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            北京諾博萊德科技有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第1年

            13269192326

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            脲酶Urease UE測(cè)定試劑盒 氮代謝

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)BG6007

            品       牌NobleRyder/諾博萊德

            廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

            所  在  地北京市

            更新時(shí)間:2025-03-31 17:42:19瀏覽次數(shù):24次

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            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T/24S
            貨號(hào) BG6007 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
            主要用途 利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的 NH3-N
            UE 能夠水解尿素,產(chǎn)生氨和碳酸。UE 活性與有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān),反應(yīng)了氮素狀況。
            脲酶Urease UE測(cè)定試劑盒 氮代謝

            脲酶(Urease, UE)測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)

            分光光度法 50 管/24

            脲酶Urease UE測(cè)定試劑盒 氮代謝

            正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義:

            UE 能夠水解尿素,產(chǎn)生氨和碳酸。UE 活性與有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān),反應(yīng)了氮素狀況。

            測(cè)定原理:

            利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的 NH3-N。

            組成:

            產(chǎn)品名稱(chēng)

            BG6007-50T/24S

            Storage

            提取液:液體

            50ml

            4℃

            試劑一:粉劑

            1  

            4℃

            試劑二:液體

            12ml

            4℃

            試劑三A:液體

            1  

            4℃

            試劑三B:液體

            1  

            4℃

            試劑四:液體

            5ml

            4℃

            說(shuō)明書(shū)

            一份

            試劑一:粉劑×1 瓶,臨用前加入 5ml 蒸餾水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的試劑 4℃保存;

            試劑三A 液:液體×1 支,4℃保存;試劑三B 液:液體×1 瓶,4℃保存;臨用前將A 液倒入B 液中混合,待用;用不完的試劑 4℃保存一周;

            自備儀器和用品:

            可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml 比色皿、研缽、冰、和蒸餾水。

            樣本的前處理:

            1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:

            細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

            測(cè)定步驟:

            1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 578nm,蒸餾水調(diào)零。

            2、酶促反應(yīng)

            試劑名稱(chēng)

            測(cè)定管

            對(duì)照管

            樣本(μl)

            20

            20

            試劑一(μl)

            90


            蒸餾水(μl)


            90

            試劑二(μl)

            190

            190

            混勻,放入 37℃水浴 1h 后,10000g 25℃離心 10min,取上清液。 2、將上清液稀釋 10 倍(取 0.1ml 上清液,加入 0.9ml 蒸餾水)。

            3、測(cè)氨量(在 1ml 比色皿中加入下列試劑)


            測(cè)定管

            對(duì)照管

            稀釋后的上清液(μl)

            400

            400

            試劑三(μl)

            75

            75

            試劑四(μl)

            75

            75

            充分混勻,室溫放置 20min

            蒸餾水(μl)

            450

            450

            混勻,于 578nm 處,蒸餾水調(diào)零,讀吸光值A(chǔ),計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

            UE 活力計(jì)算:

            標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0915x +0.0373;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/ml),y 為吸光值A(chǔ)。 1、血清(漿)UE 活力的計(jì)算:

            單位的定義:每ml 血清(漿)每分鐘產(chǎn)生 1μg NH3-N 定義為一個(gè)酶活力單位。

            UE 活力(μg/min/ml)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反總÷V 樣÷T=27.32×(ΔA -0.0373)

            單位的定義:每天每g 土樣中產(chǎn)生 1μg NH3-N 定義為一個(gè)酶活力單位。

            2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中 1μg NH3-N 活力的計(jì)算:

            按樣本蛋白濃度計(jì)算:

            單位的定義:每mg 組織蛋白每分鐘產(chǎn)生 1μg NH3-N 定義為一個(gè)酶活力單位。

            UE 活力(μg/min/mg prot)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反總÷(V 樣×Cpr)÷T =27.32×(ΔA -0.0373) ÷Cpr

            按樣本鮮重計(jì)算:

            單位的定義:每g 組織每分鐘產(chǎn)生 1μg NH3-N 定義為一個(gè)酶活力單位。

            UE 活力(μg/min/ g 鮮重)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反總÷(W× V 樣÷V 樣總)÷T =27.32×(ΔA -0.0373) ÷W

            按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

            單位的定義:每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生 1μg NH3-N 定義為一個(gè)酶活力單位。

            UE 活力(μg/min/104 cell)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反總÷(500×V 樣÷V 樣總) ÷T=0.0546×ΔA

            10:稀釋倍數(shù);T:反應(yīng)時(shí)間,60min; V 反總:反應(yīng)體系總體積:0.3ml;V 樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.02ml;V 樣總:提取液體積,1ml;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml; W:樣本質(zhì)量, g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬(wàn)。


            脲酶Urease UE測(cè)定試劑盒 氮代謝

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