BI6018 α-葡萄糖苷酶試劑盒 糖代謝系列-常備現(xiàn)貨
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BI6018
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/4/10 15:16:16
- 訪問次數(shù) 18
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/24S |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | BI6018 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | α-葡萄糖苷酶試劑盒 |
α-葡萄糖苷酶（α-Glucosidase, α-GC）試劑盒說(shuō)明書
分光光度法 50 管/24 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：
α-GC(EC 3.2.1.20)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化水解芳基或烴基與糖基之間的α-糖苷鍵生成葡萄糖，不僅與細(xì)胞壁的松弛或加固有關(guān)，而且與細(xì)胞識(shí)別和一些信號(hào)分子產(chǎn)生密切相關(guān)。
測(cè)定原理：
α-GC 分解對(duì)-硝基苯-α-D 吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基ben酚，后者在 400nm 有最大吸收峰，通過測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算α-GC 活性。
α-葡萄糖苷酶試劑盒 糖代謝系列-常備現(xiàn)貨
組成：
產(chǎn)品名稱 | BI6018-50T/24S | Storage |
提取液：液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一：粉劑 | 2 瓶 | -20℃ |
試劑二：液體 | 25ml | 4℃ |
試劑三：液體 | 50ml | 4℃ |
說(shuō)明書 | 一份 | |
試劑一：粉劑×2 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入 10ml 蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑仍-20℃保存。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；15000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。15000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 400nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表
試劑名稱（μl） | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 |
試劑一 | 400 | |
蒸餾水 | 400 | |
試劑二 | 500 | 500 |
樣本 | 100 | 100 |
充分混勻，放入 37℃準(zhǔn)確水浴 30min 后，立即放入 95℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻后充分混勻（以保證濃度不變），8000g，4℃，離心 5min，取上清液
上清液 | 500 | 500 |
試劑三 | 1000 | 1000 |
充分混勻，室溫靜置 2min 后， 400nm 處測(cè)定吸光值A，計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
α-GC 活力計(jì)算：
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y =0.00543x -0.0027；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（nmol/ml），y 為吸光值。
（1） 按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg 組織蛋白每分鐘產(chǎn)生 1nmol 對(duì)-硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。
α-GC 活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V 反總]÷(V 樣×Cpr)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷Cpr
需要另外測(cè)定，建議使用本公司BCA 蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。
（2） 按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g 組織每分鐘產(chǎn)生 1nmol 對(duì)-硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。
α-GC 活力(nmol/min /g 鮮重)＝[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷W
（3） 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位的定義：每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生 1nmol 對(duì)-硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。
α-GC 活力(nmol/min /104 cell)=[(ΔA+0.0027) ÷0.00543×V 反總]÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T
=0.123×(ΔA +0.0027)
V 反總：反應(yīng)體系總體積，1ml；V 樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.1ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；
Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g； 500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500 萬(wàn)；T：反應(yīng)時(shí)間，30min。
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