從原理上來講,3D光片顯微技術與傳統(tǒng)的寬場顯微技術或共聚焦顯微技術有很大不同,后兩者需要照射或掃描成像目標物中的整個樣本,而光片顯微鏡只需要用薄層光(實際上為2D)從側邊照射樣本。隨后從樣本的上部或下部檢測所產生的熒光信號,檢測方向與薄層光線的照射方向相垂直。因此,該技術的光學層析能力(optical sectioning,即層面上樣本結構的分辨能力)不像共聚焦成像技術那樣取決于焦點處光子的采集,而是來自于在開始時每次僅激發(fā)一個層面上的熒光基團。換言之,光片顯微技術只會激發(fā)一個焦平面上或旁邊的分子,因此降低了光毒性,并且提高了長時間對活體樣本進行成像的能力?;?D光片熒光顯微鏡本身的技術特點,該系統(tǒng)滿足了快速、大體積3D成像、低光毒性及長時間成像的需要。
應用領域:
1.3D高分辨率、高速實時成像:透明化樣本3D成像、熒光標記的活體樣本的結構特性、微弱熒光信號的高速3D成像。
1.3D高分辨率、高速實時成像:透明化樣本3D成像、熒光標記的活體樣本的結構特性、微弱熒光信號的高速3D成像。
2.模式動物整體3D成像:果蠅,斑馬魚,線蟲等。
3.細胞動態(tài)過程的快速成像,例如:細胞遷移、血流、血管發(fā)育、Ca2+成像。
4.動物器官3D成像:心臟、腦、眼、耳等器官發(fā)育。
5.海洋生物熒光成像:海鞘、魷魚、浮游生物及扁形蟲。
6.3D細胞長時程培養(yǎng)實時成像。
7.形態(tài)和發(fā)育生物學研究:胚胎成像。
8.植物生物學研究:觀察敏感的發(fā)育過程和執(zhí)行生理測量。
9.藥物藥理毒理及藥代動力學研究。
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