尿素氮（BUN）試劑盒說明書

分光光度法 50 管/48 樣

尿素氮BUN試劑盒 氮代謝

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

尿素是生物體內(nèi)含氮化合物分解的終產(chǎn)物，在尿酶催化下分解轉(zhuǎn)化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標(biāo)之一。

測(cè)定原理：

樣本中尿素氮在氯化高鐵一磷酸溶液中與二乙酰一肟和硫胺脲共煮，生成一種紅色的二嗪化合物，其顏色的深淺與尿素氮含量成正比，采用二乙酰一肟法測(cè)定尿素氮含量。

組成：

自備儀器和用品：

天平、研缽、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1ml 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

樣品處理：

組織：按照質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1ml 蒸餾水）加入蒸餾水，勻漿后于 25℃，10000g 離心 10min，取上清待測(cè)。

細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：蒸餾水體積（ml ）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加入 1ml蒸餾水），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）；然后 4℃，10000g離心 10min，取上清置于冰上待測(cè)。

血清或其它液體：直接檢測(cè)。

測(cè)定操作：

混勻，沸水浴 10min，冷卻后，540nm 下測(cè)定吸光值。△A=A 測(cè)定-A 空白?？瞻坠苤灰鲆还?。

尿素氮含量計(jì)算：

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y =2.048x + 0.0229，R2 = 0.9943；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/ml），y 為吸光值。

1、按照血清（漿）或者細(xì)胞培養(yǎng)液體積計(jì)算

尿素氮含量(mg/ml)= (△A-0.0229)÷2.048=0.4882×(△A-0.0229)

2、按照樣本質(zhì)量計(jì)算

尿素氮含量mg/g 鮮重)= (△A-0.0229)÷2.048×V 樣總÷W=0.4882×(△A-0.0229)÷W

3、按照蛋白濃度計(jì)算

尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.4882×(△A-0.0229) ÷Cpr

V 樣總：加入提取液體積，1 ml； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500 萬。

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