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            天津科維諾生物科技有限公司
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            SLB10039-人巨噬細(xì)胞趨化因子 MCF ELISA試劑盒
            • SLB10039-人巨噬細(xì)胞趨化因子 MCF ELISA試劑盒

            貨物所在地:天津天津市

            地: 天津市

            更新時間:2024-11-04 21:00:28

            瀏覽次數(shù):44

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            人巨噬細(xì)胞趨化因子 MCF ELISA試劑盒
            產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
            用途:用于科研實驗。
            保存條件及有效期:
            1.試劑盒保存: 2-8℃。
            2.有效期: 6個月
            1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
            2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如
            酶聯(lián)科興生物人巨噬細(xì)胞趨化因子 MCF ELISA試劑盒
            用途
            該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中濃度。
            檢測原理
            本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗體包被于酶標(biāo)板上,實驗時樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的抗原會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗體與結(jié)合在包被抗體上的抗原結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,抗原濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中指標(biāo)的濃度。
            樣品活化方法
            生物樣品中的通常以無活性的形式存在,在檢測指標(biāo)活性前必須進(jìn)行活化處理。
            活化方法如下:
            血清、血漿: 280 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
            注意:樣品被稀釋了10倍!
            細(xì)胞培養(yǎng)上清:20 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入100 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
            注意:樣品被稀釋了2倍!
            組織勻漿:1960 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻后檢測。

            注意:樣品被稀釋了50倍!

            操作步驟
            1. 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。
            2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
            3. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
            4. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
            5. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
            6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
            7. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
            8. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
            9. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
            人巨噬細(xì)胞趨化因子 MCF ELISA試劑盒
            試驗所需自備物品
            1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
            2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
            3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
            4. 吸水紙




























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