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            上海乾思生物科技有限公司

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            白介素-7 ELISA KIT?

            參   考   價:面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號:

            品       牌:其他品牌

            廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

            所  在  地:上海市

            更新時間:2025-03-11 12:59:52瀏覽次數(shù):600

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            供貨周期 一個月 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥
            白介素-7 ELISA KIT?采用雙抗體夾心 ELISA 法,能精準定量血清等樣本中的白介素 - 7,操作便捷,廣泛應(yīng)用于免疫學等科研領(lǐng)域 。

            白介素-7 ELISA KIT

            白介素-7 ELISA KIT是科研中常用的檢測工具,用于定量測定生物樣本中的白介素 - 7 含量。白介素 - 7 是由 IL-7 基因編碼的 25kDa 大小的可溶性分泌蛋白,屬于造血因子家族,在淋巴細胞的分化、增殖和存活中發(fā)揮關(guān)鍵作用。該試劑盒能助力相關(guān)疾病機制研究、藥物研發(fā)等工作。


            1. 試劑盒組成

              • 酶聯(lián)板:96 孔或 48 孔,已預包被抗 IL-7 抗體,作為反應(yīng)的載體 。

              • 標準品:通常為凍干品,一般有 2 瓶。臨用前需使用標準品稀釋液進行復溶,并稀釋成不同濃度梯度,如 0、15.6、31.2、62.5、125、250、500、1000 pg/mL 等,用于繪制標準曲線 。

              • 樣本xi釋液:用于稀釋濃度過高的待測樣本,確保其濃度處于試劑盒的有效檢測范圍內(nèi) 。

              • 酶標抗體:即 HRP 標記的抗 IL-7 抗體,為濃縮液,使用時需按照要求用酶標抗體稀釋液進行稀釋 。

              • 酶標抗體稀釋液:專門用于稀釋酶標抗體 。

              • 底物溶液:如 TMB 底物,可與酶標抗體中的 HRP 發(fā)生反應(yīng),從而產(chǎn)生顏色變化 。

              • 洗滌液:一般為濃縮液,使用時需按特定比例用蒸餾水或去離子水稀釋,用于洗滌酶聯(lián)板,去除未結(jié)合的物質(zhì),有效降低背景干擾 。

              • 終止液:多為強酸溶液(如硫酸),用于終止底物的顯色反應(yīng),使反應(yīng)液顏色穩(wěn)定,便于后續(xù)讀數(shù) 。

              • 封板膜:用于在溫育過程中覆蓋酶聯(lián)板,防止液體蒸發(fā)和外界污染 。

              • 使用說明書:詳細介紹試劑盒的使用方法、注意事項、性能指標等 。

            2. 樣本要求

              • 血清:采集血液后,室溫放置 2 小時或 4℃過夜,隨后以 1000×g 離心 20 分鐘,小心吸取上清液備用。采血應(yīng)使用無熱原、無內(nèi)毒素的一次性器材 。

              • 血漿:可用乙二胺四乙酸(EDTA)、肝素等作為抗凝劑。樣本采集后 30 分鐘內(nèi),在 2 - 8℃下以 1000×g 離心 15 分鐘,取上清 。

              • 細胞培養(yǎng)上清:將細胞培養(yǎng)上清以 1000×g 離心 20 分鐘,去除細胞碎片和雜質(zhì)后,取上清用于檢測 。

              • 組織勻漿:用預冷的磷酸鹽緩沖液(PBS,0.01M,pH = 7.4)沖洗組織,che底去除殘留血液。剪碎組織后,按照約 1:9(w/v)的比例加入 PBS,在冰上充分研磨。再經(jīng) 5000×g 離心 5 - 10 分鐘,取上清用于檢測 。

              • 樣本采集后若在短期內(nèi)進行檢測,可保存于 4℃;若需長時間保存,需置于 - 20℃或 - 80℃凍存,且要避免反復凍融,溶血樣本一般不適合用于檢測 。

            3. 操作流程

              • 準備工作:從冰箱取出試劑盒,提前 30 分鐘使其平衡至室溫。同時,將濃縮洗滌液按要求比例用蒸餾水或去離子水稀釋備用 。

              • 加樣:設(shè)置空白孔、標準品孔和樣本孔。空白孔加入樣本xi釋液,標準品孔加入不同濃度的標準品,樣本孔加入處理好的樣本,每孔加樣量通常為 100μL,輕輕混勻,37℃溫育 90 分鐘 。

              • 洗滌:溫育結(jié)束后,棄去孔內(nèi)液體,用洗滌液加滿各孔,浸泡 1 - 2 分鐘后甩干,重復洗滌 5 次,確保che底洗凈未結(jié)合物質(zhì) 。

              • 加酶標抗體:每孔加入 100μL 稀釋好的酶標抗體工作液,37℃溫育 60 分鐘 。

              • 再次洗滌:重復上述洗滌步驟 。

              • 顯色:每孔加入 90μL 底物溶液,輕輕混勻,37℃避光顯色 15 - 30 分鐘(需根據(jù)實際顯色情況判斷) 。

              • 終止反應(yīng):每孔加入 50μL 終止液,此時溶液顏色由藍色變?yōu)辄S色 。

              • 讀數(shù):在加終止液后 15 分鐘內(nèi),用酶標儀在 450nm 波長處測量各孔的吸光度(OD 值) 。

              • 計算結(jié)果:以標準品濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,繪制標準曲線。根據(jù)樣本的 OD 值從標準曲線中查出對應(yīng)的濃度,若樣本進行了稀釋,需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),從而得到實際濃度 。

            4. 性能指標

              • 檢測范圍:不同試劑盒有所差異,常見的檢測范圍為 15.6 - 1000 pg/mL 等區(qū)間,可滿足多種樣本中 IL-7 含量的檢測需求 。

              • 靈敏度:一般可低至 7.8 pg/mL 甚至更低,能夠檢測到樣本中微量的 IL-7 。

              • 特異性:對 IL-7 具有高度特異性,與其他細胞因子等物質(zhì)幾乎無交叉反應(yīng) 。

              • 重復性:板內(nèi)變異系數(shù)一般小于 10%,板間變異系數(shù)小于 15%,保證了檢測結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性 。


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