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            上海谷研實業(yè)有限公司
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            當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞系>> BRL 3A (大鼠肝細胞)

            BRL 3A (大鼠肝細胞)

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號

            品       牌R&D/美國

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2022-04-06 14:09:15瀏覽次數(shù):185次

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            供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 GOY-01X0036
            應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
            BRL 3A (大鼠肝細胞)公司其它各種產(chǎn)品0酸化形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體 熱休克蛋白-22抗體
            0酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 熱休克蛋白-20抗體
            雙同源框蛋白4抗體 熱休克蛋白10抗體
            DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體 熱休克蛋白105抗體
            MAP激酶激活死亡域蛋白2C抗體 染色質(zhì)組裝因子1P55抗體

            產(chǎn)品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            BRL 3A (大鼠肝細胞)

            規(guī)格

            1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

            貨號

            GOY-01X0036

            名稱    BRL 3A (大鼠肝細胞) (種屬鑒定正確)
            別稱 BRL3A; BRL 3A; Buffalo Rat Liver-3A

            種屬 大鼠

            年齡(性別) 不詳

            組織來源

            生長特性 貼壁細胞

            細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

            背景描述 BRL 3A細胞的無血清條件培養(yǎng)基是MSA的一個來源,MSA多肽家族能夠部分滿足雞胚成纖維細胞對血清的需求。

            生物安全等級 1

            生長培養(yǎng)基 MEMATCC改良)10% FBS1% P/S

            推薦傳代比例 1:3-1:4

            推薦換液頻率 2~3/

            凍存條件

            凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

            溫度:液氮

            培養(yǎng)條件

            氣相:空氣,95%;CO2,5%

            溫度:37

            基因表達情況 Somatomedin like multiplication stimulating activity (MSA)

            保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1442 BCRC; 60218 ECACC; 85111503

            圖片13.jpg

            冷凍保存細胞之方法?
            冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
            冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
            培養(yǎng)操作:
            1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
            2
            )細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
            1.
            棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
            2.
            1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
            3.
            6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
            4.
            將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3
            )細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
            1.
            細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
            2. 4 min 1000rpm
            離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
            3.
            將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
            實驗報告:
            產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
            1
            、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
            2
            、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
            3
            、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
            4
            、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
            5
            、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
            二、免疫熒光鑒定:
            1
            、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
            2
            、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
            3
            、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min
            4
            、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
            5
            、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
            6
            、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
            紡綞形賴酸芽孢桿菌   健強地霉

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            大鼠白介素8受體β(IL8Rβ)elisa檢測試劑盒

            大鼠白介素8受體α(IL8Rα)elisa檢測試劑盒

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            大鼠白介素7(IL7)elisa檢測試劑盒
            BRL 3A (
            大鼠肝細胞)蛋白印跡膜再生液 100ml

            蛋白印跡膜再生液( Stripping Buffer)100ml

            蛋白印跡膜再生液( Stripping Buffer)500ml

            蛋白質(zhì)羰基測試盒

            蛋白質(zhì)羰基測試盒測血清、組織 100/50 50/25 紫外比色法


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