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            上海研尊生物科技有限公司

            中級(jí)會(huì)員·3年

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            YZ-X1022WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細(xì)胞
            參考價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
            • YZ-X1022 型號(hào)
            • 研尊生物 品牌
            • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
            • 上海市 所在地

            訪問(wèn)次數(shù):72更新時(shí)間:2025-03-21 17:39:03

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介
            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
            貨號(hào) YZ-X1022 主要用途 科研實(shí)驗(yàn)
            細(xì)胞名稱(chēng):WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細(xì)胞
            種屬來(lái)源:人
            性別年齡:女性,年齡未知
            組織來(lái)源:腎
            生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
            細(xì)胞形態(tài):上皮樣
            細(xì)胞規(guī)格:1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
            培養(yǎng)條件:DMEM + 10% fetal bovine serum (FBS)
            37 ℃, 5% CO2
            產(chǎn)品介紹

             

            WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細(xì)胞

            種屬來(lái)源:

            性別年齡:女性,年齡未知

            組織來(lái)源:

            生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

            細(xì)胞形態(tài):上皮樣

            細(xì)胞規(guī)格:1 X 106cells/T251 mL凍存管

            培養(yǎng)條件:DMEM + 10% fetal bovine serum (FBS)

                      37 , 5% CO2

            凍存條件90% FBS + 10% DMSO

            傳代方法:1618傳代,1-2天傳1

            細(xì)胞培養(yǎng)操作

            干冰運(yùn)輸收到細(xì)胞后需立即轉(zhuǎn)入液氮保存、或者-80°C冰箱短期凍存、或者直接復(fù)蘇

            常溫運(yùn)輸收到細(xì)胞后,請(qǐng)立即將細(xì)胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出,并按照下方操作步驟進(jìn)行培養(yǎng)傳代

            細(xì)胞傳代細(xì)胞密度達(dá)80% - 90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

            培養(yǎng)瓶中細(xì)胞操作步驟

             對(duì)于貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,寄送前,我們會(huì)將培養(yǎng)基充滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)瓶,以減少產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中貼壁細(xì)胞的脫落。

            1. 收到細(xì)胞后,請(qǐng)注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細(xì)檢查是否渾濁、是否細(xì)菌污染。因?yàn)檫\(yùn)輸過(guò)程中存在顛簸,且有些細(xì)胞對(duì)溫度變化也很敏感,可能存在一些細(xì)胞脫落漂浮的情況,這些細(xì)胞仍是活細(xì)胞,請(qǐng)勿丟棄,可離心富集后傳代使用。

            2. 對(duì)于貼壁細(xì)胞,在生物安全柜環(huán)境中,用真空泵去除培養(yǎng)瓶中多余的培養(yǎng)基,至剩余5-8mL 左右,隨后根據(jù)培養(yǎng)基選擇合適的CO2含量的37恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),擰松瓶蓋。如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)培養(yǎng)瓶,請(qǐng)立即傳代。

            3. 對(duì)于懸浮的細(xì)胞,在生物安全柜環(huán)境中,轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞至離心管,150 g 離心 5 分鐘,去除上清后,用5 mL培養(yǎng)基吹散細(xì)胞,轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,隨后置于合適的CO2含量的37恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

            凍存管細(xì)胞操作步驟

            注意: 為保證細(xì)胞的高活率,請(qǐng)收到產(chǎn)品后,立即解凍培養(yǎng)。

            1. 將凍存管置于37水浴中來(lái)回晃動(dòng),迅速解凍。為避免污染,確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速,大約1分鐘。

            2. 一旦凍存管中液體融化后,立即取出,采用酒精噴拭凍存管表面。從此步開(kāi)始,后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。

            3. 將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mLwan全培養(yǎng)基的離心管中,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。

            4. wan全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細(xì)胞復(fù)蘇的存活率,請(qǐng)將培養(yǎng)基在37水浴預(yù)熱后使用。

            5. 將細(xì)胞置于含有合適CO2的37恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

            貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)

            1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基,加入PBS潤(rùn)洗一次。

            2. 加入1 mL 0.25 (w/v) Trypsin-EDTA 溶液,并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育,直至細(xì)胞從壁上脫落分離。此過(guò)程大約需要3-5分鐘。

            3. 加入2mLwan全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶,并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞從培養(yǎng)瓶表面吹落,并使細(xì)胞分散。

            4. 將細(xì)胞懸液收集到15mL離心管里,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。取適量的培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

            懸浮細(xì)胞傳代可參考以下方法:

            一、直接傳代法

            1. 待懸浮細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)至 80%~90%(細(xì)胞懸液變黃),即可傳代;

            2. 吸管吸棄細(xì)胞懸液 1 / 2~1 / 3;

            3. 加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。

               二、離心傳代法(在發(fā)現(xiàn)有細(xì)胞碎片的情況下)

            4. 將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi);

            5. 150 g 離心 5 min,棄去上層清液;

            6. 使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞;

            7. 吸管吸取適量細(xì)胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。

            細(xì)胞凍存操作

            1. 1000rpm離心5分鐘去掉上清。加1 mL血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1 x 106/mL,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí);

            2. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80°C冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。

             WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細(xì)胞

            大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

            人小膠質(zhì)細(xì)胞

            人食管鱗癌細(xì)胞

            人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞

            人皮膚成纖維細(xì)胞永生化

            人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

            倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株

            小鼠樹(shù)突狀瘤細(xì)胞

            人前列腺癌細(xì)胞



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