阿維菌素類藥物是由阿維鏈霉菌產(chǎn)生的一類廣譜高效獸用抗寄生蟲藥，包括阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素和乙酰氨基阿維菌素等。阿維菌素類藥物可對(duì)動(dòng)物體外如疥螨、蜱蟲、跳蚤、線蟲等寄生蟲進(jìn)行防治，降低寄生蟲感染帶來的負(fù)面影響。但隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)阿維菌素類藥物對(duì)多種生物類群均有毒副作用。根據(jù)GB 31650-2019要求，規(guī)定了阿維菌素不得在泌乳期使用，在牛奶中伊維菌素、多黏菌素和乙酰氨基阿維菌素三種藥物的殘留限_量要求依次為不高于10 μg/kg、15 μg/kg、20 μg/kg。
安譜實(shí)驗(yàn)參照《GB 31659.4-2022 奶及奶粉中阿維菌素類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》，采用CNWBOND HC-C18 SPE固相萃取柱凈化，對(duì)牛奶、奶粉兩種基質(zhì)中阿維菌素類藥物殘留量進(jìn)行測(cè)定，方法回收率高，精密度好。
一、樣品前處理
樣品提取
稱取牛奶2 g（準(zhǔn)確至±0.05 g）或奶粉0.5 g（準(zhǔn)確至±0.01 g）于50 mL 離心管中，加乙腈8 mL，渦旋后200 r/min 水平振蕩5 min，8000 r/min離心8 min，轉(zhuǎn)移上清液至另一50 mL離心管中，加水10 mL、三乙胺25 μL，混勻，備用。
SPE小柱操作：
固相萃取小柱：CNWBOND HC-C18 SPE，貨號(hào)SBEQ-CA0854 ，規(guī)格500 mg/6 mL；
活化：5 mL乙腈；
平衡：5 mL 淋洗溶液（30%乙腈水溶液，含0.02%三乙胺）；
上樣：全部備用液，速度每秒1滴；
淋洗：5 mL淋洗液，抽干，5 mL異辛烷淋洗，抽干；
洗脫：5 mL乙腈洗脫，洗脫后抽干；
濃縮：收集洗脫液，50℃水浴氮?dú)獯蹈?，殘余物中?0%乙腈水溶液1.0 mL，渦旋1 min充分溶解，濾膜（有機(jī)相尼龍針式濾器，SCAA-104）過濾后供液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定。
基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線
精密量取阿維菌素類藥物標(biāo)準(zhǔn)工作液適量，用50%乙腈水溶液稀釋阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素和乙酰氨基阿維菌素濃度分別為0.5 ng/mL、1 ng/mL、2 ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL，50ng/mL、100ng/mL和400ng/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液。各取標(biāo)準(zhǔn)工作液1.0 mL，分別加入空白試料經(jīng)提取、凈化和吹干后的殘余物中，充分溶解，作為基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液，過微孔濾膜（有機(jī)相尼龍針式濾器，SCAA-104）后上機(jī)測(cè)定。以特征離子質(zhì)量色譜峰面積為縱坐標(biāo)、基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
二、儀器條件
2.1 液相色譜：
a) Athena C18-WP 液相色譜柱（2.1 mm*50 mm，1.8 μm，貨號(hào)：LAEQ-2105UA）；
b）柱溫：30℃
c）流速：0.40 mL/min
d）進(jìn)樣量：10 µL；
f）流動(dòng)相：A：含0.1%甲酸的乙腈溶液，B：含0.1%甲酸的水溶液；
表2-1 液相色譜梯度洗脫條件
2.2 質(zhì)譜條件：
a) 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；
b) 離子源：電噴霧離子源（ESI)；
c) 檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM)；
d) 掃描方式：正離子模式；
e) 離子源溫度：500℃；
f) 噴霧電壓：5500 V；
表2-2 待測(cè)目標(biāo)化合物定性、定量離子對(duì)及電壓參考條件
三、實(shí)驗(yàn)譜圖
3.1 牛奶基質(zhì)譜圖：
圖3-1 牛奶基質(zhì)空白譜圖
圖3-2 牛奶基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液（20 μg/L）譜圖
圖3-3 牛奶基質(zhì)高水平加標(biāo)（20 μg/L）譜圖
3.2 奶粉基質(zhì)譜圖：
圖3-4 奶粉基質(zhì)空白譜圖
圖3-5 奶粉基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 μg/L）譜圖
圖3-6 奶粉基質(zhì)高水平加標(biāo)（100 μg/L）譜圖
四、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線：
表4-1 待測(cè)目標(biāo)物基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線
4.2加標(biāo)回收率數(shù)據(jù)：
表4-2 牛奶和奶粉基質(zhì)加標(biāo)回收率（n=3）
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)論
外標(biāo)法處理數(shù)據(jù)，牛奶和奶粉兩種基質(zhì)中阿維菌素類藥物的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程均線性良好，R2 > 0.995。在高、低水平下加標(biāo)回收率均在70%—120%范圍內(nèi)，滿足國標(biāo)實(shí)驗(yàn)要求。
六、產(chǎn)品推薦
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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