我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細胞株說明書信息，我們專業(yè)您的細胞系實驗，讓您實驗再無煩擾！

名稱    293 [HEK-293] (人胚腎細胞)  (STR鑒定正確)

別稱    Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293

種屬    人類

組織來源    胚胎腎；以腺病毒5DNA進行轉(zhuǎn)化

生長特性    貼壁細胞

細胞形態(tài)    上皮細胞樣

背景描述    293 [HEK-293]細胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞形成的永生化細胞，293 [HEK-293]細胞包含并表達轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報道中指出，293 [HEK-293]細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主，可表達異常的玻連蛋白的細胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。

生物安全等級    2

生長培養(yǎng)基    MEM(PM150467 ATCC改良)＋10% FBS(164210-500)＋1% P/S(PB180120)

推薦傳代比例    1:3-1:4

推薦換液頻率    2~3次/周

倍增時間    ~24-30小時

凍存條件    凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮

培養(yǎng)條件    氣相：空氣，95%；CO?，5%溫度：37℃

致瘤性    Yes, forms tumors in nude mice.

受體表達情況    vitronectin

注意事項    該細胞貼壁松散，操作時請盡量輕柔；換液時需預(yù)熱培養(yǎng)基；收貨如有大塊脫落的細胞團，為正?，F(xiàn)象，請按照收貨注意事項處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。

使用方法：

收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

病毒H5N1亞型(AIV-H5N1)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)    48T

毒H7亞型(AIV-H7)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)    48T

毒H7亞型(AIV-H7)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)    48T

亞型(AIV-H9)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)    48T

亞型(AIV-H9)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)    48T

新城疫病毒(NDV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)    48T

新城疫病毒(NDV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)    48T

禽白血病病毒(ALV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)    48T

禽白血病病毒(ALV)核酸檢測試劑盒    48T

禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)    48T

禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)    48T

鴨瘟病毒(DPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)    48T

鴨瘟病毒(DPV)核酸檢測試劑盒    48T

產(chǎn)品名稱    規(guī)格

口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)    48T

口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)    48T

口蹄疫病毒Asia-1亞型(FMDV-A1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)    48T

口蹄疫病毒Asia-1亞型(FMDV-A1)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)    48T

載脂蛋白C3抗體

載脂蛋白E4抗體

自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體

磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體

磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體

磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體

磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體

脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體

磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體

磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體

磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體

乙酶抗體

磷酸化乙酶抗體

磷酸化Ack1抗體

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

293 [HEK-293] (人胚腎細胞)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體

磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

磷酸化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。