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						廣州譽(yù)維生物科技儀器有限公司
            初級(jí)會(huì)員 | 第18年
            
					
            
				
            
			
            
		
            
	
            
	
	
            
		
            
			
		
            
	
            

            

	
            
		
            
			
			
            
							
            
					
            你不知道的實(shí)驗(yàn)小技巧2015/01/14
            
					
            
				平時(shí)在實(shí)驗(yàn)室zui常聽到的一句話就是「實(shí)驗(yàn)為什么會(huì)是這樣的呢」。然后仔細(xì)一查找原因，往往是由于操作上面的不認(rèn)真，或是一些小小的細(xì)節(jié)沒有注意到。小編為大家整理了實(shí)驗(yàn)小技巧，希望對(duì)大家有幫助。質(zhì)粒DNA提取提取質(zhì)粒的時(shí)候，zui后一步的酒精揮發(fā)很關(guān)鍵，基本上是其后續(xù)的酶切反應(yīng)的決定性因素。所以這一步盡量揮發(fā)長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間，是空調(diào)吹熱風(fēng)，或是37℃溫箱放長(zhǎng)一點(diǎn)的時(shí)間，我試過室溫到次日，酶切很好。將Amp濃度提高到200ug/ml，下班前接種，次日一早收獲菌體，OD雖然不高，質(zhì)粒豐度卻不一般。菌體量少些，操
					
            
				
            
								
            
					
            如何區(qū)分儀器檢出限、方法檢出限及樣品檢出限2015/01/08
            
					
            
				檢出限是分析測(cè)試的重要指標(biāo)，對(duì)于儀器性能的評(píng)價(jià)和方法的建立都是重要的基本參數(shù)之一。在日常檢測(cè)過程中，檢出限為具體量度指標(biāo)，特別是在痕量分析中，痕量分析誤差與樣品含量相對(duì)于檢出限的倍數(shù)相關(guān)聯(lián)。檢出限的確定對(duì)于分析方法的選擇具有重要意義。對(duì)檢出限的忽視有可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的不確定度增大。長(zhǎng)期以來，各個(gè)領(lǐng)域的檢測(cè)人員針對(duì)檢出限概念、估算方法及在各個(gè)不同領(lǐng)域的應(yīng)用都進(jìn)行了大量的探討。像分析儀器在測(cè)定過程中存在與噪音相區(qū)別的小信號(hào)檢出問題，同時(shí)也存在著分析方法能可靠測(cè)定物質(zhì)zui低含量的界限問題，這兩個(gè)概念
					
            
				
            
								
            
					
            如何清潔和維護(hù)你的離心機(jī)2015/01/08
            
					
            
				年末通常是大掃除的時(shí)候。離心機(jī)作為大家每天都離不開的伙伴，也需要好好清潔一下啦。也許大家都知道應(yīng)該定期清潔離心機(jī)，但究竟何時(shí)做，如何做，許多人都不太清楚。至于什么時(shí)候需要維護(hù)，什么時(shí)候需要維修，大家也是“蒙查查”。生物通www.ebiotrade。。ｃｏｍ對(duì)于使用離心機(jī)的實(shí)驗(yàn)室而言，這些都是重要的技能。不過，除了偶爾擦擦離心機(jī)，我們并不清楚如何讓離心機(jī)保持在*狀態(tài)?，F(xiàn)在，是時(shí)候補(bǔ)上這一課了。保持清潔生物通www.ebiotrade。。ｃｏｍ離心機(jī)的外部通常是用軟布擦拭，或蘸取中性清潔劑后擦拭。這
					
            
				
            
								
            
					
            蛋白質(zhì)合成蛋白質(zhì)，教科書該改改了吧？2015/01/04
            
					
            
				翻開任何一本生物學(xué)教科書，首先我們要學(xué)習(xí)的就是機(jī)體的DNA可以給出制造蛋白質(zhì)的指令，而蛋白質(zhì)在機(jī)體多種功能的發(fā)揮中扮演著重要的角色。近日，一項(xiàng)刊登于雜志Science上的研究論文中，來自猶他州大學(xué)的研究人員通過研究揭示，制造蛋白質(zhì)的氨基酸可以在沒有DNA指令及信使RNA信息存在的情況下進(jìn)行裝配生成，該研究或?qū)⑿薷慕炭茣袑?duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)生的說法。研究者PeterShen說道，這項(xiàng)研究非常有意義，同時(shí)其也反映出了生物學(xué)領(lǐng)域的博大精深。核糖體是蛋白質(zhì)裝配的機(jī)器，其可以根據(jù)特殊的遺傳代碼將不同的氨基酸連接起
					
            
				
            
								
            
					
            美麗化學(xué)：自己動(dòng)手做天氣瓶2014/12/18
            
					
            
				什么是天氣瓶出現(xiàn)在科幻小說「海底兩*」的神秘氣象球，其實(shí)起源于17世紀(jì)歐洲的天氣預(yù)報(bào)儀器「天氣瓶」，即在密封的玻璃瓶注入蒸餾水、酒精、硝酸鉀、樟腦等混合液，這種液體會(huì)隨著天氣改變面貌的氣象儀，普遍運(yùn)用在19世紀(jì)的航海上。天氣瓶的動(dòng)圖模式材料2.5g硝酸鉀2.5g氯化銨33mL蒸餾水：超市購買就好，建議買常溫的；40mL乙醇（酒精）：濃度有95%和99.9%，2種都可以試試；10g天然樟腦(±)-Camphor：成分里有這么寫就是天然的，通常市面上的樟腦丸都是人工的，一定要天然的，而且據(jù)說天然樟腦
					
            
				
            
								
            
					
            2014Z受歡迎的PCR方法相關(guān)論文2014/12/16
            
					
            
				今天，Biotechniques介紹了2014年在該發(fā)表的5篇zui有趣和zui有用的PCR方法相關(guān)文章。PCR是現(xiàn)代分子生物學(xué)中的一種基本技術(shù)，所以它的任何創(chuàng)新或改進(jìn)都受到研究人員的極大歡迎。BioTechniques的編輯們一直都非常喜歡PCR方法，我們很高興看到，2014年帶來了新技術(shù)的強(qiáng)大選擇。在這里，我們介紹了在過去一年中發(fā)表的5篇PCR方法相關(guān)論文，范圍很廣，從基本老式PCR反應(yīng)有效性和特異性的改進(jìn)，到技術(shù)如數(shù)字PCR。1、一種強(qiáng)大的耐熱DNA聚合酶鏈置換活性可顯著改善DNA擴(kuò)增結(jié)果
					
            
				
            
								
            
					
            冰糖葫蘆原是藥2014/12/12
            
					
            
				“都說冰糖葫蘆兒酸,酸里面它裹著甜;都說冰糖葫蘆甜,可甜里面它透著酸……"這首歌算是把冰糖葫蘆的特點(diǎn)描寫到位：酸酸甜甜就是它！山楂原本是酸酸的，然而經(jīng)過處理裹上冰糖后不僅顏色變得艷麗了，味道也可口了許多。冰糖葫蘆是冬季人們尤其是孩子zui鐘愛的美食之一。天氣漸漸轉(zhuǎn)涼，又到了吃冰糖葫蘆的季節(jié)，還記得小時(shí)候和小伙伴們站在街道上等待著冰糖葫蘆出鍋的情景嗎？眼看著串果、熬糖、蘸糖、冷卻一步步地完成，早已迫不及待，想咬下一顆紅艷艷的冰糖葫蘆。小販們一聲聲的吆喝更是吸引來更多人的注意：“脆香酸甜的冰糖葫蘆,
					
            
				
            
								
            
					
            CHIP心得體會(huì)2014/12/12
            
					
            
				1、cellcounting：盡量做到準(zhǔn)確，會(huì)影響input結(jié)果。2、crosslink：甲醛的終濃度是1%，這個(gè)基本所有的protocol上都會(huì)強(qiáng)調(diào)。3、resuspendcellswithSDS:一定要選用小的tip頭，在液面下吹打，否則很容易產(chǎn)生氣泡，后面的sonication就麻煩了。4、sonication：ChIP中zui重要的一部分，合適的條件要自己摸索，可以一次嘗試不同次數(shù)的sonication，然后建議采用EZ-ChIP上推薦的方法看看sonication的效果如何。5、加入s
					
            
				
            
								
            
					
            蛋白質(zhì)技術(shù)專題：蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（Marker）知識(shí)匯總2014/12/11
            
					
            
				蛋白Marker可分為：一、未預(yù)染的Marker即寬分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)、高分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn);二、預(yù)染的Marker即單色預(yù)染和多色預(yù)染。在westernblot過程中，分子量Marker就像個(gè)螺絲釘一樣沒雖然是個(gè)小細(xì)節(jié)，然而就是這樣一個(gè)小細(xì)節(jié)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著不可忽視的作用。這個(gè)WesternBlot參照家族的一員的作用主要是用來指示蛋白條帶所對(duì)應(yīng)的分子量大小，只有標(biāo)準(zhǔn)量無誤了，實(shí)驗(yàn)結(jié)果才有說服力，除此之外，蛋白標(biāo)準(zhǔn)還有表示轉(zhuǎn)移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用，所以選擇正確的蛋
					
            
				
            
								
            
					
            生物分子類實(shí)驗(yàn)室常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理匯總-92014/12/11
            
					
            
				二十六、雙向凝膠電泳（2-DE）雙向凝膠電泳的原理是*向基于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同用等電聚焦分離，第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復(fù)雜蛋白混合物中的蛋白質(zhì)在二維平面上分開。二十七、mRNA的分離與純化（寡聚(dT)纖維素柱純化mRNA）真核細(xì)胞的mRNA分子zui顯著的結(jié)構(gòu)特征是具有5’端帽子結(jié)構(gòu)（m7G）和3’端的Poly(A)尾巴。絕大多數(shù)哺乳類動(dòng)物細(xì)胞mRNA的3’端存在20-30個(gè)腺苷酸組成的Poly（A）尾，通常用Poly（A+）表示。這種結(jié)構(gòu)為真核mRNA的提取，提供了極
					
            
				
            
								
            
					
            生物分子類實(shí)驗(yàn)室常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理匯總-82014/12/11
            
					
            
				二十五、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）ELISA是一種免疫測(cè)定（immunoassay，IA）?；A(chǔ):抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，由此進(jìn)行定性或定量分析。
					
            
				
            
								
            
					
            生物分子類實(shí)驗(yàn)室常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理匯總-72014/12/09
            
					
            
				二十三、熒光共振能量轉(zhuǎn)移二十四、雙分子熒光技術(shù)
					
            
				
            
								
            
					
            生物分子類實(shí)驗(yàn)室常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理匯總-62014/12/09
            
					
            
				十六、cDNA末端快速擴(kuò)增(rapidamplificationofcDNAends,RACE)技術(shù)cDNA末端快速擴(kuò)增(rapidamplificationofcDNAends,RACE)技術(shù)是一種基于mRNA反轉(zhuǎn)錄和PCR技術(shù)建立起來的、以部分的已知區(qū)域序列為起點(diǎn),擴(kuò)增基因轉(zhuǎn)錄本的未知區(qū)域,從而獲得mRNA(cDNA)完整序列的方法。簡(jiǎn)單的說就是一種從低豐度轉(zhuǎn)錄本中快速增長(zhǎng)cDNA5’和cDNA3’末端，進(jìn)而獲得獲得全長(zhǎng)cDNA簡(jiǎn)單而有效的方法，該方法具有快捷、方便、等優(yōu)點(diǎn),可同時(shí)獲得多個(gè)轉(zhuǎn)
					
            
				
            
								
            
					
            生物分子類實(shí)驗(yàn)室常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理匯總-52014/12/09
            
					
            
				十一、BCA法測(cè)蛋白質(zhì)濃度十二、大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞（E.coliDH5α）制備1、前夜接種受體菌（DH5?或DH10B），挑取單菌落于LB培養(yǎng)基中37℃搖床培養(yǎng)到第二日（約16小時(shí)）；2、取1ml已培養(yǎng)到第二日的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接于100mlLB培養(yǎng)基中，在37℃搖床上劇烈振蕩培養(yǎng)約2.5-3小時(shí)（250-300rpm）；3、將0.1MCaCl2溶液置于冰上預(yù)冷；以下步驟需在超凈工作臺(tái)和冰上操作；4、吸取1.5ml培養(yǎng)好的菌液至1.5ml離心管中，在冰上冷卻10分鐘；5、4℃下3000g冷凍離心5分鐘；
					
            
				
            
								
            
					
            生物分子類實(shí)驗(yàn)室常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理匯總-42014/12/08
            
					
            
				九、RT-PCRRT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增（PCR）相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在*條件下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)步驟：1、RNA的提??；2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA；3、PCR擴(kuò)增；4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。十、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Q—PCR）（Real-timeQuantitativePCR）利用熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR擴(kuò)增反應(yīng)中
					
            
				
            
								
            
					
            生物分子類實(shí)驗(yàn)室常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理匯總-32014/12/08
            
					
            
				七、噬菌體展示技術(shù)噬菌體展示技術(shù)是將外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當(dāng)位置，使外源基因隨外殼蛋白的表達(dá)而表達(dá)，同時(shí),外源蛋白隨噬菌體的重新組裝而展示到噬菌體表面的生物技術(shù)。噬菌體展示技術(shù)是將多肽或蛋白質(zhì)的編碼基因或目的基因片段克隆入噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當(dāng)位置，在閱讀框正確且不影響其他外殼蛋白正常功能的情況下，使外源多肽或蛋白與外殼蛋白融合表達(dá)，融合蛋白隨子代噬菌體的重新組裝而展示在噬菌體表面。被展示的多肽或蛋白可以保持相對(duì)獨(dú)立的空間結(jié)構(gòu)和生物活性，以利于靶分子的識(shí)
					
            
				
            
								
            
					
            生物分子類實(shí)驗(yàn)室常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理匯總-22014/12/08
            
					
            
				六、酵母雙雜交（Y2H）
					
            
				
            
								
            
					
            生物分子類實(shí)驗(yàn)室常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理匯總-12014/12/08
            
					
            
				一、GSTpull-down實(shí)驗(yàn)基本原理:將靶蛋白-GST融合蛋白親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上,作為與目的蛋白親和的支撐物,充當(dāng)一種“誘餌蛋白”,目的蛋白溶液過柱,可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白”(目的蛋白),洗脫結(jié)合物后通過SDS-PAGE電泳分析,從而證實(shí)兩種蛋白間的相互作用或篩選相應(yīng)的目的蛋白,“誘餌蛋白”和“捕獲蛋白”均可通過細(xì)胞裂解物、純化的蛋白、表達(dá)系統(tǒng)以及體外轉(zhuǎn)錄翻譯系統(tǒng)等方法獲得。此方法簡(jiǎn)單易行,操作方便。注：GST即谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(glutathioneS-transf
					
            
				
            
								
            
					
            電泳儀常見故障代碼及處理2014/12/05
            
					
            
				一、EPS-100ErrS：短路、超載。切斷電源后拔掉電泳槽連接線，重新開機(jī)看是否不再報(bào)警，則正常。仍舊報(bào)警則可能芯片損壞，需返修。ErrO：未接負(fù)載。檢查電泳緩沖液濃度是否過低。電泳槽連接線未插好，或接觸不良。怎么弄連接線都弄不好的話返修。二、EPS-200/300/600Er1：輸出電壓超過zui大值。Er2：輸出電流超過zui大值。檢查電泳緩沖液濃度是否過高。電泳儀運(yùn)行時(shí)是否插拔電泳槽。Er3：短路。切斷電源后拔掉電泳槽連接線，重新開機(jī)看是否不再報(bào)警，則正常。仍舊報(bào)警則可能芯片損壞，需返修
					
            
				
            
								
            
					
            Tanon凝膠成像系統(tǒng)的常見問題解答2014/12/05
            
					
            
				1.紫外透射燈箱無法正常使用當(dāng)使用凝膠圖像系統(tǒng)時(shí)，透射紫外無法開啟，請(qǐng)檢查暗箱推門是否合緊，電源開關(guān)是否打開；若開啟后燈不亮，請(qǐng)切斷電源，檢查紫外透射燈箱后方的電源連接線是否松動(dòng)，該儀器的保險(xiǎn)絲是否燒毀。2.機(jī)箱面板失靈判斷計(jì)算機(jī)控制是否正常。3.反射白光燈無法正常使用判斷計(jì)算機(jī)控制是否正常，暗箱板面按鍵是否正常；檢查暗箱內(nèi)反射白燈的連接線是否松動(dòng)。4.電腦無法正常使用判斷是否其他軟件能正常使用；若電腦問題請(qǐng)與電腦提供商聯(lián)想公司。判斷GIS暗箱能否單獨(dú)正常使用；若電腦正常，則需檢查RS232通訊
					
            
				
            
							
				
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