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            北京諾博萊德科技有限公司
            中級會(huì)員 | 第1年

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            諾博萊德 DAB法顯色試劑盒 顯色與信號檢測

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號SW9818

            品       牌NobleRyder/諾博萊德

            廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

            所  在  地北京市

            更新時(shí)間:2025-03-10 13:40:03瀏覽次數(shù):32次

            聯(lián)系我時(shí),請告知來自 化工儀器網(wǎng)
            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1盒
            貨號 SW9818 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥
            主要用途 與對應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)
            SDS-PAGE電泳后,蛋白質(zhì)按照分子量大小分離,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)后,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色以檢測電泳分離的特異性的蛋白。
            諾博萊德 DAB法顯色試劑盒 顯色與信號檢測

            諾博萊德 DAB法顯色試劑盒 顯色與信號檢測


            NobleRyder  SW9818  DAB法顯色試劑盒(山羊IgG),Western Blotting Goat IgG DAB Chromogenic Reagent Kit

             

            產(chǎn)品貨號:SW9818

            產(chǎn)品名稱:DAB法顯色試劑盒(山羊IgG),Western Blotting Goat IgG DAB Chromogenic Reagent Kit

            產(chǎn)品規(guī)格:1盒

            產(chǎn)品簡介:

            英文名稱:Western Blotting Goat IgG DAB Chromogenic Reagent Kit

            中文名稱:DAB法顯色試劑盒(山羊IgG)

            規(guī)格:1盒

            儲(chǔ)存條件:-20℃,avoid light,1 year

             

            具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

            保存:

            -20℃避光密閉保存,一年有效。若經(jīng)常使用,可將封閉試劑,抗體稀釋液和 20 倍 DAB 顯色液B 存放于 2-8℃以方便使用。

            產(chǎn)品簡介:

            SDS-PAGE電泳后,蛋白質(zhì)按照分子量大小分離,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)后,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色以檢測電泳分離的特異性的蛋白。

            操作步驟:(僅供參考)

            常規(guī)電泳轉(zhuǎn)膜后:

            1) 清洗轉(zhuǎn)印膜:將膜剝離下后,作好標(biāo)記,一般在左上角剪一缺口。室溫用 TBS-T 漂洗 3 次每次 5min, 以盡量洗去轉(zhuǎn)印膜上的 SDS,防止影響后面的抗體結(jié)合。

            2) 按 5g 封閉試劑加100ml 雙蒸水計(jì),配制膜封閉液,配好的膜封閉液為乳白色懸液,將漂洗過的轉(zhuǎn)印膜,封閉液內(nèi),搖床震動(dòng),室溫封閉 30min。用 TBS-T ,PH7.6 洗液,室溫漂洗 3 次每次 5min。

            3) 將 10×抗體稀釋液用雙蒸水稀釋成 1×(10ml 10×抗體稀釋液加入 90ml 雙蒸水,混勻,可 4℃ 保存三個(gè)月)。此稀釋液可作為一抗和二抗的稀釋液。

            4) 用 1×的抗體稀釋液稀釋抗體。根據(jù)用量以及一抗的推薦稀釋濃度來稀釋一抗。將雜交膜放入雜交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育過夜或 37℃搖動(dòng)孵育 2h。此用過的抗體一般可回收第二 天再使用一次。注:如果所加一抗不同,可在此步將膜沿電泳方向剪成條,分別作好標(biāo)記,分開孵育。

            5) 用 TBS-T,PH7.6洗液,室溫漂洗 3 次每次 5min。

            6) 用稀釋好的抗體稀釋液稀釋抗體。根據(jù)用量,按 10ml 抗體稀釋液加入 1-2ul HRP 標(biāo)記二抗的比例,配制二抗工作液。將雜交膜放入雜交袋中,加入二抗工作液,封口,37℃搖動(dòng)孵育 1h。此用過的抗體一般可回收第二天再使用一次。

            7) 用 TBS-T ,PH7.6 洗液,室溫漂洗 3 次每次 10min。

            8) 配制 DAB 顯色:根據(jù)用量,取 TBS-T 4ml,加入 DAB 顯色液 A、DAB 顯色液 B 各200ul,混勻,加 在膜正面,室溫下顯色。在目標(biāo)條帶顯出后,而且背景未出時(shí),放入水中終止顯色。

            注意事項(xiàng):

            1. 請根據(jù)一抗來源選擇試劑盒。

            2. western blotting DAB 顯色法操作簡單,但其敏感性與 ECL 發(fā)光發(fā)有一定的差距,一般只適用于豐 度較高的蛋白。

            3. 可以根據(jù)顯色結(jié)果來優(yōu)化實(shí)驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間。如背景過深,可延長膜封閉時(shí)間,加長最終漂洗次數(shù)與 時(shí)間。如果條帶過弱,可延長抗體孵育時(shí)間。

            4. 如果wan全沒有條帶,請檢查前期蛋白處理及實(shí)驗(yàn)過程, 如果確認(rèn)無誤,反復(fù)兩次依舊無結(jié)果, 請換用 ECL 發(fā)光法顯色。

            5. TBS-T(0.01M)配制方法:稱取 NaCl 8.5g ,Tris 1.21g ,用 800ml 的雙蒸水溶解,用鹽酸調(diào) PH 到 7.6,再加入 0.5ml Tween-20,用雙蒸水 加至 1000ml,混勻即可。(也可按照自己的配制習(xí)慣來配制)

             諾博萊德 DAB法顯色試劑盒 顯色與信號檢測

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