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            島津企業(yè)管理(中國)有限公司

            一文讀懂阿膠定量“新標準”

            時間:2020-4-7 閱讀:493
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            導語

            古語云“阿膠一碗,芝麻一盞,白米紅餡蜜餞。粉腮似羞,杏花春雨帶笑看。潤了青春,保了天年,有了本錢”。阿膠能補血滋陰、潤燥止血,自古為滋補上品。

             

             

             

            阿膠系驢皮經(jīng)煎煮濃縮成的固體膠。近年來,隨著驢皮貨源緊缺,市面上存在不法商販弄虛作假,以次充好,以牛皮、馬皮等下腳料冒充驢皮制作假冒偽劣阿膠的行徑,嚴重擾亂了阿膠市場。其他獸畜皮熬膠,也有補血止血的功能,但阿膠偽品的蛋白質成分及其含量和阿膠真品存在明顯不同,與驢皮膠使用效果相差甚遠。因此,掌握阿膠的真?zhèn)舞b別方法至關重要。

             

             

             

            為了進一步規(guī)范阿膠產(chǎn)業(yè)發(fā)展,提升阿膠品質保障能力,國家藥典委在2019年發(fā)布關于“關于阿膠、海龍、海馬等國家藥品標準修訂草案的公示”和“關于阿膠國家藥品標準修訂草案的公示(第二次)”兩項公示稿,分別對阿膠【含量測定】和阿膠【鑒別】項下內(nèi)容進行了修訂。其中阿膠【含量測定】項修訂幅度大,新增了“特征多肽”含量要求:

             

             

            驢源多肽A1特征離子對:m/z469.25>712.30和m/z z469.25>783.40,

            驢源多肽A2特征離子對:m/z618.35> 779.40和m/z618.35> 850.40,

            按干燥品計算,“含特征多肽以驢源多肽A1(C41H68N12O13)和驢源多肽A2(C51H82N18O18)的總量計應不得少于0.17%”。

             

            此外,在2012年藥典委頒布了《阿膠中牛皮源質量的補充檢驗方法》。2015版《中國藥典》中,明確規(guī)定使用液相色譜-串聯(lián)質譜法用于阿膠、龜甲膠、鹿角膠的鑒別。近,國家藥監(jiān)局還頒布了《阿膠中豬皮源的補充檢驗方法》,在阿膠產(chǎn)品中應不得檢出豬皮源(新阿膠)成分。

             

             

            島津參考以上標準和文獻報道,使用胰蛋白酶對阿膠、牛皮膠和豬皮膠等不同來源的明膠類物質進行酶切處理,通過島津LCMS-8045液相色譜質譜聯(lián)用儀(圖1)對特征多肽進行測定,從而實現(xiàn)阿膠與雜皮膠的鑒別與阿膠的定量。

             

             

             1 島津 LCMS-8045液相色譜質譜聯(lián)用儀

             

            主要方法參數(shù)

             

            色譜柱:

            Shim-pack GIST (2.1 mm I.D.×100 mm L., 2.0 μm)

            MRM參數(shù):見表1

             

            1 MRM優(yōu)化參數(shù)

             

             

            對照藥材分析

             

            采用超高效液相色譜-質譜聯(lián)用的方法,一次進樣,同時分析8種特征多肽,實現(xiàn)阿膠藥材的鑒別與定量。分析結果表明,阿膠、驢源多肽A1、驢源多肽A2、黃明膠、鹿角膠、龜甲膠、新阿膠、馬皮源多肽信噪比均大于10:1,*檢測要求。如下圖2(左右滑動查看全部內(nèi)容)

             

             

             

             

              

            2 阿膠等8種特征肽定性色譜圖

             

            樣品測定

             

            對阿膠樣品進行測定,黃明膠、鹿角膠、龜甲膠、新阿膠、馬皮源通道均未檢出;阿膠、驢源多肽A1、驢源多肽A2分離良好,峰形對稱,且信噪比均大于10:1。如下圖3(左右滑動查看全部內(nèi)容)

             

             

             

            3   阿膠定性定量肽段測量

             

            總結

             

            阿膠作為滋補佳品,消費者平時關注更多的是阿膠的功效。其實,無數(shù)“實驗猿”為了保證阿膠的真實與有效,默默地完成了大量阿膠藥材真?zhèn)舞b別與含量測定的工作。有了本文的方法,“實驗猿”可以一針進樣鑒別多種肽段,節(jié)省時間。除此之外,本方法加入了定量肽段,可以實現(xiàn)定性定量同時分析。

             

             

             

             

             

            更多關于阿膠的小知識參見:

             

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            參考文獻

            [1]  阿膠的【鑒別】(2015版藥典第一部,189頁)

            [2]  龜甲膠的【鑒別】(2015版藥典第一部,181頁)

            [3]  鹿角膠的【鑒別】(2015版藥典第一部,322頁)

            [4]  阿膠中豬皮源成分檢查項補充檢驗方法(BJY 201917)

            [5]  阿膠中牛皮源質量的補充檢測方法(中檢院2012年標準)

            [6]  阿膠【含量測定】公示稿

            [7]  阿膠【鑒別】公示稿

            [8] 杭寶建, 等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質譜法測定阿膠中馬、牛、羊、豬、駱駝、鹿皮源成分[J]. 色譜, 2018(4):408-412.

             

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