非靶向蛋白質(zhì)組學(xué)中有多種定量方法用于研究蛋白質(zhì)表 達以及翻譯后修飾的調(diào)控，總體來說分為三類 : 非標記定 量（label free），體內(nèi)代謝標記和體外化學(xué)標記。穩(wěn)定 同位素氨基酸培養(yǎng)摻入標記（Stable Isotope Labeling by Amino acid in Cell culture, SILAC）是使用為廣泛的一種 體內(nèi)代謝標記方法[1]，除了能都實現(xiàn)對細胞系樣品實的定 量研究外，SILAC 方法還可以用于組織樣品的定量蛋白質(zhì) 組學(xué)研究。通過使用合適的 SILAC 標記的細胞系樣品作為 內(nèi)標，我們可以對組織樣本的全蛋白質(zhì)組[2]，乃至翻譯后 修飾[3] 進行系統(tǒng)的定量研究。
液相色譜儀： Easy nLC 1200（ThermoFisher Scientific） 分析柱：自制 C18 納升級噴針柱，長度 20 cm，內(nèi)徑 75 µm， 粒徑 3 µm 流動相：A，0.1% 甲酸/水；B，0.1% 甲酸/80% 乙腈 梯度：0-2 min，4-8% B；2-125 min，8-28% B； 125-140 min，28-40% B；140-142 min，40-99% B； 142-150 min，99%B 流速：300 nL/min
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