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Elisa試劑盒操作步驟2015/03/13

1.ELISA標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。120pg/ml5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60pg/ml4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30pg/ml3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15pg/ml2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液7.5pg/ml1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品

ELISA試驗中注意的細節(jié)2015/03/12

1.不管是ELISA試劑盒，還是其它產(chǎn)品，在使用之前我們都要仔細閱讀說明書。2.同樣的，一定要確定試劑盒是不是在有效期內(nèi)。3.按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）。4.標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存。5.ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定。同時，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的

ELISA分裝比原裝所具有的優(yōu)勢2015/03/11

一，相比原裝分裝所具有的兩大特點1，分裝比原裝價格低很多，從客戶的角度來看zui重要的還是實驗效果，分裝產(chǎn)品質(zhì)量與原裝差別不大，某些角度來說分裝還是非常適合客戶使用的2，購買過*ELISA試劑盒的客戶明白，*的ELISA試劑盒貨期久，如訂購不及時就會耽誤實驗期，分裝產(chǎn)品則不用擔(dān)心這些問題，我司分裝均有現(xiàn)貨絕不會耽誤您的實驗期。二，選購分裝需要注意的問題現(xiàn)在市面上銷售的R&D進口分裝ELISA試劑盒有很多假貨，就是貼了一個R&D的牌子，產(chǎn)品本身和R&D一點關(guān)系也沒有，這種試劑盒成本低、靈敏度差，包

ELISA的基礎(chǔ)簡述2015/03/10

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可

人血管生成素ELISA試劑盒使用注意事項2015/03/09

人血管生成素1(ANG-1)ELISA試荊盒使用注意事項:1、Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，應(yīng)避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4、請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔OD值的)，請先用樣品稀釋液

ELISA試劑盒實驗方法大起底2015/03/06

一款合適的分離ELISA試劑盒可以說是實驗成功的保障，因為只有獲得正確的ELISA試劑盒，下游的分析結(jié)果才可能準(zhǔn)確。目前，市面上有多種多樣的分離試劑盒可供選擇，它們的主要區(qū)別在于分離方法和篩選標(biāo)志。那么，如何選擇自己的細胞分離試劑盒呢？希望本文能為你提供一些幫助。正向選擇VS負向選擇試劑盒分離試劑盒的工作原理主要有兩種，正向選擇和負向選擇。正向選擇的試劑盒直接結(jié)合的抗體來進行捕獲。這種抗體通常與磁珠相連，可以利用磁鐵將懸液中的抗體-磁珠-復(fù)合物提取出來，再通過二抗將磁珠與目標(biāo)分開。負向選擇的試劑

ELISA試劑盒新的思路和希望2015/03/05

ELISA試劑盒文章中，研究者KarlWillert及其同事利用誘導(dǎo)多能干細胞(iPSC)為治療局灶性皮膚發(fā)育不全(FDH)開發(fā)了一種“培養(yǎng)皿"模型，F(xiàn)DH是一種PORCN基因突變引發(fā)的罕見疾病，該疾病的主要特點為皮膚畸形，比如皮膚條紋很薄或者有不同的形狀及可見的靜脈集群現(xiàn)象等。文章中，研究者發(fā)現(xiàn)，當(dāng)加入WNT蛋白時，就可以將FDH成纖維細胞或皮膚細胞成功地重編程為誘導(dǎo)多能干細胞，WNT蛋白是一種保守的信號分子，其可以在胚胎發(fā)育期間調(diào)節(jié)細胞間的相互作用。Willert表示，WNT信號到處都是，每

小鼠ELISA試劑盒使用的方法2015/03/04

如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8C冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。如何避免沉淀物的產(chǎn)生?1、解凍小鼠ELISA試劑盒時，請按照所建議的逐步解凍法（-2O。C至4。C至室溫），若血清解凍時改變的溫度太大（如-20。C至37。C），實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)

ELISA試劑盒混勻儀2015/03/03

ELISA血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時

試劑空白和樣品空白的區(qū)別2015/03/02

ELISA試劑空白是指由于測試試劑本身而帶來的測試結(jié)果的微小的正誤差。Hali公司正在不斷努力使其的測試試劑的空白值為負，特別指出的是由于這個負的空白值非常小，從而不會影響測定的準(zhǔn)確性。測試試劑的空白值對于一項測試非常重要，當(dāng)進行低濃度測定時應(yīng)該從測試結(jié)果中扣除測試試劑的空白值。例如，如果從0.06mg/L的低濃度測試結(jié)果中減掉0.02mg/L的試劑空白值，就會使zui終測定結(jié)果改變至少30%。而從1.23mg/L的高濃度測試結(jié)果中減掉0.02mg/L的試劑空白值，zui終測定結(jié)果只發(fā)生了2%的

人ELISA試劑盒吃橙子可以預(yù)防胃癌2015/02/28

橘類水果是水果*大家族，包括橙子、橘子、柚子、葡萄柚、金橘、檸檬等多個品種。其中橙子傳統(tǒng)上被看作是人ELISA試劑盒西方膳食當(dāng)中維生素C的主要供應(yīng)來源，也能提供相當(dāng)數(shù)量的胡蘿卜素和鉀、鈣、鐵等礦物質(zhì)。柑橘類水果能夠抗氧化，強化免疫系統(tǒng)，抑制腫瘤細胞生長，并使腫瘤細胞轉(zhuǎn)變成正常細胞。澳大利亞的科學(xué)家稱，在所有的水果當(dāng)中，柑橘類中所含的抗氧化物質(zhì)zui高，其中有170種以上的植物化學(xué)物質(zhì)，包括60多種黃酮類物質(zhì)，還有17種類胡蘿卜素。黃酮類物質(zhì)具有抗炎癥、抗腫瘤、強化血管和抑制凝血的作用，類胡蘿卜素

ELISA系統(tǒng)更穩(wěn)定方法2015/02/26

ELISA常用封鎖劑有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明膠；脫脂奶粉，比較價廉，可以高濃度使用（5%－10％）；還有一些稀有用到的各種動物血清（主要為了排除相似蛋白干擾）和酪蛋白等等。詳細的試驗還要有堅固的理論外也要實踐，看一下*可不可以應(yīng)用到自己試驗當(dāng)中去。但*選用什么，要依據(jù)試驗詳細來實踐。應(yīng)留意以下原理：因為蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用，這種物理吸附長短特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點

人水通道蛋白ELISA檢測試劑盒操作及注意2015/02/13

1．ELISA使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。人水通道蛋白-4ELISA檢測試劑盒4．甩去孔內(nèi)

ELISA多抗和單抗的優(yōu)缺點比較2015/02/12

ELISA優(yōu)點展示：1.克隆抗體可有助于放大低表達水平的靶蛋白信號，因為靶蛋白可在多個表位上結(jié)合不止一個抗體分子。但是這會給定量實驗造成不利影響，因為結(jié)果將變得不準(zhǔn)確。2.由于能識別多個表位，多克隆抗體可在IP/ChIP中得到更好的結(jié)果。3.比單克隆抗體更能容許抗原中的微小變化。4.它們會識別出與免疫原蛋白質(zhì)具有高同源性的蛋白質(zhì)，或者從非免疫原物種的組織樣品中篩選靶蛋白，例如當(dāng)未測試物種中的抗原性質(zhì)未知時，有時會使用多克隆抗體。這也使得檢測免疫原序列以確定是否有任何交叉反應(yīng)性非常重要。5.多克隆

購買動物ELISA試劑盒的建議2015/02/11

1.ELISA首先就要問清楚公司名稱，是否有資質(zhì)證明，營業(yè)執(zhí)照、稅務(wù)登記證、組織機構(gòu)代碼證這三證是否齊全，以免遇到假冒產(chǎn)品。2.是否有發(fā)票。3.產(chǎn)品說明書是否提供紙質(zhì)及電子版的。4.ELISA檢測范圍及靈敏度是多少，就是盡量問的詳細點，這樣也能知道銷售人員是否真的熟悉，同時也可知道是否正規(guī)。5.產(chǎn)品的產(chǎn)地、代理的產(chǎn)地等等。6.價格方面，貨比三家。

ELISA的原理和類型2015/02/09

ELISA試劑盒的原理ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既留存其免疫學(xué)活性，又留存酶的活性。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。因為酶的催化

ELISA試劑盒抗癌藥物研究2015/02/06

近日，ELISA試劑盒加州大學(xué)圣地亞哥醫(yī)學(xué)院的研究人員發(fā)現(xiàn)一種新的專門調(diào)控RNA剪接的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，RNA剪接是指從DNA模板鏈轉(zhuǎn)錄出的zui初轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中除去內(nèi)含子，并將外顯子連接起來形成一個連續(xù)的RNA分子的過程。該研究提示新發(fā)現(xiàn)的通路可能是一個新的抗癌藥物作用環(huán)節(jié)。早期研究證實SRPK1與癌癥和其它人類疾病有關(guān)。例如SRPK1在調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮生長因子或血管內(nèi)皮生長因子刺激血液腫瘤血管生長過程中起著關(guān)鍵作用。在許多癌癥如腎臟、乳腺癌肺癌和胰腺癌等中SRPK1都被證實表達失調(diào)。Fu和他的同事在這項

elisa實驗經(jīng)驗分享2015/02/05

1、ELISA溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)（老辦法是放入濕盒內(nèi)，紗布加點無菌水即可）。2、洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干（報紙就免了吧?。?。3、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存（洗液先用現(xiàn)配不費多少事的）。4、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配（同前，避光?。?。5、檢測前，要打開酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定1

elisa試劑盒試驗中樣本的處理及要求說明2015/02/04

ELISA1.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。2.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。3.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，elisa試劑盒以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分

ELISA試劑盒步驟有絕招實驗有何難？2015/01/30

·ELISA法測細胞凋亡細胞凋亡時，Ca2+,Mg2+離子依賴的內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶將雙鏈DNA從各核小體間連接區(qū)裂斷，產(chǎn)生單或寡合苷酸小體，各核小體的DNA與核組蛋白H2A,H2B,H3,H4形成緊密的復(fù)合物而對內(nèi)源性核酸酶有抵抗使之不被內(nèi)源性核酸酶裂解。主要使用單克隆抗DNA抗體和抗組蛋白抗體直接檢測DNA和組蛋白?！ど虾嵘噭┖袑偬攸c：1.更加安全：指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。2.具有經(jīng)濟性：試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)?；蚣夹g(shù)進步降低成本而市場價格比合理?！嶒灪蟮奶幚矸椒ǎ?