HERC2 E3泛素蛋白連接酶抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對(duì)靶蛋白的特異性。選擇針對(duì)不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無(wú)法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對(duì)已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級(jí)結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過(guò)程中添加到肽中，否則它們不會(huì)表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因?yàn)橛捎跇悠诽幚磉^(guò)程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時(shí)，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對(duì)它們產(chǎn)生的抗體可能無(wú)法識(shí)別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識(shí)別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對(duì)于單克隆抗體尤其如此。

HERC2 is a belongs to the HERC gene family that encodes a group of unusually large proteins, which contain multiple structural domains. All members have at least 1 copy of an N-terminal region showing homology to the cell cycle regulator

1、制備抗原。

2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

3、動(dòng)物免疫。

4、試取血進(jìn)行測(cè)試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對(duì)異種動(dòng)物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動(dòng)物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當(dāng)提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動(dòng)物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔

4．其它材料及試劑

PTN Others Mouse 小鼠 Pleioophin / PTN / HB-GAM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA 試劑盒 Mouse carcinoembryonic antign,CEA  小鼠癌胚抗原 96T

MUC7： 粘蛋白7抗體 人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4

RBL-2H3大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞 RBL-2H3 rat neuophils alkaline cell leukemia MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+15%熱滅活FBS 大鼠胰島素受體(ISR)ELISA試劑盒 IFN- Omega (Human Interferon Omega ,IFN- Omega )  人ω干擾素 96T

MUC13： 粘蛋白13抗體 PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

海馬神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠胰島素降解酶(IDE)ELISA試劑盒 ADV IgG XI 腺病毒 IgG Ⅺ型(間接法二步法)

HLC3： 肺癌癌基因蛋白3抗體 HA Others H1N2 甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYB 人降解加速因子(DAF)ELISA 試劑盒 TNF-Alpha(Tumor Necrosis Factor-Alpha) 人壞死因子-α(多肽抗原) 0.5mg

High density lipoprotein： 高密度脂蛋白抗體 轉(zhuǎn)化細(xì)胞

HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2 人原(PCT)ELISA 試劑盒 rh-TNF alpha protein GST Tagged 重組人壞死因子 100ug

HEF1： 蛋白激酶底物相關(guān)蛋白抗體 人表皮黑色素細(xì)胞-深色素總RNAHEM-d NA

HERC2 E3泛素蛋白連接酶抗體FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 大鼠過(guò)氧化物酶體生物合成因子2(PEX2)ELISA試劑盒 Urotensin II  大鼠尾加壓素2 96T

phospho-P53(Ser376)： 0酸化抑制基因P53抗體 CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

K562 人慢性骨髓性白血病細(xì)胞 大鼠過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒 cANCA(human anti-neutroph