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產(chǎn)品簡介
豬腺病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Porcine Adenovirus(Swine Adenovirus) |
貨號 | CP934609 |
產(chǎn)品特征:
豬腺病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是豬腺病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
VAP1 血管粘附蛋白1抗體兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試盒
VANGL2 神經(jīng)管畸形相關(guān)蛋白VANGL2抗體兔叉頭框蛋白P3(FOXP3)ELISA試盒
VANGL1/LPP2 腫瘤抑制基因LPP2抗體兔補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA試盒
VAMP-3 囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體兔補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試盒
VAMP-2 囊泡相關(guān)膜蛋白2抗體兔二(MDA)ELISA試盒
VAMP-1/Synaptobrevin-1 VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體兔半胱氨酸蛋白酶抑制/胱抑素C(Cys-C)ELISA試盒
VAM1/MPP6 棕櫚?；さ鞍?抗體兔白介素7(IL7)ELISA試盒
V5 tag V5 tag標(biāo)簽抗體兔白介素-5(IL-5)ELISA試盒
V.cholera Ogawa 01群小川型霍亂弧菌抗體兔白介素17(IL-17)ELISA試盒
豬腺病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒V.cholera Ogawa 01群稻葉型霍亂弧菌抗體兔白介素12(IL-12/P70)ELISA試盒
UXT/Ubiquitously expressed transcript 廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體兔白蛋白(Albumin)ELISA試盒
UVRAG/DHTX 輻射耐受相關(guān)蛋白DHTX抗體兔阿霉素(ADR)ELISA試盒
UTS2R/GPCR GPR14 G蛋白偶聯(lián)受體14抗體兔γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶1(GGT1)ELISA試盒
UTS2D 尾加壓素2相關(guān)肽抗體兔β內(nèi)肽(β-EP)ELISA試盒
UTP14A/SDCCAG16 結(jié)腸癌抗原16抗體兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試盒阿奇霉素雜質(zhì)A76801-85-930mg,供HPLC系統(tǒng)適用性用
阿奇霉素雜質(zhì)A76801-85-930mg,供HPLC系統(tǒng)適用性用
阿奇霉素系統(tǒng)適用性對照品Azithromycin for system suitability83905-01-520mg，供系統(tǒng)適用性試驗用
阿奇霉素 Azithromycin83905-01-5100mg，供含量測定用
阿奇霉素 Azithromycin86905-01-5200mg，供效價測定用
阿普西特Arprinocid25mg
阿莫西林系統(tǒng)適用性對照品30mg，供HPLC系統(tǒng)適用性用
阿莫西林克拉維酸系統(tǒng)適用性對照品Amoxicillin and Clavulanate Acid for system suitability30mg
阿莫西林純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Purity of Amoxicillin100mg/瓶
阿莫西林-d4Amoxicillin-d41mg
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研