用商業(yè)試劑盒或基于十六烷基三甲基溴化銨（CTAB） 的方法提取，從純化的植DNA 擴(kuò)增高達(dá) 5kb 的片段

來(lái)自葉盤(pán)、種子樣品和其他組織類型的直接聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）

由葉和/或種子材料制備的 DNA 提取物的 PCR

16SrRNA的擴(kuò)增

超快實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄酶（RT)-PCR檢測(cè)

使用組織進(jìn)行快速直接 PCR。

簡(jiǎn)化了轉(zhuǎn)基因篩選的工作流程。

提高了 PCR 成功率和重現(xiàn)性。

從所有樣本類型中有效擴(kuò)增長(zhǎng)和困難靶標(biāo)。

從純化的 DNA 和粗制樣品中擴(kuò)增高達(dá) 5kb 的片段

使用純化的 DNA 和粗制樣品進(jìn)行擴(kuò)增具有高產(chǎn)率和特異性

以為模板進(jìn)行直接 PCR

無(wú)需耗時(shí)的 DNA 提取步驟

與野生型酶相比，進(jìn)行 PCR 的時(shí)間縮短了一半

減少了耗時(shí)的需要

使用提取緩沖液在 5 分鐘內(nèi)制備用于植PCR 的粗提物

即使是*挑戰(zhàn)性的樣品類型也能獲得高成功率

H5N1

在嘗試直接或粗制樣品 PCR 之前，使用純化的 DNA 優(yōu)化反應(yīng)條件。

對(duì)于直接 PCR，使用取樣工具控制添加到反應(yīng)中的植物材料的量。 在 PCR 中使用的粗植物材料過(guò)量是直接 PCR 反應(yīng)失敗的主要原因。

對(duì)于粗樣品 PCR，使用提取緩沖液中的少量植物材料制備粗 DNA 提取物（參見(jiàn)第 3 節(jié)：粗制樣品 PCR），并且每 50 μL 反應(yīng)體系使用 1 μL。

H5N1