gDNA殘留清除劑 RNA提取配套產(chǎn)品

gDNA 殘留清除劑gDNA Eraser Reagent

目錄號:91210

產(chǎn)品內(nèi)容：

自備試劑：

氯仿、異丙醇、RNase-Free H2O、75%乙醇（用 RNase-Free H2O 配制）

保存條件：

2~8℃避光保存，有效期 24 個月。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡介：

非酶法清除RNA樣品中的基因組DNA污染。每ml試劑處理～100μg RNA樣品。

很多用戶在提取RNA的時候由于操作因素或者RNA抽提試劑質(zhì)量問題，造成所得到的RNA樣品中混雜基因組污染，在普通或者變性電泳的時候直接肉眼可見程度不一的DNA污染雜帶。即使用市售的RNase-free的DNase消化 DNA也不容易清除完quan，而且常常導(dǎo)致RNA降解。DNAeraser 基因組DNA污染清除劑不含DNA酶，在強(qiáng)烈抑制RNA酶的條件下徹di清除RNA樣品中的污染DNA雜帶和蛋白質(zhì)污染，同時進(jìn)一步純化RNA。最后通過異丙醇沉淀回收的RNA純度極gao，完quan不影響原有RNA質(zhì)量和下游應(yīng)用。

操作步驟

以下操作以 100μl RNA 溶液為例，為方便操作可用 DEPC 處理水將不足 100μl 的 RNA 樣品的體積補(bǔ)充到 100 μl。（RNA 濃度很低的不要補(bǔ)水。）

1.     每 100 μl RNA 溶液加入 1ml 基因組DNA 污染清除試劑。充分振蕩混勻，冰上放置 1 分鐘。

2.     加入 200 ul 氯仿，蓋好管蓋，劇烈充分振蕩 15 sec，冰上放置 1 min。

3.    于 4℃， 12,000 rpm 離心 10 min。

4.    取上清約 500μl 轉(zhuǎn)移到新管。勿觸動中間相，否則重新離心。

5.    可選步驟:加入核酸助沉劑 Ploy Carrier（Cat：R117）2 μl ，充分混勻。加入核酸助沉劑后 RNA 特別是低濃度 RNA 的回收率顯著增加，并使 RNA 沉淀容易辨認(rèn)。核酸助沉劑不影響 RNA 及其下游實(shí)驗(yàn)。如果原樣品的 RNA 濃度較高，可以省略此步驟。

6.      加入等體積的異丙醇，顛倒混勻，室溫放置 10 min。

7.  于 4℃，12,000 rpm 離心 10 min，棄上清。

8.      加入 1ml 75%乙醇洗滌沉淀。于 4℃，12,000 rpm 離心 3 min，倒出上清，注意不要倒出沉淀，剩余的少量液體短暫離心，然后用槍頭吸出，注意不要吸棄沉淀。

9.     室溫放置 2~3 min，晾干。加入適量的 RNase-Free ddH2O，吹打混勻，充分溶解 RNA。（注意：沉淀不要過分干燥，以免難于溶解。）

10.  得到的 RNA，可直接用于下游戲?qū)嶒?yàn)，或于-70℃保存，防止降解。

相關(guān)產(chǎn)品：

71118-100   Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100   Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500   2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR 儀)

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