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擁抱電轉(zhuǎn)的未來—立即行動
使用高效、快速、簡單、靈活的緊湊型電轉(zhuǎn)染系統(tǒng),節(jié)省寶貴的研究時間,并保護(hù)珍貴的樣本。Invitrogen Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)采用專有移液器吸頭技術(shù),再結(jié)合經(jīng)過簡化的工作流程和靈活操作,有助于減少樣本損失,降低污染風(fēng)險,減少操作步驟,讓您管控各種實驗。
轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞存活率—可轉(zhuǎn)染具有挑戰(zhàn)性的細(xì)胞株,轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞活率高
節(jié)省寶貴的研究時間—通過簡單的三步工作流程快速轉(zhuǎn)染細(xì)胞,選擇 1 通道移液器或 8 通道移液器,這些移液器可以在 15 分鐘內(nèi)進(jìn)行96 次轉(zhuǎn)染反應(yīng),并具有孔板模式的直觀用戶界面
根據(jù)需要靈活變通—針對不同的細(xì)胞類型、細(xì)胞密度、遞送物質(zhì)和電轉(zhuǎn)染方案,精確優(yōu)化電轉(zhuǎn)染參數(shù)。
提高基因組編輯效率—包含基因編輯緩沖液,適用于所有細(xì)胞類型和應(yīng)用,是一種優(yōu)化的緩沖液,可改善 CRISPR 分子的遞送
保存珍貴的樣本—盡量減少樣本輸送造成損失和污染的風(fēng)險
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擁抱電轉(zhuǎn)的未來—立即行動
Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)是一款電轉(zhuǎn)儀,在極難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞(包括免疫細(xì)胞、原代細(xì)胞和干細(xì)胞)中實現(xiàn)高達(dá) 90% 的轉(zhuǎn)染和基因編輯效率。150 多個細(xì)胞株已在經(jīng)過優(yōu)化的即用條件下進(jìn)行了轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞存活率測試。
搜索轉(zhuǎn)染方案和引用數(shù)據(jù)庫,查看適用于不同細(xì)胞株的最佳電轉(zhuǎn)染方案。
解決了根據(jù)細(xì)胞株尋找緩沖液試劑盒的問題。我們使用一個緩沖液試劑盒簡化了這一過程,該試劑盒可適配 150 多個哺乳動物細(xì)胞株。我們建議使用電壓低于 1,900 V 的 Invitrogen Neon NxT 重懸緩沖液 R 和電壓較高的 Invitrogen Neon NxT 重懸緩沖液 T。
基因組編輯在追求對人類健康和疾病更深入了解方面具有廣闊前景?;蚪M編輯工作流程中一個關(guān)鍵但挑戰(zhàn)性的步驟,是將 CRISPR 核糖核蛋白 (RNP) , DNA 和 RNA 分子有效遞送至所選細(xì)胞系中—也稱為轉(zhuǎn)染。如上所述,電轉(zhuǎn)染是應(yīng)用泛的遞送方法,即使在處理難轉(zhuǎn)染細(xì)胞時也能夠?qū)崿F(xiàn)高轉(zhuǎn)染效率。
與 Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)配合使用時,我們的基因編輯試劑和 Neon NxT 重懸基因組編輯緩沖液可以幫助提高特定有效載荷 (如 CRISPR Cas9) 的基因編輯性能,以便用于包括原代細(xì)胞,干細(xì)胞和難轉(zhuǎn)染細(xì)胞在內(nèi)的哺乳動物細(xì)胞的敲除或敲入實驗 (圖 2)。
圖 3.與標(biāo)準(zhǔn)電轉(zhuǎn)比色皿相比, Neon NxT 移液器吸頭的優(yōu)勢。專有的生物兼容型 (A) Neon NxT 吸頭采用經(jīng)驗證的毛細(xì)管電轉(zhuǎn)技術(shù),與 (B) 電轉(zhuǎn)比色皿相比具有重要優(yōu)勢。
與標(biāo)準(zhǔn)比色皿電轉(zhuǎn)染腔室不同,Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)使用專有的生物兼容移液器吸頭腔,可產(chǎn)生更均勻的電場。這一設(shè)計可以更好地維持生理狀態(tài),與常規(guī)電轉(zhuǎn)染相比,細(xì)胞存活率更高。?
形成更加均勻的電場
在整個電轉(zhuǎn)染腔室內(nèi)維持穩(wěn)定的 pH 值
產(chǎn)生極少熱量
生成較少離子
減少細(xì)胞遇到的剪切力
使用 Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng),您可以精確控制對實驗至關(guān)重要的參數(shù),而不會將寶貴的時間浪費在調(diào)整不準(zhǔn)確的參數(shù)上。您可以利用該轉(zhuǎn)染系統(tǒng)修改以下參數(shù):
脈沖電壓
脈沖寬度
脈沖次數(shù)
細(xì)胞類型
緩沖液類型
遞送物質(zhì)類型
將 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)遞送到多種哺乳動物細(xì)胞中,每次反應(yīng)可靈活轉(zhuǎn)染 1 x 104 至 1 x 107 個細(xì)胞。
Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的工作流程經(jīng)過簡化,易于操作和執(zhí)行,用戶幾乎不需要進(jìn)行培訓(xùn),提高了結(jié)果的一致性和可再現(xiàn)性。
使用該轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可輕松完成電轉(zhuǎn)染過程:首先,將細(xì)胞和質(zhì)?;旌衔锛尤?Neon NxT 移液管吸頭中。其次, 將移液器放至移液器站,并按下電轉(zhuǎn)鍵。最后,將轉(zhuǎn)染細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中。由于轉(zhuǎn)染在移液器吸頭內(nèi)進(jìn)行,所以 3 個簡單的步驟即可完成轉(zhuǎn)染操作:吸液、電轉(zhuǎn)染、分液。除了簡化工作流程,我們的專有電轉(zhuǎn)技術(shù)還縮短了整體流程,與傳統(tǒng)電轉(zhuǎn)系統(tǒng)相比,Neon NxT電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可顯著減少移液步驟。
采用 Neon NxT 8 通道移液器,我們可將靈活性提升。8 通道移液器的每個吸頭在其分離管內(nèi)獨立運行,能夠使用不同的電轉(zhuǎn)染參數(shù),重懸緩沖液,有效載荷甚至是bu細(xì)胞類型。此外, Neon NxT 8 通道移液器和工作站可與現(xiàn)有的 Neon NxT 設(shè)備配合使用,也可利用相同的 Neon NxT 吸頭和緩沖液。無論您是優(yōu)化條件還是探索多種變量, Neon NxT 8 通道移液器都能提供加速研究并獲得更可靠結(jié)果所需的多功能性。
使用 Neon NxT 8 通道移液器,每個通道都可以處于不同條件下,您可以在單次實驗中高效測試各種參數(shù),極大地提高您的研究通量和精度。這種簡化的方法可進(jìn)行快速而準(zhǔn)確的優(yōu)化,確保實驗的高效率和細(xì)胞存活率 (圖 4)。
圖4.Neon NxT 轉(zhuǎn)染程序優(yōu)化研究。我們評估了 Jurkat 細(xì)胞中 11.5 kb GFP 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的最佳電轉(zhuǎn)程序和重懸緩沖液。每個數(shù)據(jù)點代表特定電轉(zhuǎn)程序,顯示了 GFP 陽性細(xì)胞在電轉(zhuǎn)染后 24 小時與活轉(zhuǎn)染細(xì)胞總數(shù) (TTC) 的百分比。紅色圈突出顯示性能最佳的條件,使用 T 緩沖液可實現(xiàn)高達(dá) 85% 的轉(zhuǎn)染效率。
使用 Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的直觀用戶界面,提前設(shè)置整個孔板,而不用“快速啟動 (Quick Start)"功能調(diào)整不同樣本之間的電轉(zhuǎn)參數(shù)。在每個樣本進(jìn)行電轉(zhuǎn)染時,可監(jiān)測屏幕上的進(jìn)展情況,在 15 分鐘內(nèi)最多可完成 96 個樣本的電轉(zhuǎn)染。
樣本固然珍貴,但在常規(guī)電轉(zhuǎn)比色皿的來往移液過程中難免出現(xiàn)損失。Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)中的電轉(zhuǎn)染工藝流程在移液器吸頭內(nèi)進(jìn)行,有利于盡量減少樣本損失以及細(xì)胞遇到的剪切力。
Neon NxT 系統(tǒng)(包括脈沖發(fā)生器和移液器工作站)占地面積小,適合大多數(shù)生物安全柜 (BSC)。使用該儀器時,樣本始終位于無菌區(qū),有利于降低珍貴樣本的污染風(fēng)險。Neon NxT 系統(tǒng)還新增了一項電纜管理功能,確保該儀器可更加適配在 BSC 中的使用。
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圖 5.Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的尺寸。
規(guī)格 | ![]() Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng) | ![]() Neon 轉(zhuǎn)染系統(tǒng) |
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移液器類型 | 1 通道和 8 通道可選 | 僅 1 通道 |
電轉(zhuǎn)體積 | 10 µL 或 100 µL | 10 µL 或 100 µL |
電轉(zhuǎn)緩沖液體積* | 2 mL | 3 mL |
吸頭連接技術(shù) | ClipTip 技術(shù) | 摩擦 |
電脈沖 | 1-10 | 1-10 |
脈沖持續(xù)時間 | 1-100 ms | 1-100 ms |
脈沖電壓 | 500–2,500 V | 500–2,500 V |
電弧檢測 | 是 | 否 |
云連接 | 是 | 否 |
脈沖發(fā)生器尺寸** | 24.1 x 19.3 x 25.1 厘米(寬度x高度x深度) 11.9 lb (5.4 kg) | 24.1 x 22.6 x 34.5 厘米(寬度x高度x深度) 13.8 lb (6.25 kg) |
電纜管理功能*** | 是 | 否 |
觸摸顯示屏 | 8 英寸電容觸摸屏 | 7 英寸觸摸屏 |
電源額定值 | 100-240 VAC,270 W | 100-240 C,150 W |
* Neon NxT 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的緩沖液管配有 2 mL 液位指示器。
** Neon NxT 脈沖發(fā)生器可在不移動窗口的情況下從常規(guī) BSC 中出入。
*** 多余電纜可使用方便安裝的電纜架固定在 Neon NxT 系統(tǒng)后部。
用于符合GMP 要求細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)的封閉式、可放大電轉(zhuǎn)染系統(tǒng) Xenon 系統(tǒng)的工藝和方案兼容 Invitrogen Neon 轉(zhuǎn)染系統(tǒng),有助于從研究到工藝開發(fā)至一次最多 25 mL 商業(yè)生產(chǎn)規(guī)模。
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