諾博萊德 病毒基因組DNA/RNA快速提取試劑盒 II

FlashPure Virus DNA/RNA Kit II病毒基因組 DNA/RNA 快速提取試劑盒 II

目錄號(hào)：91212

產(chǎn)品內(nèi)容

自備試劑

無水乙醇

保存條件

Poly Carrier 置于-20℃保存，其他組分置于室溫（15 ~ 25℃）保存。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡介

采用特異性結(jié)合病毒 DNA/RNA 的離心吸附柱和獨(dú)te的緩沖液系統(tǒng)，病毒 DNA/RNA 提取試劑盒適合于從無細(xì)胞體液，包括血漿、血清、腹水、培養(yǎng)細(xì)胞上清液、腦脊髓液及尿液等中快速提取高純的病毒 DNA/RNA。

該產(chǎn)品可以滿足絕大多數(shù)的病毒 RNA/DNA 的同時(shí)提取要求， 如病毒RNA：HCV（丙肝病毒），HIV（艾滋病毒），和 HTLV（人類嗜 T 淋巴細(xì)胞病毒）； 病毒 DNA：HBV（乙肝病毒）和 CMV（巨細(xì)胞病毒）等等。

病毒裂解后，DNA/RNA 后在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜（特別配備了 Poly Carrier 可以從體系中輕松捕獲微量核酸），再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，將鹽、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈的病毒 DNA/RNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。純化后的病毒核酸無雜質(zhì)和 PCR 抑制劑，可直接適用于 PCR/RT-qPCR 分析。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 節(jié)省時(shí)間，簡捷，單個(gè)樣品操作一般可在 20 分鐘內(nèi)完成;

2. 應(yīng)用廣泛：可提取多種不同的液體樣本。

注意事項(xiàng)

1. Poly Carrier：

如果起始處理量很少，我們推薦使用 Poly Carrier，如果預(yù)期有較大量核酸產(chǎn)量，用戶可以根據(jù)需要選擇是否加入 Poly Carrier。

2. Poly Carrier 的使用方法：在每個(gè)樣品提取所需裂解液 VLB 中加入 4μl Poly Carrier 儲(chǔ)存溶液， 將裂解液 VLB 與 Poly Carrier 溶液充分顛倒混勻即可(裂解液 VLB 容易起泡沫，請勿使用渦旋振蕩混勻)。也可根據(jù)樣品數(shù)量，在總共需要的裂解液 VLB 中加入總共需要的 Poly Carrier 混勻備用?；旌弦涸谑覝?nbsp;24 小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

操作步驟（所有離心步驟均可在室溫下進(jìn)行，不影響提取效果。）

操作前，請先在漂洗液 RW 加入無水乙醇，加入體積詳見標(biāo)簽。

1. 取 200 μl 血清等體液（需回復(fù)到室溫，不足可用 0.9% NaCl 或者 PBS補(bǔ)足）轉(zhuǎn)入1.5ml 離心管中，加入 400 μl 裂解液 VLB， 立刻渦旋振蕩充分混勻。

（注意：如果處理樣品量小或者病毒預(yù)期濃度較低，建議在 400 μl 裂解液 VLB 中加入4μl Poly Carrier 儲(chǔ)存溶液。）

2. 室溫 (15-25℃) 放置 10 分鐘，每隔 5 分鐘，振蕩混勻一次。

3. 加入 450 μl 無水乙醇，立刻渦旋振蕩充分混勻。

（注意：如果周圍環(huán)境高于 25℃，乙醇需要冰上預(yù)冷后再加入。）

4. 每次轉(zhuǎn)移≤750 μl 上清混合液（包括沉淀）至 RNA 吸附柱中（吸附柱

放入收集管中），12,000 rpm 離心 1 min，倒棄濾液，此時(shí)，RNA 被

吸附在膜上。重復(fù)此過程，直到溶液全部上柱。

5. 加入500μl去蛋白液RE，12,000 rpm 離心 30 sec，倒棄濾液。

6. 加入500μl漂洗液RW，12,000 rpm 離心 30 sec，倒棄濾液。

（注意：漂洗液 RW 中按要求加入無水乙醇，用后立即蓋緊瓶蓋，以防乙醇揮發(fā)。）

7. 重復(fù)步驟6一次。

8. 將RNA吸附柱放回空收集管中，12,000 rpm 離心 2 min，甩干膜上殘留的乙醇。

9. 取出離心吸附柱，放入一個(gè)新的 RNase-Free1.5 ml 離心管中，在吸附膜的中央懸空滴加 30 ~ 50 μl 的 RNase-Free ddH2O 洗脫，室溫放置1 min。12,000 rpm 離心 1 min，管底即 RNA 溶液。

（注意：如要要提高 RNA 濃度，可將得到的溶液重新加入吸附柱中，室溫放置1 min，再次離心收集）

10. 病毒DNA可以存放在 2-8℃，如果要長時(shí)間存放，請置于-20℃。病毒RNA建議最好立刻使用，否則立刻短期置于-70℃?zhèn)溆谩?/span>

相關(guān)產(chǎn)品：

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)

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