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            產(chǎn)品展廳

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            發(fā)布詢價單

            化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標物>常用實驗試劑>高純有機試劑> 大腸桿菌蛋白表達系統(tǒng)

            大腸桿菌蛋白表達系統(tǒng)

            具體成交價以合同協(xié)議為準

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            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!


            安諾倫(北京)生物科技有限公司是一家創(chuàng)辦于2015年的創(chuàng)新型高科技企業(yè),公司由在國內(nèi)科研試劑領域有著十幾年從業(yè)經(jīng)驗的專業(yè)技術團隊和企業(yè)管理團隊組建而成,專門從事以抗體、蛋白、細胞、化學品為核心的試劑產(chǎn)品研發(fā)與銷售。

            自公司成立以來一直以“客戶至上”為公司核心價值觀,專注于為生命科學和生物技術領域的客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術服務。本著始終擁有的服務熱忱,安諾倫生物致力于成長為我國重要的生命科學試劑和成果轉(zhuǎn)化一體化的前驅(qū)者、致力于成為中國大的科研試劑產(chǎn)品供應商之一。

            Annoron——是安諾倫生物集科研試劑搜索、采購一體化網(wǎng)站平臺,公司通過建立覆蓋歐美的*,與歐美100多個品牌建立了正式的代理與合作,基本涵蓋所有的生物試劑門類,特別是二三線高質(zhì)量品牌產(chǎn)品,優(yōu)勢更大!

            我們的優(yōu)勢:

            1,覆蓋歐美的*,總部設立在美國加州,采購團隊有10多人,能進口涵蓋抗體,蛋白,細胞,血清,耗材等的全門類生物產(chǎn)品。

            2,貨品多且全,目前,以我們美國公司為主體,與歐美100多個品牌建立了正式的代理與合作,基本涵蓋所有的生物試劑門類,特別是二三線高質(zhì)量品牌產(chǎn)品,優(yōu)勢更大!

            3,現(xiàn)貨庫存,我們已經(jīng)在北京和武漢建立了自營庫存,并將逐步建立上海庫存、成都庫存、廣州庫存,目前涵蓋100個門類,將近10000個現(xiàn)貨產(chǎn)品!

            4,期貨提供加急服務,一般2-3周到貨,超過時限加急費全免!

            5,價格優(yōu)勢,依托我們一體化的整合優(yōu)勢,我們致力于提供競爭力的價格!

            6,優(yōu)質(zhì)的信譽,我們的客戶群包括*,清華大學,北京大學,復旦大學,南京大學等100多所大學;康龍化成,昭衍新藥,美迪西,保諾生物,正大天晴等500多家公司!

            我們的產(chǎn)品——

            抗體類

            •       一抗/二抗產(chǎn)品

            •       標記一抗/二抗相關產(chǎn)品

            •       Elisa試劑盒,配對抗體

            •       多種試劑盒,PCR試劑盒,DNA提取試劑盒,RT實時定量試劑盒

            蛋白類

            •       重組蛋白/天然構象蛋白

            •       小分子抗原,細胞因子

            •       多肽類

            分子細胞類

            •       腫瘤細胞/傳代細胞/原代細胞

            •       定制化的耐藥細胞

            •       高品質(zhì)血清

            •       常用培養(yǎng)基,分子細胞實驗試劑

            •       合成引物/載體/質(zhì)粒

            化學品與試劑

            •       化學中間體

            •       化學合成常用試劑

            •       定制中間體合成

            •       對照品/標準品

            •       液相/氣相色譜實驗佐劑

             

            歡迎您來電垂詢,我們竭誠為您服務!

            此致敬禮!

             

            抗體:

            一抗,二抗,標記抗體,流式抗體,抗體血清

            試劑盒:

            Elisa試劑盒,PCR試劑盒,基因敲除試劑盒,Real-Time實時定量試劑盒,STR試劑盒

            蛋白與多肽:

            重組蛋白,天然蛋白,多種肽段,多種屬蛋白和抗原(動植物,細菌,病毒等)

            細胞產(chǎn)品:

            各種細胞株,種屬多元化,細胞類型多樣,腫瘤細胞,干細胞,星狀細胞,傳代細胞,原代細胞等

            酶類:

            內(nèi)切酶,蛋白酶,核酸酶,聚合酶

            克隆/載體:

            PCR克隆載體,細菌/病毒克隆載體,多種屬的表達載體

            血清/培養(yǎng)基:

            細胞實驗常規(guī)培養(yǎng)基,澳洲胎牛血清,北美牛血清,高質(zhì)量細胞實驗相關試劑

            常用試劑:

            對照品以及標準品,免疫組化常用試劑,免疫印跡常用試劑,常用顯色試劑,細胞生物學試劑,氣相色譜試劑,液相色譜試劑等

            化學品:

            產(chǎn)品(提供結構或者CAS化學試劑,中間體,訂制化學)

            引物/探針:

            依據(jù)序列三天支付結果

            脂質(zhì)體:

            常規(guī)產(chǎn)品常年現(xiàn)貨

             

             

            抗體類,蛋白類,分子細胞類,化學品與試劑

            供貨周期 一個月以上 應用領域 生物產(chǎn)業(yè)

            大腸桿菌表達系統(tǒng)簡介

            1. 代謝途徑和基因表達調(diào)控機制比較清楚

             1) 全基因組測序,共有4405個開放性閱讀框架;

             2) 基因克隆表達系統(tǒng)成熟完善;

             3) 繁殖迅速,培養(yǎng)簡單,操作方便,遺傳穩(wěn)定。

            2. 培養(yǎng)周期短

             1) 大腸桿菌繁殖能力強,在營養(yǎng)條件充足時,20~30mins即可繁殖一代;

             2) 大規(guī)模發(fā)酵成本低,具有巨大的生存潛力。

            3. 目標基因表達水平高

             表達水平較一般真核表達系統(tǒng)高,某些外源基因在大腸桿菌中的表達量可達總蛋白的5%~30%。

            4. 遺傳背景清楚

             1) 對大腸桿菌的遺傳背景和生理特性研究相當清楚,已有多種不同的抗藥性、不同營養(yǎng)缺陷型和不同校正突變型的菌株供選擇使用;

             2) 可以根據(jù)不同的載體而選擇不同的菌株。

            5. 抗污染能力強,下游工藝簡單,易于控制。

            6. 已有大量可供選擇利用的表達載體,被美國FDA批準為安全的基因工程受體菌。

            艾柏森生物大腸桿菌表達系統(tǒng)優(yōu)勢

            1. 艾柏森生物大腸桿菌可溶性表達成功率高達95%;

            2. 艾柏森生物可以提供多種大腸桿菌表達載體,pET28b、pET22b、pGEX-6P-1等。

            3. 多種大腸桿菌表達宿主,標準表達菌株BL21,可增強表達蛋白的菌株T7E,表達毒性蛋白的C41,增強蛋白可溶性表達的超低溫菌株Arctic,以及其他經(jīng)過艾柏森生物分子技術團隊改造過的表達菌株,可以滿足客戶的不同需求。

            4. 表達系統(tǒng)的優(yōu)化。通過對表達系統(tǒng)進行優(yōu)化,很大程度上解決蛋白不表達和包涵體的問題,如表達載體與表達菌株相容性測試、誘導表達條件的優(yōu)化、復性等。

            服務組合

            服務項目 (Service Items)周期(周) Time(weeks)
            蛋白分析與密碼子優(yōu)化項目開始前完成
            基因合成2~4
            載體構建1
            基因表達純化測試2
            1L發(fā)酵表達及純化2
            切標簽2
            大規(guī)模的發(fā)酵與純化以項目需要為準
            總計8~10

             

            注:

            1)表達純化測試一般包括2種載體,3種表達菌株,2個表達溫度,12個條件的測試,根據(jù)客戶的前期實驗結果,有可能調(diào)整或縮短試驗周期;

            2)我們可提供的備選優(yōu)化條件如下:

             

            表達載體pET28bpET32apGEX-6p-1pET22bpBADpTrcHis等
            表達菌株ArcticBL21(DE3)OrigamiRosettaT7 Expresss
            表達溫度16℃30℃37℃

             

            經(jīng)典案例

            以某原核蛋白為例:

            1. 優(yōu)化表達體系,包括蘇朱軍、誘導溫度、誘導時間、誘導劑濃度及培養(yǎng)基。

             

            宿主菌誘導溫度誘導時間誘導劑培養(yǎng)基
            T7E,BL21,C41,Arctic30℃/37℃1h/4hIPTG自誘導LB/定制/同位素/自誘導

             

            經(jīng)過3輪優(yōu)化,我們選擇了BL21+pGEX-6p-1組合,并發(fā)現(xiàn)溫度對與目標蛋白的表達影響大,如圖一

             

             

            圖一:融合蛋白小試SDS-PAGE分析圖

            M:ProteinMarker;:誘導前總蛋白;

            2:20℃上清;3:20℃沉淀;4:37℃上清;5:37℃沉淀。

            2. 在確定了表達條件后,我們對蛋白進行了GST瓊脂糖親和層析嘗試純化,如圖二,

             

                  

             

            圖二:GST瓊脂糖親和層析純化SDS-PAGE分析圖

            M:Protein marker;S:上樣;F:流出;1:20mM GSH洗脫組分;

            3. 在確定純化效率可以接受的條件下,我們對蛋白進行了大體積發(fā)酵,并終純化SDS-PAGE分析,如圖三,融合蛋白經(jīng)過純化,SDS-PAGE電泳分析在相應位置出現(xiàn)明顯條帶,表明目的蛋白成功得到了純化。

             

             

             

            圖三:蛋白終純化SDS-PAGE分析圖

            M:Protein marker;1:目的蛋白

            4. 蛋白濃度測定

            采用SK3071 非干擾型蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度為1.06mg/mL,待測樣品體積為10μL,結果如下:

             

             

             

             

            測試1測試2平均值BSAμg
            0.9390.9390.9390
            0.8750.8740.87458
            0.8080.8040.80616
            0.740.7460.74324
            0.6180.6160.61740
            0.8550.8490.85250
            0.8910.8780.8845目的蛋白

            圖四:蛋白濃度測定



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