BD6025 酪an酸解氨酶試劑盒 抗氧
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BD6025
- 產(chǎn)地 北京
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/3/31 9:40:52
- 訪問次數(shù) 45
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/48S |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | BD6025 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | TAL 廣泛存在于植物和微生物中,是苯丙an酸代謝途徑的關(guān)鍵酶之一 |
酪an酸解氨酶（Tyrosine ammonilyase，TAL）試劑盒說明書
微量法 100T/48S
酪an酸解氨酶試劑盒 抗氧
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義
TAL 廣泛存在于植物和微生物中，是苯丙an酸代謝途徑的關(guān)鍵酶之一。TAL 能夠躍過肉桂酸-4-羥基化酶（C4H）直接將酪an酸轉(zhuǎn)化為香dou酸，香dou酸可進(jìn)一步生成白藜蘆醇、柚皮素等具有抗氧化、抗衰老作用的苯bing素類天然產(chǎn)物。
測(cè)定原理：
TAL 能夠分解酪an酸產(chǎn)生香豆酸，使反應(yīng)溶液 333nm 下的吸光度隨反應(yīng)時(shí)間而上升，根據(jù)吸光度的變化率可計(jì)算出 TAL 活性。
組成：
產(chǎn)品名稱 | BD6025-100T/48S | Storage |
提取液：液體 | 100ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 50ml | 4℃ |
試劑二：粉劑 | 2 瓶 | 4℃ |
試劑三：液體 | 5ml | 4℃ |
說明書 | 一份 | |
自備儀器和用品：
酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96 孔板（UV 板）、研缽、冰和蒸餾水
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、血清（漿）果汁等液體樣品：直接檢測(cè)。
測(cè)定操作表：
1、酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 333nm。
2、準(zhǔn)備 96 孔 UV 板一塊（非普通酶標(biāo)板，普通酶標(biāo)板只能透過可見光，不能透過紫外光，檢測(cè)波長(zhǎng)小于 340nm 務(wù)必使用 UV 板）。
3、試劑二的配置：臨用前在試劑二瓶中加入 10ml 試劑一充分溶解待用（用不完的試劑 4℃保存一周，注意現(xiàn)配現(xiàn)用），在 37℃（哺乳動(dòng)物）或 25℃（其它物種）水浴 10min 以上。
4、在 EP 管中依次加入如下試劑
試劑名稱（μl） | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 |
樣本上清 | 40 | 40 |
試劑一 | 360 | |
試劑二 | 360 | |
充分混勻，40℃保溫 60min | ||
試劑三 | 20 | 20 |
混勻，10000g 4℃離心 5min，取 200μl 上清至 96 孔 UV 板，333nm 下測(cè)定吸光值 A 測(cè)定與 A 對(duì)照，
ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照
TAL 活性計(jì)算：
1、血清（漿）或果汁 TAL 活性
單位的定義：每分鐘每 ml 血清（漿）或果汁在每 ml 反應(yīng)體系中使 333nm 處吸光值變化
0.005 為一個(gè)酶活力單位。
TAL（U/ml）=ΔA×V 反總÷( V 樣÷V 樣總)÷0.005÷T =35×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞 TAL 活性
按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位定義：每分鐘每 mg 組織蛋白在每 ml 反應(yīng)體系中使 333nm 處吸光值變化 0.005 為一個(gè)酶活力單位。
TAL（U/mg prot）=ΔA×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷0.005÷T =35×ΔA÷Cpr
此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。
按樣本鮮重計(jì)算：
單位定義：每分鐘每 g 組織在每 ml 反應(yīng)體系中使 333nm 處吸光值變化 0.005 為一個(gè)酶活力單位。
TAL（U/g 鮮重）=ΔA×V 反總÷(W× V 樣÷V 樣總)÷0.005÷T =35×ΔA÷W
按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位定義：每分鐘每 1 萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每 ml 反應(yīng)體系中使 333nm 處吸光值變化 0.005 為一個(gè)酶活力單位。
TAL（U/104 cell）=ΔA×V 反總÷(500×V 樣÷V 樣總)÷0.005÷T =0.07×ΔA
V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.42ml；V 樣：加入樣本體積，0.04ml；V 樣總：加入提取液體積，1 ml； T：反應(yīng)時(shí)間，60 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500萬。
酪an酸解氨酶試劑盒 抗氧
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