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實(shí)時(shí)熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)品稀釋法
閱讀：4412 發(fā)布時(shí)間：2020-7-19實(shí)時(shí)熒光定量PCR是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料，利用熒光信號(hào)積累對(duì)PCR反應(yīng)的過(guò)程，進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控實(shí)現(xiàn)起始模板的準(zhǔn)確定量。實(shí)時(shí)熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋方法依次是選擇目標(biāo)、提取/PCR、純化、測(cè)試濃度、調(diào)整濃度、梯度稀釋。一般CT值在18-30之間，覆蓋全部樣品濃度區(qū)間。和大家在分享一下10倍連續(xù)梯度稀釋方法：1V原液（標(biāo)準(zhǔn)品為i）+9V稀釋緩沖液，得到標(biāo)準(zhǔn)品為ii。1V標(biāo)準(zhǔn)品ii+9V稀釋緩沖液，得到標(biāo)準(zhǔn)品為iii, 1V標(biāo)準(zhǔn)品iii+9V稀釋緩沖液，得到標(biāo)準(zhǔn)品為iv, 1V標(biāo)準(zhǔn)品iv+9V稀釋緩沖液v,切不可用標(biāo)準(zhǔn)品i分別加不同體積的稀釋緩沖液直接得到標(biāo)準(zhǔn)品ii、iii、iv、v，標(biāo)準(zhǔn)品要復(fù)管做測(cè)試，復(fù)管次數(shù)要遵循統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。熒光PCR凍干時(shí)，制品溶液厚度不宜過(guò)厚。一般應(yīng)為10-15mm，制品過(guò)厚的情形類似于濃度過(guò)高時(shí)的情況，不僅干燥的時(shí)間更長(zhǎng)，塌陷、結(jié)塊。凍干機(jī)Pilot3-6T醫(yī)療應(yīng)用涉及產(chǎn)品有：熒光PCR、免疫微球、化學(xué)發(fā)光、基因芯片、量子點(diǎn)、ELISA、膠體金、POCT、IVD校準(zhǔn)品質(zhì)控品校準(zhǔn)品、內(nèi)毒素檢測(cè)試劑、血清、白蛋白、干細(xì)胞及相應(yīng)提取物等。
型號(hào) | Pilot3-6T | Pilot5-8T | Pilot7-12T | Pilot10-15T |
凍干面積 | 0.42㎡ | 0.56㎡ | 0.84㎡ | 1.05㎡ |
∅22西林瓶裝量（20ML） | ≥900支 | ≥1170支 | ≥1500支 | ≥2100支 |
∅16西林瓶裝量（5ML） | ≥1700支 | ≥2210支 | ≥3100支 | ≥4100支 |
冷阱溫度（空載） | -85℃ | |||
真空度（空載） | ≤1Pa | |||
板層溫度（空載） | -55℃ | |||
板層制冷方式 | 硅油循環(huán) | |||
板層數(shù)量 | 3+1 | 4+1 | 4+1 | 5+1 |
板層尺寸（mm） | 350*400 | 350*400 | 350*600 | 350*600 |
捕水能力 | 6L | 8L | 12L | 10L |
凍干效率 | 3L/24H | 5L/24H | 7L/24H | 10L/24H |
板層間距 | 100mm | 80mm | 90mm | 100mm |
穿墻隔離 | √ | √ | √ | √ |
凍干曲線擬合度 | 100% | 100% | 100% | 100% |
晶型控制 | √ | √ | √ | √ |
蒸汽分壓控制 | √ | √ | √ | √ |
升華結(jié)束判定 | √ | √ | √ | √ |
凍干終點(diǎn)測(cè)試 | √ | √ | √ | √ |
壓塞 | 液壓 | |||
整機(jī)尺寸 （約） | W860*D1400*H1800 | W860*D1400*H1800 | W860*D1700*H1900 | W860*D1700*H1900 |