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						上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
            初級(jí)會(huì)員 | 第14年
            
					
            
				
            
			
            
		
            
	
            
	
	
            
		
            
			
		
            
	
            

            

	
            
		
            
			
			
            
							
            
					
            試劑盒的應(yīng)用領(lǐng)域2015/06/08
            
					
            
				ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái)，得到*科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣，尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。ELISA試劑盒不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA（雙抗體夾心法）檢測(cè)HBsAg2015/06/05
            
					
            
				方法1、ELISA試劑盒加入待測(cè)標(biāo)本每孔0.05ml，并設(shè)HBsAg陽(yáng)性對(duì)照2孔，HBsAg陰性對(duì)照2孔，空白對(duì)照1孔，然后加入酶結(jié)合物每孔1滴(0.05ml、空白對(duì)照孔不加)，充分混勻后置37℃孵育30分鐘。2、洗板:棄去反應(yīng)條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿每孔，棄去拍干，反復(fù)五次后拍干。3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml)，然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml)，混勻，37℃孵育10分鐘。4、每孔加終止液1滴(0.05ml)，混勻。結(jié)果ELISA試劑盒比色法:波長(zhǎng)450nm，先用
					
            
				
            
								
            
					
            解析Elisa間接法提高陽(yáng)性值的辦法2015/06/04
            
					
            
				ELISA試劑盒先要確定兩種酶標(biāo)二抗使用的是不是同一批包被的板，因?yàn)殡m然是相同的抗原，可能兩次包被不一樣。如果是同一批板，出現(xiàn)這種情況只能說(shuō)明你的酶標(biāo)二抗失活了，買新的二抗，按說(shuō)明書上的稀釋倍數(shù)稀釋；陰性對(duì)照有顏色很可能是沒封閉好。陽(yáng)性值是由你的抗原抗體間親和力決定的，增加抗原抗體用量，或提高二抗?jié)舛?，但靈敏度可能會(huì)降低，你可以重新摸下工作濃度；ELISA試劑盒陰性值降低，你可以采用BSA封閉2小時(shí)看看，好像沒聽說(shuō)有人用FCS封閉的，你可以嘗試采用其他的封閉液，據(jù)我了解，用BSA封閉不是很好，可
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA的檢測(cè)結(jié)果2015/06/03
            
					
            
				ELISA試劑盒測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA試劑盒中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，
					
            
				
            
								
            
					
            生物試劑的分類2015/06/02
            
					
            
				ELISA試劑盒生物試劑涉及到化學(xué)試劑分類。我國(guó)的試劑規(guī)格基本上按純度（雜質(zhì)含量的多少）劃分，共有高純、光譜純、基準(zhǔn)、分光純、優(yōu)級(jí)純、分析和化學(xué)純等7種。國(guó)家和主管部門頒布質(zhì)量指標(biāo)的主要優(yōu)級(jí)純、分級(jí)純和化學(xué)純3種。（1）優(yōu)級(jí)純（GR：Guaranteedreagent），又稱一級(jí)品或保證試劑，99.8%，這種試劑純度zui高，雜質(zhì)含量zui低，適合于重要精密的分析工作和科學(xué)研究工作，使用綠色瓶簽。（2）分析純（AR），又稱二級(jí)試劑，純度很高，99.7%，略次于優(yōu)級(jí)純，適合于重要分析及一般研究工作
					
            
				
            
								
            
					
            分析Elisa洗滌2015/06/01
            
					
            
				ELISA試劑盒洗滌步驟可降低未結(jié)合抗體所引起的背景信號(hào)，從而增加分析的信噪比。每一步之間的洗滌確保只有特異的結(jié)合事件被保留，在zui后一步產(chǎn)生信號(hào)。而不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來(lái)不理想的結(jié)果。本文將為你介紹一些利用自動(dòng)洗板機(jī)來(lái)洗滌Elisa平板的技巧。第二個(gè)影響洗滌效果的主要參數(shù)是洗滌循環(huán)的量。當(dāng)然，洗滌次數(shù)越多，背景越低。然而，太多次的洗滌會(huì)降低信號(hào)強(qiáng)度，使其難以測(cè)定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗滌三次。不過(guò)，Elisa板的商會(huì)對(duì)洗滌次數(shù)提出建議。ELISA試劑盒一般
					
            
				
            
								
            
					
            Elisa代測(cè)樣本運(yùn)輸指導(dǎo)2015/05/08
            
					
            
				血液樣本的收集：全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。ELISA試劑盒同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。①不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。②抗凝收集血漿:收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。ELISA試劑盒根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。生化實(shí)驗(yàn)一般
					
            
				
            
								
            
					
            完整的ELISA試劑盒組成2015/05/07
            
					
            
				完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；（3）酶的底物；（4）陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品（定性測(cè)定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測(cè)定中）；（5）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；（6）洗滌液，在板式ELISA試劑盒中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；（7）酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的zui終體積而異，在板式ELISA試劑盒中一般采用2mol/L。小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA檢測(cè)試劑盒的優(yōu)點(diǎn)2015/05/06
            
					
            
				ELISA檢測(cè)試劑盒的優(yōu)點(diǎn)：1、、靈敏、特異的抗體；2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；5、zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒是用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)
					
            
				
            
								
            
					
            試劑盒的配制2015/05/05
            
					
            
				ELISA試劑盒的配制：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書，注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說(shuō)明書中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml?？衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度，建議孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過(guò)氧
					
            
				
            
								
            
					
            Elisa實(shí)驗(yàn)中牛奶樣本收集方法2015/05/04
            
					
            
				ELISA試劑盒技術(shù)的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。ELISA試劑盒用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中
					
            
				
            
								
            
					
            家畜elisa試劑盒被研制2015/04/30
            
					
            
				ELISA試劑盒豬瘟病毒E2和E0蛋白在真核表達(dá)系統(tǒng)中成功表達(dá)，桿狀病毒表達(dá)抗原的檢出率比原核抗原提高3-5倍，為豬瘟診斷與監(jiān)測(cè)elisa試劑盒的進(jìn)一步大批提供了保障，在9個(gè)省市自治區(qū)推廣應(yīng)用120多個(gè)試劑盒，ELISA試劑盒共檢測(cè)萬(wàn)余份豬血清，豬瘟抗體陽(yáng)性率在12%～56%之間，進(jìn)一步證明了試劑盒具有可操作性強(qiáng)、穩(wěn)定性和重復(fù)性好的特點(diǎn)；實(shí)現(xiàn)了豬圓環(huán)病毒2型ORF2基因在巴斯德畢赤酵母中獲得了表達(dá)，進(jìn)一步完善了豬日本乙型腦炎診斷ELISA試劑盒、豬圓環(huán)病毒2型感染診斷與監(jiān)測(cè)ELISA試劑盒和豬細(xì)
					
            
				
            
								
            
					
            elisa試劑盒用途2015/04/29
            
					
            
				ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。ELISA試劑盒用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA檢測(cè)試劑盒步平衡的過(guò)程2015/04/28
            
					
            
				在ELISA檢測(cè)試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定ELISA檢測(cè)試劑盒需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA檢測(cè)試劑盒溫度2015/04/24
            
					
            
				ELISA檢測(cè)試劑盒屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA檢測(cè)試劑盒反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立E
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒實(shí)踐過(guò)程技巧2015/04/23
            
					
            
				1.在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前我們應(yīng)該對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等，要先查看水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑，避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺，血清殘留在反應(yīng)孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染，加樣次序要與說(shuō)明書一致，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大，ELISA試劑盒洗滌次數(shù)不要超過(guò)說(shuō)明書推薦的洗滌次數(shù)，洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA相關(guān)試劑盒的分類及范圍2015/04/22
            
					
            
				1、細(xì)胞因子檢測(cè)elisa試劑盒：如白介素、選擇素、集落刺激因子，腫瘤壞死因子，干擾素，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子，趨化因子，細(xì)胞因子受體，粘附分子，生長(zhǎng)因子，凋亡因子等等2、肝纖維化檢測(cè)elisa試劑盒：如纖維連接蛋白，透明質(zhì)酸，膠原，基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子，基質(zhì)金屬蛋白酶，層粘蛋白等等3、心肌梗塞檢測(cè)elisa試劑盒：如肌鈣蛋白，肌紅蛋白，C-反應(yīng)蛋白等等4、內(nèi)分泌檢測(cè)elisa試劑盒如甲狀腺,胰腺,性激素,孕酮,睪酮,生長(zhǎng)激素,生長(zhǎng)抑素,內(nèi)皮素,皮質(zhì)醇,骨鈣素,催乳素,促腎上腺皮質(zhì)激素,促卵泡素,雌二醇
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒的關(guān)鍵步驟2015/04/21
            
					
            
				1、ELISA試劑盒盡量用八道或者十二道移液器加樣。對(duì)于相同的試劑，經(jīng)如二抗，酶，顯色液，終止液等。2、自己的樣品，因?yàn)槊恳豢椎臉悠凡灰粯?，用排槍加有些麻煩，如果一次的樣品比較少，而自己加樣又比較快，可以一個(gè)孔一個(gè)孔的加，但如果想一次把96或者48T的做完，可以先擺好一些PCR管或者準(zhǔn)備一個(gè)96孔細(xì)胞培養(yǎng)板。將自己的樣品先加到PCR管或者培養(yǎng)板中（此板間距與酶板板相同）。ELISA試劑盒記得加一定的余量，如一次加樣是50ul，可以先加70ul。加完后再用排槍加樣，這樣可以縮短加樣時(shí)間，減小每個(gè)孔
					
            
				
            
								
            
					
            實(shí)驗(yàn)儀器保養(yǎng)2015/04/20
            
					
            
				1、儀器的接地：ELISA試劑盒接地的問(wèn)題除對(duì)儀器的性能、可靠性有影響外，還對(duì)使用者的人身安全關(guān)系重大，因此所有接入市電電網(wǎng)的儀器必須接可靠的地線。2、電源電壓：由于市電電壓波動(dòng)比較大，常常超出要求的范圍，為確保供電電源的穩(wěn)定，必須配用交流穩(wěn)壓電源。要求高的儀器單獨(dú)配備穩(wěn)壓電源。另外應(yīng)注意，插頭中的電線連接應(yīng)良好，ELISA試劑盒使用時(shí)切莫把插孔位置搞錯(cuò)，導(dǎo)致儀器損壞。3、儀器工作環(huán)境：環(huán)境對(duì)精密檢測(cè)儀器的性能、可靠性、測(cè)量結(jié)果和壽命都有很大影響，為此對(duì)它有以下幾方面的要求：防塵,防潮,防熱,防
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒保存方法2015/04/17
            
					
            
				（1）要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有類似過(guò)氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA試劑盒測(cè)定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。（2）樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的生長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用；ELISA試劑盒二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。（3）血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離，
					
            
				
            
							
				
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