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            翌圣生物科技(上海)股份有限公司
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            小分子化合物專題2019/05/15
            小分子化合物專題一、信號通路信號通路是指當細胞里要發(fā)生某種反應時信號從細胞外到細胞內傳遞了一種信息,細胞要根據(jù)這種信息來做出反應的現(xiàn)象。信號通路(signalpathway)的提出早可追溯到1972年,不過當時被稱為信號轉換(signaltransmission)。1980年M.Rodbell在一篇綜述中提到信號轉導(signaltransduction),此后該概念就被廣泛使用了。信號通路是指能將細胞外的分子信號經(jīng)細胞膜傳入細胞內發(fā)揮效應的一系列酶促反應通路。這些細胞外的分子信號(稱為配體,l
            如何定量低豐度目的基因的表達2019/01/28
            如何定量低豐度目的基因的表達(含詳細解決方法)有時候,qPCR實驗會成為阻礙你課題順利開展的強勢攔路虎!看似簡單的基因表達量差異驗證,當遇到低豐富表達的基因時,也許就舉步維艱。模板獲取困難導致的RNA提取量少或RNA質量不佳,即使選蕞佳的試劑、篩選出良好的引物,也有可能qPCR定量得到的內參基因CT值在18-20個cycle,而目的基因在31-35個循環(huán)。遇到這種情況,你是怎么解決的呢?qPCR在低豐度表達基因定量中的局限性基因的豐度是指基因在基因組中的拷貝數(shù)??煞譃楦哓S度,中等豐度和低豐度。低
            dsDNA HS Assay Kit for Qubit®數(shù)據(jù)測評2018/05/23
            行走江湖靠的就是實力dsDNAHSAssayKitforQubit®數(shù)據(jù)測評——簡便、靈敏、準確、穩(wěn)定dsDNAAssayKitforQubit®是Yeasen生物開發(fā)的專門用于Qubit®熒光儀或熒光酶標儀的試劑盒,線性范圍0.2-100ng,即使在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下,也可以選擇性的檢測dsDNA,且耐受較高濃度的蛋白質、鹽類、洗滌劑等污染物。產品名稱產品編號規(guī)格儲存dsDNAHSAssayKitforQubit®12640ES60100T2-8℃dsDNAHSAssa
            文獻 | Molecular Plant: 解密水稻半矮桿與應用之謎2018/05/23
            文獻|MolecularPlant:解密水稻半矮桿與應用之謎倒伏是影響水稻高產穩(wěn)產的主要限制因素之一。自20世紀60年代以來,以作物矮化育種為標志的“綠色革命”主要是利用赤霉素合成基因SD1的突變體,培育半矮稈性狀,提高作物(水稻)的抗倒伏能力,使水稻產量得到了大面積的顯著增加。經(jīng)過多年研究,雖然在水稻中發(fā)現(xiàn)了超過60個基因可以導致半矮稈性狀,但這些基因除影響莖稈長度還影響其它農藝性狀,難以應用于培育抗倒伏品種。目前,SD1的突變仍然是培育水稻半矮稈性狀的主要基因。由于單一的可用基因,抗倒伏性狀
            淺談DNA磁珠的作用原理2018/05/23
            作為DNA分選磁珠的生產廠商,我們zui經(jīng)常被客戶問到的問題就是:高通量測序(NGS)文庫制備時,DNA磁珠為什么可以用來純化和分選文庫?在這里我們整理相關的資料,對這個問題做簡單的闡述。分選磁珠的作用原理是基于一種固相載體可逆化固定(SPRI)的分離純化方法。磁珠體系中一般包含:磁珠、DNA、聚乙二醇(PEG)、以及鹽離子等,在一定濃度的PEG和鹽離子環(huán)境中,DNA可吸附到羧基修飾的高分子磁珠表面(即固相載體),該過程是可逆的,在適當條件下,結合的DNA分子可以被洗脫回收。納米級別的磁珠表面性
            Western Blot快速實驗攻略2018/05/23
            一、WesternBlot實驗原理蛋白免疫印跡(WesternBlot,WB)是將蛋白質經(jīng)電泳分離后轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測的技術。完整的WB流程,如下圖所示,包含樣本制備、SDS-PAGE、轉膜、抗體結合、蛋白檢測等5個大步驟。二、試劑準備詳見文末附錄。三、實驗步驟1.樣本制備1)融解RIPA裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入PMSF,使PMSF的zui終濃度為1mM。2)貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔加入150-250μ
            RIPA裂解液,讀這些就夠了!2017/12/01
            1.什么是RIPA裂解液?RIPA裂解液(RadioImmunoprecipitationAssayLysisbuffer,放射免疫沉淀法裂解緩沖液)是一種傳統(tǒng)的可用于裂解細胞或組織的快速裂解液,其原理為利用表面活性劑等裂解細胞膜(包括核膜),從組織或細胞中抽取可溶性蛋白。RIPA裂解液裂解后得到的蛋白一般可直接用于常規(guī)的WB、IP、co-IP等實驗。2.RIPA裂解液里有什么?RIPA裂解液的配制方法有很多種,主要包括裂解成分、蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑三種組分。裂解成分可通過破壞細胞膜和蛋白
            Benzonase Nuclease高活力核酸酶2017/05/23
            BenzonaseNuclease高活力核酸酶——消滅核酸,拒絕污染1.前言核酸污染是生物樣本制備中常常遇到的問題。在蛋白純化的過程中,如果您提取的蛋白粘度很高、蛋白純化的得率很低、蛋白檢測的結果很差,那么您的樣本可能遭受了核酸污染。如何去除核酸?超聲法和DNase/RNase酶法是常用的方法,但存在諸多缺陷(表1)。表1核酸去除,超聲法與DNase/RNase酶法優(yōu)缺點超聲法DNase/RNase酶法優(yōu)點利用剪切力可在一定程度上降解核酸利用核酸內切酶活性,可在溫和條件下,較好的消化核酸缺點僅能
            3D多肽水凝膠超越基質膠2017/03/03
            PeptideHydrogelSuitablefor3DCellCulture——3D多肽水凝膠超越基質膠(matrigel)Yeasen多肽水凝膠產品是由一種由16個氨基酸組成的多肽,在鹽離子存在情況下自發(fā)組裝成的水凝膠支架結構。多肽的大小通常在5nm左右,是親水性和疏水性氨基酸殘基交替排列組成的兩性分子肽段,能形成折疊片結構,并自組裝形成納米纖維,這些納米纖維相互交織在一起形成基質并進一步形成含水量超過99.5%的水凝膠支架(見圖1)。Yeasen多肽水凝膠無需通過調節(jié)聚合物和交聯(lián)劑的量來獲
            Chromotek GFP-Traps2016/03/23
            關鍵詞:ChromoTek、GFP、RFP、免疫沉淀、IP、抗體、瓊脂糖、磁珠德國ChromoTek公司成立于2008年,擁有德國制造的良好質量,致力于細胞生物學和蛋白質組學的研發(fā)與研究,公司擁有強大的研發(fā)團隊,有*生物制劑,主要使命是花費較少的時間和成本,使客戶獲得得高質量的實驗數(shù)據(jù)。產品包括單克隆抗體、重組單域抗體、熒光抗體、GFP或RFP連接蛋白等。德國ChromoTek是一家專業(yè)研發(fā)生產標簽抗體的公司,利用羊駝抗體的特異性解決了傳統(tǒng)GFP/RFP抗體分子量過大、轉染表達效率低的問題,研發(fā)
            GFP-Trap用于免疫沉淀(IP)2016/03/10
            關鍵詞:ChromoTek、GFP、RFP、免疫沉淀、IP、抗體、瓊脂糖、磁珠*(ChromotekGFP-Traps已被600多篇同行評議的近期文獻引用)產品名稱產品貨號規(guī)格報價(元)*(元)GFP-Trap®_A,coupledtoagarosegta-2020rxns(500µl)63003300GFP-Trap用于免疫沉淀(IP)德國ChromoTek是一家專業(yè)研發(fā)生產標簽抗體的公司,利用羊駝抗體的特異性解決了傳統(tǒng)GFP/RFP抗體分子量過大、轉染表達效率低的問題,研發(fā)出分子量只有15k
            單克隆抗體生產相關載體--pEE系列2015/08/03
            單克隆抗體生產相關載體--pEE系列pEE系列載體是Lonza生物公司研發(fā)的GlutamineSynthetase(GS,谷氨酰胺合成酶)基因表達系統(tǒng),利用谷氨酰胺合成酶篩選標記,能夠高水平的在哺乳細胞內表達目的基因,zui常用的有pEE6.4和pEE12.4表達載體。GS酶是生物體內以谷氨酸和氨為底物合成谷氨酰胺的酶。GS酶的活性能夠被甲硫氨酸砜亞胺(methioninesulphoximine,MSX)選擇性的抑制。一些哺乳動物細胞,例如小鼠骨髓瘤細胞(NSO細胞系)無法表達GS,所以在不添
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