min6 小鼠胰島β細胞

細胞背景：

研究者已經(jīng)從通過猿病毒 40 T 抗原基因在轉基因小鼠中靶向表達獲得的胰島素瘤中建立了兩種 細胞系：MIN6 和 MIN7，產(chǎn)生胰島素和 T 抗原，并具有胰腺β細胞的形態(tài)學特征。MIN6 細胞表 現(xiàn)出與培養(yǎng)的正常小鼠胰島細胞相當?shù)钠咸烟钦T導胰島素分泌，而 MIN7 細胞則不然。兩種細胞 系都產(chǎn)生高水平的肝型葡萄糖轉運蛋白（GT）mRNA。腦型 GT mRNA 在 MIN7 細胞中也以相當水 平存在，但在 MIN6 細胞中幾乎檢測不到，這表明肝型 GT 的表達與葡萄糖誘導的胰島素分 泌有關。MIN6 細胞在細胞表面不表達主要組織相容性（MHC）I 類或 II 類抗原。然而，用干擾素 -γ 治療可誘導高水平的 MHC I 類抗原，并且干擾素-γ 和腫瘤壞死因子-α 的組合會在細胞表 面誘導 MHC II 類抗原。這些結果強調 MIN6 細胞系保留了正常β細胞的生理特征。MIN6 細胞系 對于分析β細胞調節(jié)胰島素分泌以響應細胞外葡萄糖濃度的分子機制特別有用。我們討論了 GT 亞型在β細胞葡萄糖傳感中的可能作用。

種屬: 小鼠

品系： C57BL/6

組織來源: 胰腺

疾病: 小鼠胰島素瘤

年齡: 13周

細胞形態(tài): 上皮細胞樣

生長特性: 貼壁生長

含量：>1x106  細胞數(shù)

規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

 用途：僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。               

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）DMEM培養(yǎng)基+10%FBS優(yōu)質胎牛血清+1%P/S雙抗

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

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