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						研域（上海）化學(xué)試劑有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第18年
            
					
            
				
            
			
            
		
            
	
            
	
	
            
		
            
			
		
            
	
            

            

	
            
		
            
			
			
            
							
            
					
            ELISA的移液和洗滌技術(shù)2023/03/16
            
					
            
				免疫檢測(cè)法的精確性表現(xiàn)為單次實(shí)驗(yàn)孔間（批內(nèi)）的重復(fù)性和多次實(shí)驗(yàn)之間（批間）的重復(fù)性。CV值高則表明精確度低，通常由以下兩個(gè)原因造成：移液技術(shù)和洗滌技術(shù)。移液技術(shù)1.移液時(shí)，槍頭應(yīng)對(duì)準(zhǔn)孔中央，避免接觸孔壁及底部。2.移液后輕輕晃動(dòng)混勻試劑。3.如果您的樣品具有黏性，請(qǐng)預(yù)先潤(rùn)洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時(shí)等待片刻使體積平衡后再取出。4.移液不充分或移液體積不均，說(shuō)明移液器需要校正。必要時(shí)請(qǐng)檢查移液器并重新校正。5.加樣時(shí)，不同的試劑標(biāo)準(zhǔn)品和樣本間都要確保更換槍頭，避免交叉污染。6.確保使用合適的
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA產(chǎn)品相關(guān)要素2023/03/08
            
					
            
				小伙伴們?yōu)镋LISA實(shí)驗(yàn)選購(gòu)試劑盒時(shí)，是不是有很多問號(hào)?選什么物種？什么指標(biāo)？什么檢測(cè)限？怎樣的精密度，稀釋線性，特異性是優(yōu)秀的？今天小編整理了ELISA產(chǎn)品相關(guān)要素，助您五分鐘掌握如何選到適合自己實(shí)驗(yàn)的試劑盒。ELISA產(chǎn)品選擇要素1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)物種及待檢樣品性質(zhì)來(lái)選擇種屬：人、小鼠、大鼠、雞、牛、猴等；樣本類型：血清、血漿、組織培養(yǎng)上清、組織或細(xì)胞裂解物。2、根據(jù)樣品中檢測(cè)物水平選擇寬動(dòng)力學(xué)檢測(cè)范圍：對(duì)樣品種待測(cè)物水平?jīng)]有任何參考數(shù)據(jù)；高靈敏度試劑盒：待檢物含量很低。3、根據(jù)樣本可獲得性來(lái)選擇
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑常見類型-雙抗夾心法，你要的都在這里！2023/02/24
            
					
            
				ELISA是以體外抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原抗體特異性反應(yīng)與酶的高效催化作用相結(jié)合的一種檢測(cè)方法，靈敏度可達(dá)皮克(pg/mL)水平。它是目前商業(yè)應(yīng)用為成熟的免疫分析方法之一，在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)、臨床診斷、生物制藥方面的運(yùn)用也極為廣泛。目前，常見的ELISA類型有四種：雙抗夾心法、直接法、間接法和競(jìng)爭(zhēng)法。其中，雙抗夾心法是為常用的一種，分雙抗體夾心和雙抗原夾心。研域?qū)⒁噪p抗體夾心法為例，和大家分享相關(guān)知識(shí)~實(shí)驗(yàn)原理雙抗體夾心法，其基本原理是將定量的包被抗體以物理吸附的方法固定于微孔板表面，然后加入待檢標(biāo)本
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑新品免疫，腫瘤，心血管病相關(guān)指標(biāo)又雙叒增加啦！2023/02/16
            
					
            
				1、指標(biāo)簡(jiǎn)述顆粒酶B是絲氨酸蛋白酶顆粒酶家族的一員，專門存在于細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)和自然殺傷細(xì)胞(NK)的顆粒中。顆粒酶B利用Caspase3、Caspase8和Bid等底物在顆粒介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用。作為人類基因組中確定的五種顆粒酶(A、B、H、K和M)之一，顆粒酶B(32kDa)的生物學(xué)功能及其在健康和疾病方面的用途得到了研究。GranzymeB的蛋白酶活性受到SerpinB9/蛋白酶抑制劑9的嚴(yán)格控制。人類GranzymeB的氨基酸序列分別與犬類、大鼠和小鼠相同，分別為71
					
            
				
            
								
            
					
            研域生物就流式細(xì)胞詳細(xì)介紹2023/02/08
            
					
            
				流式細(xì)胞術(shù)在過去30年里得到迅速發(fā)展，在免疫學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、病毒學(xué)、癌癥生物學(xué)和傳染病學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。比如，流式細(xì)胞術(shù)對(duì)研究免疫系統(tǒng)狀態(tài)及其對(duì)傳染病和癌癥的反應(yīng)非常重要，它可以表征來(lái)自血液和骨髓的混合細(xì)胞群，以及由淋巴結(jié)、脾、粘膜組織、實(shí)體腫瘤等固體組織分解成的單個(gè)細(xì)胞。除了分析細(xì)胞外，流式細(xì)胞術(shù)另一個(gè)主要應(yīng)用是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分選，以滿足使用者進(jìn)一步的分析需求。本文將主要以細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)和分子生物學(xué)為例，介紹流式細(xì)胞術(shù)在實(shí)際中的應(yīng)用。細(xì)胞生物學(xué)與免疫學(xué)免疫分型：免疫分型在流式細(xì)胞術(shù)
					
            
				
            
								
            
					
            研域生物ELISA試劑通關(guān)樣本篇血清血漿2023/02/02
            
					
            
				血清和血漿的區(qū)別血清：血液凝固析出的淡透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。其周圍所析出之淡透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。血漿：相當(dāng)于結(jié)締組織的細(xì)胞間質(zhì)。是血液的重要組成分，呈淡液體（因含有膽紅素）。血漿的化學(xué)成分中，水分占90～92%，溶質(zhì)以血漿蛋白為主。血漿蛋白是多種蛋白質(zhì)的總稱，用鹽析法可將其分為白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原三類。血清與血漿從表面上看似乎沒有什么不同，但其內(nèi)在的主要區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原，是未經(jīng)抗凝處
					
            
				
            
								
            
					
            關(guān)于ELISA試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果應(yīng)具備的三條件2023/01/11
            
					
            
				1、標(biāo)本因素血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)留意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操縱步驟的留意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，嚴(yán)格遵照劃定操縱，必能得出正確的結(jié)果。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留意不可濺出，不可產(chǎn)氣憤泡。有此測(cè)定需用稀的血清，可在
					
            
				
            
								
            
					
            你知道細(xì)胞凍存液的配方嗎2023/01/09
            
					
            
				假如要想做到那樣的目地，那么就需要體細(xì)胞冷凍液，這類東西如何配備呢?下邊就來(lái)實(shí)際的了解一下，細(xì)胞凍存液的秘方是啥？細(xì)胞凍存液的配方是什么？(一)細(xì)胞凍存1.配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液;2.取對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期的體細(xì)胞，除去舊細(xì)胞培養(yǎng)液，用PBS清理。3.除去PBS，添加適量蛋白酶(遮蓋細(xì)胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長(zhǎng)發(fā)育的體細(xì)胞消化吸收出來(lái);4.抽濾1000rpm，5min;5.除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液，用塑料吸管輕輕地吹打使體細(xì)胞勻稱，記數(shù)，調(diào)整凍存
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒酶標(biāo)板在什么情況下失效2023/01/03
            
					
            
				ELISA試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年，如果保存得當(dāng)?shù)脑?，不?huì)出現(xiàn)問題的。但不要反復(fù)凍融。當(dāng)然如果是正常的DAS-ELISA檢測(cè)試劑盒等，應(yīng)該放在4℃左右冰箱保存。建議ELISA試劑盒解凍后一次用完。已開封或者使用后，剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，ELISA檢測(cè)試劑盒開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。但要注意的是，如果將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來(lái)就立即使用的話，可能會(huì)影響，其直接的后果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。建議：先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放
					
            
				
            
								
            
					
            標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)常見解答問題2022/12/28
            
					
            
				1、問：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的用途和應(yīng)用范圍答：藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)不能作為藥物或醫(yī)療器械而施用于人或動(dòng)物。我所分發(fā)的藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)主要用于法定藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的相關(guān)項(xiàng)目的檢測(cè)用，詳細(xì)內(nèi)容請(qǐng)見使用說(shuō)明書。2、問：有效期答：除了說(shuō)明書上注明有效期的品種外，藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一般沒有像藥品一樣設(shè)置有效期。在規(guī)定的儲(chǔ)存和使用條件下，我所定期進(jìn)行特性量值的穩(wěn)定性核查，若發(fā)現(xiàn)影響使用將及時(shí)公布相關(guān)信息。3、問：儲(chǔ)存答：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一般應(yīng)密閉、避光保存，對(duì)有特殊儲(chǔ)存要求（如低溫、避光等）的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，說(shuō)明書上均有說(shuō)明，今后標(biāo)簽上也將注明。建議
					
            
				
            
								
            
					
            淺談降低elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的誤差概率2022/12/22
            
					
            
				做實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)誤差在所難免，不過我們做好了相關(guān)事項(xiàng)的話還是可以降低這種概率的。那如何降低elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的誤差概率呢？一、檢驗(yàn)技師。應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械，具有一定總結(jié)和分析問題的能力，對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。二、使用校對(duì)過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。三、仔細(xì)閱讀說(shuō)明書。嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。ELISA試劑盒不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方，反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)。四、洗滌干凈。洗板
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒試驗(yàn)水浴保溫辦法與操作技巧2022/12/12
            
					
            
				ELISA試劑盒的溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃等。37℃是試驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的適宜溫度。在樹立ELISA方法作反響動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，試驗(yàn)標(biāo)明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經(jīng)1～2小時(shí)，產(chǎn)品的生成可達(dá)高峰。為加快反響，可進(jìn)步反響的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜選用更高的溫度。但因所需時(shí)刻太長(zhǎng)，在ELISA試劑盒中一般不予選用。ELISA試劑盒實(shí)踐進(jìn)程操作技巧：1）加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本，防止刮擦包被板底部，加樣進(jìn)程中防止液體外濺，血清殘留在反響孔壁上。2）
					
            
				
            
								
            
					
            淺談EL ISA檢測(cè)血清注意事項(xiàng)2022/12/02
            
					
            
				大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按慣例方法收集應(yīng)留意防止溶血紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物貢以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中溶血標(biāo)本可能會(huì)添加啡特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有污染菌體中可能含有內(nèi)源性HRP也會(huì)發(fā)生假陽(yáng)性反應(yīng)。一般說(shuō)來(lái)在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4C。超越-周測(cè)定的需20°C保存.凍住血清融解后蛋白質(zhì)局部濃縮散布不均應(yīng)充沛混勻并防止發(fā)生氣泡。混濁或有沉積的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾弄清后再檢測(cè)。重復(fù)東融會(huì)使抗體效價(jià)下跌所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作
					
            
				
            
								
            
					
            你知道ELISA試劑盒加樣問題及解決方法嗎2022/11/25
            
					
            
				在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中，加樣是重要的一項(xiàng)步驟，這一步驟在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中都有著很大的影響。今天上海研域生物針對(duì)這一問題作出了一些整理，希望可以給大家?guī)?lái)幫助。一、加樣問題的可能原因1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；2.手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))；3.加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。二、解決方法1.標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混
					
            
				
            
								
            
					
            細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)2022/11/16
            
					
            
				進(jìn)入細(xì)胞間開始細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，必須嚴(yán)格按照下列注意事項(xiàng)：1.確定所有的細(xì)胞操作用的溶液和耗材都已經(jīng)消毒并檢測(cè)沒有問題，不確定的溶液和耗材請(qǐng)勿使用，除非特殊情況，不要借用別人的溶液。2.確定衣服的袖口已經(jīng)卷起或者白大褂的袖口已經(jīng)扎緊。3.確定酒精燈內(nèi)的酒精量，需要的話及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)充。4.確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋，實(shí)驗(yàn)開始前可以把所有瓶蓋旋松。5.盡量不要直接傾倒溶液，除非瓶口沒有被燒壞。如果傾倒失敗，溶液粘在瓶口，請(qǐng)用噴過75%酒精的紙巾仔細(xì)清潔瓶口周圍（不
					
            
				
            
								
            
					
            上海研域教你如何培養(yǎng)出好的細(xì)胞2022/11/10
            
					
            
				把細(xì)胞養(yǎng)好的三個(gè)關(guān)鍵要素是：良好的細(xì)胞來(lái)源，正確的實(shí)驗(yàn)操作，以及合適的培養(yǎng)體系。其中“合適的培養(yǎng)體系”就是要?jiǎng)?chuàng)造適合細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境，給細(xì)胞建立一個(gè)滿意的“家”。細(xì)胞培養(yǎng)基本條件：1.合適的細(xì)胞培養(yǎng)基合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。2.血清目前，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中重要的成分之一，含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的多種生長(zhǎng)因子及其它營(yíng)養(yǎng)成分。3.無(wú)菌無(wú)毒細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無(wú)菌無(wú)毒
					
            
				
            
								
            
					
            分享人ELISA試劑盒的原理及優(yōu)勢(shì)2022/11/02
            
					
            
				人ELISA試劑盒的原理及優(yōu)勢(shì)：1、ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特一興反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性的試驗(yàn)技術(shù)。2、由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚ben乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而包正試驗(yàn)結(jié)果的特一興與穩(wěn)定性。3、Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。4、ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性
					
            
				
            
								
            
					
            說(shuō)說(shuō)ELISA試劑盒的保溫方式有哪些2022/10/25
            
					
            
				在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當(dāng)。ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA液體樣本處理方法及收集注意事項(xiàng)2022/10/24
            
					
            
				ELISA液體樣本：ELISA液體樣本處理原則：所有的液體樣本，用無(wú)菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），如果以后碰到其他的液體樣本，也按這個(gè)方法，納入?yún)R總表。1、血清：用無(wú)菌管收集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2、血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA反應(yīng)需要一定時(shí)間的溫育快來(lái)了解吧2022/10/18
            
					
            
				ELISA屬固相，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力
					
            
				
            
							
				
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