尿調(diào)素-慢性的有效標(biāo)志之一

尿調(diào)素（Uromodulin）是一個(gè)由UMOD基因編碼的糖蛋白，是哺乳動(dòng)物正常人體尿液中含量zui高的蛋白，主要來自哺乳動(dòng)物腎臟亨氏袢。

尿調(diào)素單體的分子量約為85kDa, 它有幾種不同的異構(gòu)體。尿調(diào)素在尿液中以聚集體的形式存在，所以分子量可以達(dá)到幾百萬道爾頓。當(dāng)pH低時(shí)，可析出形成凝膠。

針對(duì)尿調(diào)素分別進(jìn)行了序列分析、選取Glu28~Glu149進(jìn)行基因克隆和蛋白表達(dá)，獲得尿調(diào)素的重組蛋白，。用該蛋白作為免疫原分別免疫小鼠和兔后，獲得了單克隆抗體和多克隆抗體，以及生物素標(biāo)記的多克隆抗體PAG918Hu71。這些抗體可用于WB、ICC、IHC-P、IHC-F、ELISA等實(shí)驗(yàn)中。

利用已經(jīng)獲得的抗體，進(jìn)行抗體配對(duì)，選取組裝成試劑盒的抗體組裝成試劑盒。試劑盒可用來檢測(cè)不同生物樣本中UMOD的含量。

現(xiàn)在研究表明，尿調(diào)素與妊娠、慢性腎臟疾病等都有重要關(guān)系，不孕和流產(chǎn)的婦女尿中UrM水平顯著高于正常人。故常見研究UMOD采用的樣本為尿液和精液。尿液和精液的處理辦法如下：

尿液樣本的處理方法：請(qǐng)收集清晨*次尿液（中段尿），或24小時(shí)尿液，2000×g離心15分鐘后收集上清，并將標(biāo)本保存于-20oC，且應(yīng)避免反復(fù)凍融。

精漿：精液標(biāo)本收集于無菌容器中，室溫或37oC水浴箱中液化。待精液*液化后，將精液 4000 rpm離心10 min分離精漿。

處理好樣本后可進(jìn)行上樣。以下是采用試劑盒測(cè)的的檢測(cè)數(shù)據(jù)，樣本包括尿液樣本和精液樣本。請(qǐng)見數(shù)據(jù)。

樣本采用的是100倍稀釋，采用雙標(biāo)曲。

檢測(cè)原始數(shù)據(jù)OD(450nm-630nm）如下：

實(shí)驗(yàn)室的樣本背景不詳，但體現(xiàn)出對(duì)于樣本良好的檢出性。同時(shí)復(fù)孔質(zhì)檢的差異小，標(biāo)曲線性高于99%。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及各方數(shù)據(jù)表明了試劑盒的高質(zhì)量。而臨床對(duì)Uromodulin許多方面的功能有待進(jìn)一步研究，.研發(fā)的蛋白、抗體以及Elisa試劑盒對(duì)Uromodulin的研究提供了必要的生物手段。