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產(chǎn)品簡介
空腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特征:
靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 。
重復(fù)性好：擴增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Campylobacter jejuni |
貨號 | CP934016 |
空腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，產(chǎn)品僅用于科研報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。
以下是空腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
維生素A標(biāo)準(zhǔn)品牛β羥酸(βOHB)ELISA Kit，48T/96T
含量測定系統(tǒng)適用性用維生素D標(biāo)準(zhǔn)品人β羥酸(β-OHB)ELISA Kit，48T/96T
牡荊素標(biāo)準(zhǔn)品大鼠β羥酸(βOHB)ELISA Kit，48T/96T
伏立康唑標(biāo)準(zhǔn)品人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA Kit，48T/96T
伏立康唑雜質(zhì)A人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA Kit，48T/96T
伏立康唑相關(guān)物質(zhì)B人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA Kit，48T/96T
伏立康唑相關(guān)物質(zhì)C人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA Kit，48T/96T
空腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒伏立康唑相關(guān)物質(zhì)D人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA Kit，48T/96T
伏立康唑相關(guān)物質(zhì)F人血清白蛋白(HSA)ELISA Kit，48T/96T
華法林標(biāo)準(zhǔn)品人白色念珠菌(C.albicans)ELISA Kit，48T/96T
華法林相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA Kit，48T/96T
睡茄交酯 A標(biāo)準(zhǔn)品人百日咳素(PT)ELISA Kit，48T/96T
呫噸-9-羧酸標(biāo)準(zhǔn)品人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA Kit，48T/96T
占噸酮標(biāo)準(zhǔn)品人膀胱癌抗原(UBC)ELISA Kit，48T/96T
賽拉嗪標(biāo)準(zhǔn)品人包蟲抗體IgG ELISA Kit，48T/96T CCDC116 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白116抗體替硝唑
CCDC114 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體酮洛芬
CCDC112/MBC1 膀胱癌突變蛋白1抗體硝苯地平
CCDC11 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體硝苯地平雜質(zhì)A
CCDC107 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白107抗體硝苯地平雜質(zhì)B
CCDC106 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白106抗體鹽酸利多卡因
CCDC104 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白104抗體利多卡因
CCDC102B 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白102B抗體鹽酸妥拉唑林
CCBE1 膠原蛋白和鈣結(jié)合表皮生長因子結(jié)構(gòu)域1抗體鹽酸硫利達嗪
CCAP/Cardioactive Peptide 心動加速蛋白多肽抗體鹽酸卡替洛爾
CC85C 卷曲螺旋域蛋白質(zhì)85C抗體七葉皂苷鈉
CC16/CCSP 克拉拉細(xì)胞蛋白抗體黃豆苷元
Cbx8 染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體7-氧基-4'-羥基異黃酮
CBX1/HP1 β 異染色體同源蛋白1抗體二磺酸阿米三嗪
CBP/p300 CREB結(jié)合蛋白抗體蘿巴新