化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
糞產(chǎn)堿桿菌探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶(hù)只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。
詳細(xì)介紹
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點(diǎn)：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品名稱(chēng) | |
英文名稱(chēng) | Alcaligenes faecalis |
貨號(hào) | CP933882 |
產(chǎn)品特征:
糞產(chǎn)堿桿菌探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒靈敏度高：能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線(xiàn)重合度高，受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線(xiàn)Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
檢測(cè)方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過(guò)量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào)，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線(xiàn)圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線(xiàn)圖
2.TaqMan探針?lè)ǎ?br />探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，產(chǎn)品僅用于科研使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
以下是糞產(chǎn)堿桿菌探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
考來(lái)烯胺樹(shù)脂標(biāo)準(zhǔn)品大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA Kit，48T/96T
膽酸標(biāo)準(zhǔn)品人膠原酶I(Collagenase I)ELISA Kit，48T/96T
重酒石酸膽堿標(biāo)準(zhǔn)品小鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA Kit，48T/96T
化膽堿標(biāo)準(zhǔn)品猴子膠原酶I(Collagenase I)ELISA Kit，48T/96T
過(guò)硫頭孢尼西鈉標(biāo)準(zhǔn)品大鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA Kit，48T/96T
吡啶酸鉻標(biāo)準(zhǔn)品兔子膠原酶I(Collagenase I)ELISA Kit，48T/96T
糜蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)品人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA Kit，48T/96T
環(huán)吡酮標(biāo)準(zhǔn)品大鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA Kit，48T/96T
環(huán)吡酮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品人窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA Kit，48T/96T
環(huán)砒酮胺標(biāo)準(zhǔn)品大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA Kit，48T/96T
環(huán)吡酮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品人膠原酶II(Collagenase II)ELISA Kit，48T/96T
西司他銨標(biāo)準(zhǔn)品小鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA Kit，48T/96T
西咪替標(biāo)準(zhǔn)品大鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA Kit，48T/96T
鹽酸西咪替標(biāo)準(zhǔn)品兔子膠原酶II(Collagenase II)ELISA Kit，48T/96T
糞產(chǎn)堿桿菌探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒西諾沙星標(biāo)準(zhǔn)品豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA Kit，48T/96T GNAT3 G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α3抗體川續(xù)斷皂苷Ⅵ
GNAQ/Gα q G蛋白α亞單位蛋白Q抗體牡荊苷
Coconut lethal yellowing phytoplasma椰子致死黃化植原體PCR試劑盒
Coconut Tinangaja Viroid(CTiVd)椰子敗生類(lèi)病毒RT-PCR試劑盒
Colletotrichum kahawae咖啡漿果炭疽病菌PCR試劑盒
Cotton Leaf Crumple Virus(CLCrV)棉花皺葉病毒PCR試劑盒
Cotton Leaf Curl Virus(CLCuV)棉花曲葉病毒PCR試劑盒
Cowpea Mild Mottle Virus(CPMMV)豇豆輕斑病毒RT-PCR試劑盒
Cowpea Severe Mosaic Virus(CPSMV)豇豆重花葉病毒RT-PCR試劑盒
Crinipellis perniciosa可可叢枝病菌PCR試劑盒
Cronartium coleosporioides油松皰銹病菌PCR試劑盒
Cronartium comandrae北美松皰銹病菌PCR試劑盒
Cronartium conigenum松球果銹病菌PCR試劑盒
Cronartium fusiforme松紡錘瘤銹病菌PCR試劑盒
Cronartium ribicola松皰銹病菌PCR試劑盒
Cryphonectria cubensis桉樹(shù)潰瘍病菌PCR試劑盒
Cucumber Green Mottle Mosaic Virus(CGMMV)黃瓜綠斑駁花葉病毒RT-PCR試劑盒
Cucumber Mosaic Virus(CMV)黃瓜花葉病毒RT-PCR試劑盒
Cucurbit Yellow Stunting Disorder V(CYSDV)葫蘆黃色矮化失調(diào)病毒PCR試劑盒
Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens菜豆細(xì)菌性萎蔫病菌PCR試劑盒
Curtobacterium flaccumfaciens pv. oortii郁金香黃色皰斑病菌PCR試劑盒
Cylindrocladium parasiticum花生黑腐病菌PCR試劑盒
Cymbidium Mosaic Virus(CymMV)蘭花花葉病毒RT-PCR試劑盒
Cymbidium Ringspot Virus(CymRSV)蘭花環(huán)斑病毒PCR試劑盒
Diaporthe helianthi向日葵莖潰瘍病菌PCR試劑盒
Diaporthe perniciosa蘋(píng)果果腐病菌PCR試劑盒
Diaporthe phaseolorum大豆莖潰瘍病菌PCR試劑盒
GMCL1L 生殖細(xì)胞樣蛋白1樣蛋白抗體芒柄花素
GM130 高爾基體自身蛋白GM130抗體(-)-薄荷酮
GM1(GS) 神經(jīng)節(jié)苷酯抗體胡薄荷酮
GlyR alpha 1/2/3 甘氨酸受體alpha 1/2/3型抗體1,5-O-二咖酰奎寧酸
Glypican 6 脂?；嫉鞍拙厶?6抗體3，29-二苯?；闃侨嗜?/span>