目錄:柏萊源（天津）生物科技有限公司>>生物試劑>>試劑盒kit>> HG-IL015細胞殘留人白介素15(IL-15)ELISA檢測試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
貨號： HG-IL015
BlueKit@系列細胞殘留人白介素 15(IL-15) ELISA 檢測試劑盒采用雙抗夾心法，用于定量檢測血清、血漿或細胞上清中人1-15 蛋白的含量。將特異性抗人兒-15 單克隆抗體包被在微孔板上，反應孔內(nèi)加入標準品、待測樣本、檢測抗體，室溫(18~25°C)孵育，洗滌后再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育。洗滌后加入顯色液TMB。顏色反應的深淺與目標蛋白濃度成正比。
檢測范圍:3.91-250pg/mL
靈 敏 度:0.24 pg/mL
精密度:CV%≤10%，RE%≤士15%
96T
適用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清及其他生物學樣本中人兒-15 蛋白含量測定。
| 組分 | 規(guī)格 | 配制 |
| 包被酶標板(Coated Plate,CP) | 8孔x12條 | 即用型 |
| 人IL-15標準品(Human IL-15 Standard,S) | 300μLx1管(2500pg/mL) | 用樣品稀釋液按比例稀釋 |
| 檢測抗體(Detect Antibody,DA) | 6mLx1瓶 | 即用型 |
| 酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP,SH) | 12mLxl瓶 | 即用型 |
| 檢測緩沖液(Assay Buffer,AB) | 12mLx1瓶 | 即用型 |
| 樣品稀釋液(Sample Diluent,SD) | 15mlx1管 | 即用型 |
| 10x洗液(10x Wash Buffer,WB) | 50mL xl瓶 | 1:9用去離子水稀釋 |
| 顯色液(TMB Substrate,TS) | 12mLx1瓶 | 即用型 |
| 終止液(Stop Solution,SS) | 12mLx1瓶 | 即用型 |
| 封板膜(Sealer film,SF) | 5張 | 即用型 |
| 說明書(Instruction For Use,IFU) | 1份 | 即用型 |
備 注:所有組分存儲溫度均為 2~8℃，有效期12個月。
◆酶標儀
◆去離子水或蒸餾水
◆恒溫培養(yǎng)箱
◆全新濾紙
◆微量移液器及吸頭
◆渦旋振蕩器
試劑配制
1x洗液根據(jù)實際用量，取適量10x濃縮洗液用去離子水 10 倍稀釋)
標準曲線的制作
人IL-7標準品S5000 pg/mL40uL+360LSD 作為高標準(500pg/mL)。每個稀釋試管中加入200μLSD，使用高標準制備 1:1稀釋系列。在進行下一步轉(zhuǎn)移之前徹i底混合每個試管。SD 用作零標準(0pg/mL)。
操作步驟
檢測之前請將所有的試劑、樣本恢復至室溫(18~25°C)。
1.準備好所有需要的試劑及工作濃度標準品。
2.將不需要的板條拆卸下來，放回鋁箔袋，重新封好封口。
3.每孔加入 50uL檢測緩沖液(AB)。
4.加入 50uL 的標準品(S)、樣本。保證連續(xù)加樣，請不要間斷。加樣過程在 15 分鐘內(nèi)完成。
5.每孔加入50uL檢測抗體(DA)。
6.使用封板膜封板。500 轉(zhuǎn)/分鐘振蕩，室溫(18~25°C)孵育1個小時。
7.棄掉孔內(nèi)液體，每孔加入 300uL洗液洗板，洗滌4次。每次洗板，在吸水紙上拍干。為獲得理想的實驗性能，必須徹i底移除殘留液體。
8.加入 100uL 酶結(jié)合物(SH)。
9.使用新的封板膜封板。500 轉(zhuǎn)/分鐘振蕩，室溫(18~25°C)(18-25°C)孵育 30 分鐘。
10.重復步驟 7。
11.每孔加入 100μL 顯色液，避光室溫(18~25°C)孵育 10-15 分鐘。
12.每孔加入 100μL 終止液。
13.在 30 分鐘之內(nèi)，酶標板 450nm 波長測定 OD 值，校正波長設定為 570nm 或者 630nm。
結(jié)果處理
1. 標準曲線OD處理（見下例，僅為示例，具體以實際測定為準）
| 標準品濃度(pg/mL) | OD1 | OD2 | 平均值 |
| 250.00 | 3.1130 | 3.0550 | 3.0840 |
| 125.00 | 2.1470 | 2.0170 | 2.0820 |
| 62.50 | 1.2330 | 1.0960 | 1.1645 |
| 31.25 | 0.6350 | 0.6030 | 0.6190 |
| 15.63 | 0.3069 | 0.3381 | 0.3225 |
| 7.81 | 0.1822 | 0.1820 | 0.1821 |
| 3.91 | 0.1116 | 0.1070 | 0.1093 |
| 0.00 | 0.0537 | 0.0513 | 0.0525 |
2. 以標準品理論濃度與對應OD值取1og后進行直線擬合，得到標準曲線（如下圖所示）
1. 樣品首i次檢測，建議進行至少3個連續(xù)倍數(shù)的稀釋，以在標準曲線范圍內(nèi)產(chǎn)生至少一個稀釋后樣品。
2. 試劑按標簽說明儲存，使用前室溫（18-25℃）平衡。
3. 包被酶標板使用前，請平衡至室溫（18-25℃）再打開外包裝袋，實驗中不用的板條立即放回包裝中密封，4℃可保存一個月。其余不用試劑應包裝好或蓋好。
4. 實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
5. 使用前檢查試劑盒內(nèi)各種試劑。試劑稀釋、加樣和終止反應應充分混勻或搖勻?qū)嶒灲Y(jié)果尤為重要。
6. 洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在潔凈的紙巾上充分拍干，直至看不到水印。勿將紙巾直接放入反應孔中吸水。
7. 底物顯色液對光敏感，避免長時間暴露于光下，避免與金屬接觸影響結(jié)果。
8. 本產(chǎn)品為一次性使用的試劑盒，請在效期內(nèi)使用。
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