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            目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖原系列>> 糖原合成酶(GCS)生化檢測(cè)試劑盒

            糖原合成酶(GCS)生化檢測(cè)試劑盒
            • 糖原合成酶(GCS)生化檢測(cè)試劑盒
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            參考價(jià)300-5000/盒
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            參考價(jià):¥300 ~ ¥5000

            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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            • 上海市 所在地

            更新時(shí)間:2024-11-22 13:25:23瀏覽次數(shù):1137評(píng)價(jià)

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            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣 50管/48樣
            貨號(hào) EY-01S1377 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
            主要用途 僅用于科研
            糖原合成酶(GCS)生化檢測(cè)試劑盒GCS(EC 2.4.1.11)催化UDPG和糖殘基生成糖原和UTP,以α-1,4-糖苷鍵相連延長(zhǎng)糖鏈,是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶,是胰島素作用的主要靶酶,對(duì)糖代謝的調(diào)節(jié)和血糖穩(wěn)態(tài)的維持具有重要作用。

            9.png

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號(hào)

            糖原合成酶(GCS)生化檢測(cè)試劑盒

            100/96 50/48   

            EY-01S1377

             

            10.png

            測(cè)定意義:

            GCSEC 2.4.1.11)催化UDPG和糖殘基生成糖原和UTP,以α-1,4-糖苷鍵相連延長(zhǎng)糖鏈,是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶,是胰島素作用的主要靶酶,對(duì)糖代謝的調(diào)節(jié)和血糖穩(wěn)態(tài)的維持具有重要作用。

            測(cè)定原理:

            GCS催化UDPG和糖殘基生成糖原和UTP,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測(cè)定NADH下降速率,即可反映GCS活性。

            需自備的儀器和用品:

            分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

            11.png

            試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

            試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

            試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現(xiàn)配現(xiàn)用。

            試劑四:液體×1支,4℃保存。

            12.png

            1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè)。

            2、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測(cè)。

            3、血清等液體:直接測(cè)定。

            14.png

            (1)按照蛋白濃度計(jì)算

            活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

            ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

            =1608×△÷Cpr

            (2)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

            活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

            ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

            =1608×△A÷W

            (3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

            活性單位定義:25℃中每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

            ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T

            =1608×△A ÷細(xì)胞數(shù)量13.png

            (4)按液體體積計(jì)算

            活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

            ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

            =1608×△A

            ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應(yīng)體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1min。

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