
4-苯基基人刀豆素A(ConA)ELISA Kit，48T/96T
5-羥基-2-金剛烷酮人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA Kit，48T/96T
3--2-基三氟苯人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA Kit，48T/96T
1-基-1H-咪唑-5-酸人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)ELISA Kit，48T/96T
4--3-磺?；剿崛说鞍酌?特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)
2-氟-4-硝基苯醚人黑色素細胞刺激素(MSH)ELISA Kit，48T/96T
鄰苯二?；钡仄饺司奘杉毎吇蜃?MCF)ELISA Kit，48T/96T
4-氧基-2-三氟基苯酸人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA Kit，48T/96T BNIP3L 促凋亡BNIP3L蛋白抗體咖酸
羊痘病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒BNIP3 促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體腺嘌呤
BNIP2 Bcl2相互作用蛋白2抗體尿苷
BNIP1/TRG8 Bcl2相互作用蛋白1抗體（轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白）環(huán)維黃楊星D
BNC2/Basonuclin 2 堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體蘇氨酸
BNC1/Basonuclin 1 堿性核蛋白1/鋅指蛋白basonuclin抗體組氨酸
BMPR2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體抗體黃山藥皂苷提取物
BMPR1B 骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體積雪草苷
BMPR1A/CD292 骨成型蛋白受體1A抗體羥基積雪草苷
BMPER BMP內(nèi)皮細胞調(diào)節(jié)蛋白抗體甜菜堿
BMP9 骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體雪上一枝蒿素
BMP8 骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體琥珀酸
BMP7 骨形態(tài)發(fā)生蛋白7抗體α-蒎烯
BMP6 骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體γ-亞麻酸酯
BMP5 骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體二十八烷醇
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研