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上海莼試生物技術(shù)有限公司 |
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13585831301 |
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
人細(xì)胞角蛋白18英文名稱：Human CK-18 ELISA Kit產(chǎn)品別名：人CK-18 elisa試劑盒用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human CK-18 ELISA Kit |
貨號 | CS-E3887 |
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時，請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
細(xì)菌鈣轉(zhuǎn)試盒Bcl-2(抗原) Bcl-2（多肽抗原）
通用型CHIP DNA分子克隆試盒BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子(腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子)（多肽片斷抗原）
通用型CHIP DNA分子庫構(gòu)建試盒ACA11 peptide 擬南芥ACA11蛋白多肽抗原
高效CHIP DNA分子克隆試盒AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原（擬南芥）
高效CHIP DNA分子庫構(gòu)建試盒bFGF 性成纖維細(xì)胞生長因子（多肽抗原）
10倍PCR*緩沖液ACE2(Angiotensin converting enzyme 2) 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗原
一步法PCR反應(yīng)液BNP 腦鈉素（多肽抗原）
超白金TAG DNA聚合酶BrdU (Bromodeoxyuridine) 脫氧尿苷
人細(xì)胞角蛋白18ELISA試劑盒三酸脫氧核糖核苷酸（dNTPs）混合液C5 過敏素C5（補(bǔ)體C5）抗原
一步法平端PCR反應(yīng)液CA125 (Ovarian cancer Anti-gen) 卵巢癌抗原（抗原）
一步法熒光定量PCR反應(yīng)液CK19 細(xì)胞角蛋白19抗原
基因基化特異性PCR擴(kuò)增（MSP）試盒CAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶（抗原）
大量總RNA化銫純化試盒Calponin 1 鈣調(diào)節(jié)蛋白-1（抗原）
全血總RNA純化試盒Caspase-1 (ICE; CASP-1；P45) 天冬酸-胱酸特異性蛋白酶家族（抗原）
組織總RNA純化試盒Caspase-3 (CPP32) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-3（抗原）HRP conjugated Goat anti Mouse IgG1
HRP conjugated Goat anti Mouse IgG1英文名稱對照品大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit，48T/96T 200mg
ZNF3英文名稱：TTBK1化細(xì)絲蛋白A體 英文名稱：AVSD2黑皮質(zhì)3受體體
CRIPT英文名稱：C1orf84 人肺耐藥蛋白(LRP)免疫試盒
英文名稱標(biāo)準(zhǔn)品兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit，48T/96T 200mg
英文名稱：CKAP2Menin抑癌蛋白體
Cadherin 8英文名稱：CHIP人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)免疫試盒
英文名稱標(biāo)準(zhǔn)品人可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA Kit，48T/96T 200mg
英文名稱：CHMP4B+CHMP4C錯配修復(fù)蛋白3體
C6orf174英文名稱：CRAT人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試盒
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