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免疫熒光實(shí)驗(yàn)方法中需要注意的環(huán)節(jié)2022/5/7

免疫熒光方法中的重要環(huán)節(jié):1、冰凍切片制備：建議用新鮮組織，否則組織細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)破壞，易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等，防止裂片和脫片嚴(yán)重。2、組織切片固定：切好片風(fēng)干后立即用冰...

組織切片的免疫熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)2022/5/7

免疫熒光標(biāo)記技術(shù)（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標(biāo)記上熒光素，當(dāng)與其相對(duì)應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時(shí)，在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就...

腫瘤細(xì)胞體外傳代培養(yǎng)及保種2022/5/7

一.細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)將液氮或-80℃保存的腫瘤細(xì)胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養(yǎng)基混勻已融化的腫瘤細(xì)胞懸液，于1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養(yǎng)基質(zhì)混勻細(xì)胞沉淀，再150...

懸浮細(xì)胞的免疫熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)2022/5/7

免疫熒光標(biāo)記技術(shù)（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標(biāo)記上熒光素，當(dāng)與其相對(duì)應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時(shí)，在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就...

成年小鼠的灌流實(shí)驗(yàn)2022/4/30

進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌流是獲得良好的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果以及保存腦、腎、心臟和其他許多器官所必需的。對(duì)于未經(jīng)訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)人員，初次進(jìn)行灌流可能會(huì)失敗，故建議首先用一些對(duì)照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物練習(xí)，以熟悉此過程?；痉桨笇?shí)驗(yàn)材料小...

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)2022/4/30

名稱：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血關(guān)鍵詞：動(dòng)物,取血,方法目的：規(guī)范實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(家兔、狗，豚鼠)取血的方法和途徑,主體內(nèi)容：（一）家兔1．耳緣靜脈取血法選好耳緣靜脈，拔去被毛，用二甲苯或酒精涂擦局部，小血管夾夾緊耳根...

藥物半數(shù)致死量LD50的測定實(shí)驗(yàn)2022/4/30

實(shí)驗(yàn)方法原理藥物半數(shù)致死量LD50是指藥物急性毒性實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)動(dòng)物死亡率為50%時(shí)的單次給藥劑量，單位通常為mg/kg。例如，當(dāng)某藥物給予400mg劑量時(shí)，可致使一半家兔（體重約為4kg）死亡，則其LD...

實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍模型的建立與防治2022/4/30

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.學(xué)習(xí)大鼠胃潰瘍(gastriculcer)模型建立的方法。2．觀察藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍的防治作用。3．了解組織切片和HE染色方法?！緦?shí)驗(yàn)原理】消化性潰瘍(pepticulcer)是由多種...

實(shí)時(shí)熒光定量PCRrealtime PCR2022/4/30

實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞樣品試劑、試劑盒RNA提取試劑盒熒光定量PCRMixTRIZOLdNTP氯仿逆轉(zhuǎn)錄酶MMLV異丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2瓊脂糖溴化乙錠MOPS甲醛乙酸鈉EDTAEB溴酚...

ELISA 實(shí)驗(yàn)常見問題解析2022/4/23

ELISA實(shí)驗(yàn)因靈敏度高，特異性強(qiáng)在生物科研上得到了廣泛的認(rèn)可，但對(duì)初學(xué)者而言，如不注意實(shí)驗(yàn)操作過程中的各個(gè)環(huán)節(jié)，可能會(huì)對(duì)最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生比較大的影響，比如實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)白板，顯色弱靈敏度低，花板無梯度背...

吉姆薩染色實(shí)驗(yàn)2022/4/23

吉姆薩染液由天青，伊紅組成。染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同。但本法對(duì)細(xì)胞核和寄生蟲著色較好，結(jié)構(gòu)顯示更清晰，而胞質(zhì)和中性顆粒則著色較差。基本方案實(shí)驗(yàn)材料原位雜交玻片試劑、試劑盒吉姆薩染色液磷酸鈉緩...

蛋白質(zhì)檢測2022/4/23

蛋白提取組織樣本總蛋白提取（小鼠肝組織）1、頸椎脫臼處死小鼠，75%乙醇擦拭皮膚，剪開腹腔，剪切肝臟組織。2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL。3、稱取0.6g左右肝組織，在平皿中剪碎組織，并轉(zhuǎn)移...

細(xì)胞免疫組化2022/4/23

1.對(duì)于貼壁細(xì)胞或細(xì)胞涂片PBS洗滌一次。2.如果細(xì)胞貼得不牢，可以干燥樣品使細(xì)胞貼得更牢。3.用4%多聚甲醛固定細(xì)胞15分鐘，用PBS洗滌一次。4.將切片移入濕盒中加入新鮮配制的3%雙氧水,以去除內(nèi)...

western blot 之發(fā)光鑒定2022/4/23

一般使用辣根過氧化物酶HRP-ECL發(fā)光法或堿性磷酸酶AP-NBT/BICP顯色法。1．HRP-ECL發(fā)光法：將A、B發(fā)光液按比例稀釋混合。膜用去離子水稍加漂洗，濾紙貼角吸干，反貼法覆于A、B混合液滴...

楊梅苷對(duì)大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用2022/4/17

目的：研究楊梅苷對(duì)大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法：60只SD大鼠隨機(jī)分為6組:正常對(duì)照組、模型組、陽性給藥組(維拉帕米100μg/L)和楊梅苷低中高劑量組(2.5,5,10mg/L...