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						研域（上海）化學(xué)試劑有限公司
            中級會員 | 第18年
            
					
            
				
            
			
            
		
            
	
            
	
	
            
		
            
			
		
            
	
            

            

	
            
		
            
			
			
            
							
            
					
            上海研域生物操作ELISA試劑盒鋪板的實(shí)驗(yàn)小技巧2024/01/18
            
					
            
				上海研域生物在未來的發(fā)展中，我們將會繼續(xù)誠信提供科研試劑，不辜負(fù)大家對上海紀(jì)寧生物的期望，如果是試驗(yàn)操作的問題，技能人員能夠給您一些改進(jìn)的主張。做ELISA試劑盒生物學(xué)試驗(yàn)，ELISA試劑盒鋪板是比較常見的一個(gè)試驗(yàn)。但是有很多人鋪得不是很均勻，要么中心密周圍稀，要么周圍密中心稀。遇到這些情況該怎么辦呢？接下來就為大家介紹一下在實(shí)驗(yàn)過程中操作ELISA試劑盒鋪板的技巧。一般是96孔板，每孔是加100微升ELISA試劑盒懸液，從孔的左邊靠近底部加入，加完半邊板后，將未加的ELISA試劑盒懸液混一下再
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)至關(guān)重要的步驟2024/01/11
            
					
            
				ELISA試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。雖然ELISA試劑盒的操作步驟看似簡單，但沒做到位的話就會影響實(shí)驗(yàn)的效果。所以ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)至關(guān)重要的步驟有;—、重要的洗滌;不充分的洗滌會導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來不理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。有必要的話，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過高，懷疑洗滌不夠時(shí)，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。二、關(guān)鍵的封閉:封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性2024/01/03
            
					
            
				ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性：在ELISA試劑盒中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:(1)固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、ELISA試劑盒試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯(聚苯乙烯磺酸鈉)凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。(2)包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí)，要求純
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒的存放與保存2023/12/26
            
					
            
				收到ELISA試劑盒后立即儲存于2-8℃下：效期見試劑盒標(biāo)簽;一切成分在2-8℃下可保存至有效期。運(yùn)用前：一切試劑平衡至室溫：不同批次的試劑不能交流運(yùn)用。1.停止液：1瓶：12ml：0.5M硫酸：儲存于2-8℃至有效期。2.胎球蛋白A示蹤抗體：1瓶：0.6ml：濃縮：HRP符號的抗人胎球蛋白A示蹤抗體溶于穩(wěn)定的蛋白基質(zhì)中;此試劑運(yùn)用前需用示蹤劑抗體稀釋液進(jìn)行稀釋;儲存于2-8℃至有效期。3.包被板：96孔：包被了抗人胎球蛋白A抗體;微孔板固定于板架上：密封于含有干燥劑的鋁箔密封袋內(nèi);儲存于2-8
					
            
				
            
								
            
					
            挑選ELISA試劑盒須知2023/12/19
            
					
            
				ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來，得到很多科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測。①靈敏度:反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的低量的才能，用戶可根據(jù)自個(gè)樣本中待檢目標(biāo)的量挑選合適的試劑盒，
					
            
				
            
								
            
					
            人原代肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞特性2023/12/12
            
					
            
				人原代肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞特性:1)細(xì)胞來源于人正常肺組織。2)細(xì)胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）免疫熒光染色為陽性。3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。5)細(xì)胞生長方式：上皮樣細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。細(xì)胞詳述：肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義。它還具有代謝功能，可以執(zhí)行一定的非呼吸功能。在肺損傷中，肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞是活性氧類的重要靶細(xì)胞之一。在肺炎的發(fā)生過程中，神經(jīng)體液
					
            
				
            
								
            
					
            關(guān)于ATCC細(xì)胞復(fù)蘇程序2023/12/05
            
					
            
				ATCC是美國細(xì)胞庫，擁有超過30,000種細(xì)胞株，是生命科學(xué)研究的重要資源。ATCC常用細(xì)胞株鑒定是指對ATCC細(xì)胞株進(jìn)行鑒定，以確保其純度、認(rèn)證和可重復(fù)性。ATCC常用細(xì)胞株鑒定的目的是為了保證ATCC細(xì)胞株的質(zhì)量和可靠性。ATCC細(xì)胞株鑒定包括細(xì)胞形態(tài)學(xué)、生長特性、細(xì)胞表型、基因型等方面的檢測。這些檢測可以幫助研究人員確定細(xì)胞株的身份、純度和穩(wěn)定性，從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性。ATCC細(xì)胞復(fù)蘇程序：1、準(zhǔn)備細(xì)胞培養(yǎng)容器(如T-75細(xì)瓶)，加入至少10ml適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，并平衡溫度及p
					
            
				
            
								
            
					
            上海研域：原代細(xì)胞的定義2023/11/29
            
					
            
				原代細(xì)胞(primaryculturecell)是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋自酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞，稱為原代細(xì)胞。原代細(xì)胞生長緩慢，一般認(rèn)為，培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長會出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長、繁殖和傳代，進(jìn)行細(xì)胞生命過程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問題的研究。原代細(xì)胞是接近和最能反映體內(nèi)生長
					
            
				
            
								
            
					
            人ELISA試劑盒操作步驟2023/11/21
            
					
            
				人ELISA試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在一、二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100ul，然后在一、二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻;然后從一孔、二孔中各取100ul分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50ul棄掉，再各取50ul分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50ul分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50
					
            
				
            
								
            
					
            關(guān)于ELISA試劑盒試驗(yàn)時(shí)的試劑預(yù)備2023/11/15
            
					
            
				優(yōu)質(zhì)的試劑盒，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA試劑盒檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件.但是往往實(shí)驗(yàn)中很多操作者都沒按照正確的操作來進(jìn)行!操作中稍微的一點(diǎn)點(diǎn)差池，就會影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性!所以請規(guī)范使用ELISA試劑盒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)!ELISA試劑盒試驗(yàn)的試劑預(yù)備在臨床試驗(yàn)室，對試劑預(yù)備一般不太留意，一般的做法是，在試驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用，而疏忽了這種做法有也許影響后邊溫育時(shí)刻不行的疑問，其直接的結(jié)果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測呈現(xiàn)假陰性。因此在ELISA測定中試劑的預(yù)備要害的是，在試驗(yàn)開端前，將
					
            
				
            
								
            
					
            操作大鼠ELISA試劑盒過程中需要注意的事情2023/11/15
            
					
            
				1.大鼠ELISA試劑盒試劑的選擇通常所使用的ELISA試劑盒或其它試劑，必須注冊批準(zhǔn)、批檢合格、臨床評估質(zhì)量優(yōu)良，并且均在有效期內(nèi)使用。不同批號試劑組分不得混用，過期的試劑一律不得使用，首先提升實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。2.大鼠ELISA試劑盒樣品的采集與保存用于檢測的標(biāo)本應(yīng)保持新鮮，標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免溶血，因紅細(xì)胞破裂可釋放過氧化物酶活性物質(zhì)，干擾結(jié)果，會出現(xiàn)假陽性;標(biāo)本如果受細(xì)菌污染，會因菌體中含有內(nèi)源性過氧化物酶而出現(xiàn)假陽性;混濁或有沉淀的血清樣品應(yīng)離心，待澄清后方可檢測，避免對結(jié)果造成影響。
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒應(yīng)該如何保存？2023/10/25
            
					
            
				ELISA實(shí)驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因索，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各域中。ELISA試劑盒應(yīng)該如何保存？保存不當(dāng)會導(dǎo)致試劑失效或影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果！1、要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅索基團(tuán)，其有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。2、樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染，一則細(xì)
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA實(shí)驗(yàn)條件重要的選擇2023/10/24
            
					
            
				在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。(2)ELISA試劑盒包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度，
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)假陽性結(jié)果和假陰性結(jié)果的原因2023/10/17
            
					
            
				ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。除了盒子本身質(zhì)量外，操作中很多因素都影響試驗(yàn)的正常結(jié)果。*常出現(xiàn)的問題是顯色淡，靈敏度偏低、重復(fù)性不佳、假陽性結(jié)果和假陰性結(jié)果，不管出現(xiàn)什么樣的結(jié)果，不但浪費(fèi)客戶的金錢、樣本、精力，更重要的是對臨床做出了危險(xiǎn)判斷。在這里我們分析ELISA試驗(yàn)非正常檢測結(jié)果產(chǎn)生的常見原因，并探討其解決辦法，以提高檢測質(zhì)量。1.標(biāo)本的采集與保存當(dāng)標(biāo)本采集保存不當(dāng)產(chǎn)生溶血時(shí)，紅細(xì)胞中的血紅蛋白釋放到血清中，血紅蛋白具有過氧化物酶的性質(zhì)，其通過吸附或“PP效應(yīng)”(蛋白質(zhì)間相
					
            
				
            
								
            
					
            研域生物分享elisa實(shí)驗(yàn)時(shí)需要注意的問題2023/10/10
            
					
            
				elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)以靈敏度較高﹑特異性較好的特點(diǎn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全﹑花板等結(jié)果。elisa實(shí)驗(yàn)操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的，無論是對實(shí)驗(yàn)的硬件條件還是對實(shí)驗(yàn)的操作人員的技術(shù)要求，都是如此。下面研域生物分享10條在進(jìn)行elisa實(shí)驗(yàn)時(shí)需要注意的問題。1.要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但盡量在有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒常見液體祥本處理方法2023/09/26
            
					
            
				ELISA即酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，是目前廣泛應(yīng)用于各種抗原抗體檢測的方法，主要有靈敏度高和特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。ELISA操作步驟看似簡單，整個(gè)測定過程中卻有諸多影響因素，導(dǎo)致檢測結(jié)果可能與實(shí)際結(jié)果偏差較大。ELISA試劑盒常見液體祥本處理方法1、血清:用無菌管搜集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，細(xì)心搜集上清，保存過程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。2、尿液:用無菌管搜集，2-8C條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清，保存過程
					
            
				
            
								
            
					
            血清影響ELISA實(shí)驗(yàn)假陽怎么辦？2023/09/19
            
					
            
				人血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF）可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的FC段直接結(jié)合，從而導(dǎo)致假陽性。要怎樣解決呢？請看以下操作。①用F(ab)2替代完整的IzG;②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性(63C，10nin)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標(biāo)本稀釋液中同樣有效);檢測抗原時(shí)，可以用2-疏基乙酸等加入到標(biāo)本稀釋液中，使RF降解。(2)補(bǔ)體ELISA&系統(tǒng)中固相一抗和標(biāo)記二抗過程中，抗體分子發(fā)生變構(gòu)，其FC段的補(bǔ)體C1q分子結(jié)合位點(diǎn)被暴露出來，使C1q可以將二者連接起來，從
					
            
				
            
								
            
					
            您知道ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)洗滌的重要注意事項(xiàng)嗎？2023/09/12
            
					
            
				洗滌是ELISA實(shí)驗(yàn)中是最多次數(shù)的操作，也是非常重要的步驟。不嚴(yán)格的洗滌容易出現(xiàn)洗不干凈或交又污染現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)重復(fù)效果差的現(xiàn)象。不管用多道加樣器、洗瓶、吸管，還是洗板機(jī)，嚴(yán)格按照說明書操作不要減少步驟洗滌的洗滌體積、洗滌時(shí)間和洗滌次數(shù)。注意標(biāo)準(zhǔn)化操作將減少實(shí)驗(yàn)誤差和不同實(shí)驗(yàn)之間的誤差。操作者常出現(xiàn)洗板不干凈現(xiàn)象，請比照“手工洗板小貼士”操1.洗液不要溢出孔外，以免污染相鄰的孔，特別是每次洗板的前兩遍，若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔，其造成的交叉污染的孔是洗不掉的，背景肯定會增高。2.特別注意
					
            
				
            
								
            
					
            影響ELISA試劑盒靈敏度常出現(xiàn)的問題及解決辦法2023/09/05
            
					
            
				ELISA試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。上海研域生物將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)一下，以期給同行帶來—些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。1、超過有效期。試劑盒必須在有效期內(nèi)使用，超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號。2、試劑盒沒有按規(guī)定進(jìn)行保存，受高溫影響。3、試劑、樣品用前未平衡至室溫4、加入試劑的體積和時(shí)間有誤，移液器計(jì)量不準(zhǔn)，吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔。5、洗板及加樣
					
            
				
            
								
            
					
            如何挑選適合實(shí)驗(yàn)的ELISA試劑盒之實(shí)驗(yàn)類型2023/08/22
            
					
            
				ELISA是一種廣泛應(yīng)用于大分子蛋白和小分子激素定量檢測的免疫診斷技術(shù)。ELISA實(shí)驗(yàn)操作雖然不算復(fù)雜，但也有許多需要注意的事項(xiàng)。各個(gè)環(huán)節(jié)稍有不慎，就可能對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。ELISA試劑盒有多種類型，不過它們都有一個(gè)共同特點(diǎn)，就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。In-cellELISA和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)ELISPoT是兩種特殊的類型，In-cellELISA需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測。ELISPoT有點(diǎn)像蛋白印跡We
					
            
				
            
							
				
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